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汉黄芩素抑制IGF-1促乳腺癌细胞增殖与ERα的关系及其对血管新生和机体免疫功能的影响

作　者: 马兴
导　师: 谢明杰
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 汉黄芩素乳腺癌雌激素受体α 胰岛素样生长因子-1
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年递增,严重威胁女性健康。汉黄芩素(Wogonin)是一种来源于纯天然中草药的黄酮类化合物,本实验室前期的研究结果显示,Wogonin对乳腺癌具有显著的抑制作用,其作用的机制主要是通过阻断IGF-1介导的信号转导通路来实现的。近年来的研究显示,IGF-1R受体与ERα之间存在着一定的关系,ERα在IGF-1信号转导通路中占有重要的作用。但汉黄芩素体外抑制IGF-1的促乳腺癌细胞增殖作用与ERα之间的关系目前尚无相关的研究。因此本文对汉黄芩素的抗乳腺癌作用与ERα之间的的关系进行了研究。此外本文还对汉黄芩素抑制新生血管生成作用、机体免疫功能的影响及毒性进行了研究。结果如下：1.采用MTT比色法,检测汉黄芩素抑制IGF-1促MCF-7细胞增殖作用与ERα的关系。结果显示,与IGF-1组相比,IGF-1+WO+ICI组、IGF-1+WO组和IGF-1+ICI组细胞存活率显著下降,IGF-1+WO+ICI组、IGF-1+WO组和IGF-1+ICI组之间的细胞存活率变化不显著,说明汉黄芩素能显著抑制IGF-1促细胞增殖作用,其抑制的作用与ERα有关。2.采用Western blotting方法,检测汉黄芩素体外抗MCF-7细胞作用对IGF-1通路和ERα的关系中ERα蛋白和p-Akt蛋白表达的影响。结果显示,与IGF-1组相比,IGF-1+WO+ICI组、IGF-1+WO组和IGF-1+ICI组MCF-7细胞内ERα蛋白和p-Akt蛋白的表达水平均显著下降,IGF-1+WO+ICI组、IGF-1+ICI组和IGF-1+WO组MCF-7细胞内ERα蛋白和p-Akt蛋白的表达水平均无显著差异。说明汉黄芩素是以ERα依赖的方式来发挥其抑制IGF-1介导的PI3K-Akt信号通路,从而发挥其抗乳腺癌作用的,ERα是汉黄芩素发挥抗乳腺癌作用的靶点之一。3.采用孵育6日龄的种蛋制备CAM模型检测不同浓度汉黄芩素组对新生血管抑制作用。结果显示,汉黄芩素对鸡胚尿囊膜的血管生成有显著抑制效果。4.采用MTT法,检测汉黄芩素体外对T淋巴细胞的促增殖作用。结果显示,汉黄芩素对T淋巴细胞有明显促增殖作用,在60μmol/L浓度下,T淋巴细胞相对增殖率是DMSO组的1.23倍,并具浓度依赖性。5.采用吞噬中性红法,检测汉黄芩素体外对巨噬细胞的促吞噬中性红作用。结果显示,汉黄芩素对巨噬细胞吞噬中性红有显著的促进作用,在60μmol/L浓度下,巨噬细胞相对吞噬率是DMSO组的5.7倍,效果最明显。6.采用急性口毒实验、微核实验、精子畸形实验、体外溶血实验,对汉黄芩素进行毒性检测。结果显示,在本实验条件下,上述实验结果全部是阴性,进而说明汉黄芩素属于无毒级安全性较高的中药抗癌药物。

汉黄芩素抑制IGF-1促乳腺癌细胞增殖与ERα的关系及其对血管新生和机体免疫功能的影响

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