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NF-κB介导端粒酶激活在DEN致慢性肝损伤大鼠中的作用及氟非尼酮治疗研究
作 者: 邓珍珍
导 师: 刘世坤
学 校: 中南大学
专 业: 药学
关键词: 慢性肝损伤 二乙基亚硝胺 AKF-PD 端粒酶 机制
分类号: R575
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
目的:探讨NF-κB介导二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠慢性肝损伤端粒酶活性变化与氟非尼酮(AKF-PD)治疗作用的关系。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、DEN模型组和AKF-PD治疗组(每组n=20)。对照组和DEN组分别按体质量1Omg/kg给予生理盐水和0.2%DEN溶液灌胃,每周连续5天,共14周;AKF-PD治疗组从造模的第5周开始每天以AKF-PD500mg/kg灌胃至第16周。分别于造模第5、9、13、16周随机选取各组大鼠3只,取全血并进行肝细胞的提取,同时取部分右叶肝组织分别进行:(1)血清ALT和AST检测;(2)HE染色和Masson染色;(3)肝组织和肝细胞TERT、NF-κB和c-Myc mRNA表达和蛋白表达。结果:(1)各取样点DEN组血清ALT均高于对照组,治疗组血清ALT均低于DEN组;各取样点DEN组血清AST均高于对照组,造模第9w和第16w治疗组血清AST低于DEN组。(2)各取样点治疗组肝脏的炎症活动度、胶原沉积度和肝细胞损伤程度比同期DEN组低。(3)DEN组肝细胞中TERT mRNA和蛋白的表达随造模时间延长明显升高;治疗组肝组织TERT mRNA和蛋白的表达与DEN组相比明显降低,而肝细胞中TERT mRNA和蛋白的表达与DEN组相比明显升高。(4)DEN组肝细胞中NF-κB和c-Myc mRNA和蛋白以及肝组织中NF-κB mRNA和蛋白的表达随造模时间延长明显升高;治疗组肝细胞中NF-κB和c-Myc mRNA和蛋白以及肝组织中NF-κB mRNA和蛋白的表达与DEN组相比明显降低。结论:(1)DEN能成功诱导大鼠慢性肝损伤;(2)AKF-PD能降低慢性肝损伤大鼠血清ALT和AST水平,减少肝组织炎症细胞浸润,保护肝细胞,具有一定的慢性肝损伤治疗作用;(3)AKF-PD阻止肝细胞损伤与上调肝细胞中TERT mRNA和蛋白的表达相关;AKF-PD延缓慢性肝损伤的炎症反应与下调肝细胞中NF-κB和c-Myc mRNA和蛋白表达相关。图15幅,表15个,参考文献44篇
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-7 目录 7-9 符号说明 9-10 1 绪论 10-13 2 材料与方法 13-24 2.1 实验材料 13-15 2.1.1 实验动物 13 2.1.2 实验用药 13 2.1.3 主要仪器与设备 13-14 2.1.4 主要试剂及试剂盒 14-15 2.1.5 常用溶液配制 15 2.2 实验方法 15-24 2.2.1 慢性肝损伤模型的建立 15-16 2.2.2 取材方法 16 2.2.3 指标观察及方法 16-23 2.2.4 数据统计分析 23-24 3 实验结果 24-46 3.1 大鼠一般生长状况 24-25 3.2 肝功能检测 25-27 3.2.1 谷氨酸氨基转移酶(ALT) 25-26 3.2.2 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 26-27 3.3 大鼠原代肝细胞形态学鉴定 27-28 3.4 慢性肝损伤大鼠模型肝组织病理学检测 28-32 3.4.1 HE染色 28-30 3.4.2 Masson染色 30-32 3.5 慢性肝损伤大鼠模型肝组织TERT、NF-κB和c-Myc mRNA和蛋白表达 32-38 3.5.1 肝组织TERT、NF-κB和c-Myc InRNA表达 32-36 3.5.2 肝组织TERT、NF-κB和c-Myc蛋白表达 36-38 3.6 慢性肝损伤大鼠模型肝细胞TERT、NF-κB和c-Myc mRNA和蛋白表达 38-46 3.6.1 肝细胞TERT、NF-κB和c-Myc mRNA表达 39-42 3.6.2 肝细胞TERT、NF-κB和c-Myc蛋白表达 42-46 4 讨论 46-51 4.1 慢性肝损伤动物模型的建立 46-47 4.2 AKF-PD对DEN诱导的大鼠慢性肝损伤的预防性治疗作用 47-48 4.3 DEN和AKF-PD对肝组织和肝细胞TERT表达的影响 48-49 4.4 DEN和AKF-PD对肝组织和肝细胞NF-κB和c-Myc表达的影响 49-50 4.5 肝组织和肝细胞中TERT与NF-κB和c-Myc表达的关系 50-51 5 结论 51-52 参考文献 52-56 附录 56-59 综述 59-69 参考文献 65-69 攻读学位期间主要的研究成果 69-70 致谢 70
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肝及胆疾病
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