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过氯酸铵对甲状腺细胞毒作用机制的研究

作　者: 刘琴
导　师: 彭开良
学　校: 华中科技大学
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 过氯酸铵甲状腺细胞细胞存活率凋亡氧化损伤甲状腺球蛋白
分类号: R581
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：过氯酸铵(Ammonium Perchlorate, AP)被广泛用于军事工业及民用化工行业，易于通过呼吸道进入作业人员体内，影响作业人员健康。研究表明AP可抑制甲状腺细胞摄取合成其激素的原料碘，从而抑制甲状腺正常功能，造成对人体健康的危害。本研究旨在通过对体外培养的人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1进行染毒，探讨AP对甲状腺细胞的毒作用机制，为预防和控制AP对作业人员的职业危害提供理论依据。方法：培养人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1于5%CO2，37℃二氧化碳培养箱，待细胞生长至对数生长期，接种细胞至培养板继续培养。培养板内细胞进入对数期后，分别给予AP剂量为0、5、10、20、40、60mmol/L的培养液进行染毒，并于一定时间后，观察细胞形态学变化，收集培养的细胞和培养上清液做以下指标测定：用噻唑蓝比色法（MTT法）测定细胞存活率，用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平，用流式细胞技术检测法测定细胞凋亡率，用酶联免疫吸附试验测定甲状腺球蛋白(Tg)浓度。结果：随着AP染毒剂量的增加，各AP染毒剂量组细胞较对照组细胞贴壁能力减弱，脱落并悬浮于培养液中的悬浮细胞增多，细胞密度降低，体积缩小，形状由长梭形渐变为圆形或不规则形；而对照组细胞未见以上异常变化。AP60mmol/L剂量作用于细胞12h、24h、48h、72h时，细胞存活率分别为74.93%、42.26%、2.66%、0.99%，AP40mmol/L剂量作用于细胞24h、48h、72h时，细胞存活率分别为73.15%、30.91%、3.03%，各剂量组均较对照组(100%)显著降低（P<0.05或P<0.01）。细胞培养液中LDH活力随AP染毒剂量的增加而增大，40mmol/L剂量组细胞培养液中LDH活力为0.70U/mL，较对照组(0.55U/mL)显著升高(P<0.01)。细胞凋亡率随AP染毒剂量的增加而增大，10、20、40、60mmol/L剂量组细胞总凋亡率分别为23.04%、24.27%、24.40%、33.50%，较对照组(15.66%)显著增加(P<0.01)；20、40、60mmol/L剂量组细胞早期凋亡率分别为15.70%、15.84%、16.96%，较对照组(9.54%)显著增加（P<0.05或P<0.01）；60mmol/L剂量组细胞晚期凋亡率为16.54%，较对照组(6.11%)显著增加(P<0.01)。随着AP染毒剂量的增加，各剂量组细胞培养液中MDA含量有降低的趋势，与对照组(2.36nmol/mL)相比，仅5mmol/L剂量组(1.08nmol/mL)差异有统计学意义(P<0.05)；各剂量组细胞培养液中SOD活力与对照组相比无明显变化(P>0.05)；各剂量组细胞培养液中Tg浓度有降低的趋势，但与对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：本研究通过人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1体外培养，显示AP可造成人甲状腺细胞形态变化、细胞存活率下降及细胞培养液中LDH活力升高，并可诱导人甲状腺细胞发生凋亡，说明AP对人甲状腺细胞具有毒性作用，可引起人甲状腺细胞损伤。

全文目录

中英文缩略词表  6-7
摘要  7-9
Abstract  9-11
前言  11-12
材料和方法  12-22
结果  22-30
讨论  30-35
小结  35-36
参考文献  36-40
综述  40-55
  参考文献  51-55
附录硕士期间参与的科研、教学工作  55-56
致谢  56

过氯酸铵对甲状腺细胞毒作用机制的研究

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