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儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及耐药性研究

作　者: 孙明姣
导　师: 沈叙庄
学　校: 首都医科大学
专　业: 儿内科学
关键词: 院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 分子特征 抗生素敏感性 质粒分析 社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 皮肤软组织感染 细菌分型技术
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：研究显示社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（community-associatedmethicillin-resistant Staphylococcus aureous，CA-MRSA）分子特征菌株导致院内感染，对院内MRSA的预防、控制传播及临床治疗提出新挑战。本研究探索我国儿童院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征、耐药性及质粒分布。方法：对2008年-2011年来自国内8家医院儿童院内感染MRSA菌株分离，根据美国疾病控制与预防中心（American Centers for Diseases Control andPrevention，CDC）MRSA的临床标准，将符合HA-MRSA感染条件106株MRSA纳入研究。对院内相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(hospital-associatedmethicillin-resistant Staphylococcus aureous,HA-MRSA)进行MLST(multilocussequence typing)、 SCCmec(staphylococcal cassette chromosome mec)、spa(staphylococcus protein A)分型、脉冲场凝胶电泳（pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE）分析，及Panton-Valentine杀白细胞素（pvl）基因检测,并对菌株进行质粒谱分析及抗生素敏感性测定。结果:本组106例HA-MRSA感染病例，最常见的是肺炎（41/106,38.7%）和皮肤软组织感染（skin and soft tissue infections, SSTIs）（19/106,17.9%）。106株MRSA经ST分型产生15型，包括ST239(53/106,50.0%)、ST5（924/106,22.6%）、ST5(7/106，6.7%),ST88(5/106，4.7%),ST25、ST7、ST1801、ST509、ST960、ST338、ST398、 ST375、 ST93、 ST72、 ST9均低于3%。 HA-MRSA流行克隆为ST239-SCCmec III (50/106,47.2%)，其次为ST59-SCCmec IVa(19/106,17.9%)，其他克隆均低于10%。本次研究发现儿童36.8%的HA-MRSA菌株具有CA-MRSA的分子特征,包括ST59（24/106,22.6%）、 ST5(7/106,6.7%)、ST88(5/106,4.7%)和ST72(3/106,2.8%)。53株ST239菌株被分成了27个PFGE型，只有3种PFGE型有PFGE亚型，共5个PFGE亚型。24株ST59菌株被分成了22个PFGE型，未发现PFGE亚型。HA-MRSA的pvl携带率为23.6%。87.5%的ST59携带pvl基因。HA-MRSA对青霉素，阿奇霉素，红霉素，四环素，头孢呋辛，克林霉素，庆大霉素，利福平，泰利霉素，环丙沙星，复方新诺明，氯霉素，替加环素，夫西地酸，莫匹罗星，达福普汀的耐药率分别为98.1%,86.8%,81.1%,77.4%,74.5%,67.0%,55.7%,45.3%,45.3%,42.5%,15.1%,7.5%,2.8%,0.9%，0.9%和0.9%。所有菌株对万古霉素和利奈唑胺均敏感。ST239较ST59对头孢呋辛、庆大霉素、四环素、复方新诺明、利福平、环丙沙星和泰利霉素的耐药率更高，差异具有统计学意义(P﹤0.05)；相反，对红霉素、克林霉素和阿奇霉素更敏感，差异具有统计学意义(P﹤0.05)。61.3%的HA-MRSA携带质粒。大于23kb(25/65,38.5%)的质粒最流行。83.3%ST59感染的患儿小于3岁，其中位年龄为9月，37.5%ST59引起侵袭性感染。结论：儿童HA-MRSA感染分离株遗传背景具有多样性。具有CA-MRSA分子特征的菌株在院内出现，尤其是ST59克隆-pvl携带率高，主要携带大于23kb的质粒。院内感染ST59克隆主要引起婴幼儿感染，易造成侵袭性感染。儿童HA-MRSA菌株其耐药性和质粒谱的分布均与克隆相关。目的了解儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（CA-MRSA）皮肤软组织感染（SSTIs）的临床分离株分子特征及药物敏感性。方法收集儿科CA-MRSA SSTIs患儿60例，对CA-MRSA分离株进行多位点基因分型（MLST分型）、SCCmec分型及spa分型，同时检测pvl基因，并进行15种抗生素药敏试验测定。结果在60例SSTIs患儿中，脓肿25例（41.7%），脓疱疮12例（20.0%）,其他23例（38.3%）。60株临床分离株共分出12种ST型， ST5929株占48.3%, ST88和ST1,均为6株，各占10.0%；SCCmec分型共有4种，SCCmecIV型占55.0%（33/60），SCCmecV型28.3%（17/60），SCCmecIII型15.0%（9/60），SCCmecII型1.7%（1/60）。在21种spa基因型中，t437占46.7%。分离株pvl携带率50.0%。该菌对红霉素，克林霉素，庆大霉素，氯霉素，四环素，环丙沙星，甲氧苄胺-磺胺甲噁唑，利福平，夫西地酸，莫匹罗星的耐药率分别是90.0%，80.0%，46.7%，38.3%，38.3%，33.3%，28.3%，11.6%，3.3%，3.3%。多重耐药率为73.3%。结论儿童SSTIs的CA-MRSA临床分离株最常见的克隆是MRSA-ST59-SCCmecIVa-t437和MRSA-ST59-SCCmecV-t437，多重耐药率高，在儿童社区获得SSTIs的经验性治疗中不宜首选红霉素和克林霉素。

全文目录


目录  3-5
第一部分 儿童院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征、耐药性及质粒分布研究  5-46
  中文摘要  5-7
  英文摘要  7-9
  前言  9-10
  材料和方法  10-29
  结果  29-37
  讨论  37-41
  结论  41-42
  参考文献  42-46
第二部分 儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染临床分离株的分子特征及耐药性研究  46-64
  摘要  46-47
  英文摘要  47-49
  前言  49-50
  材料与方法  50-53
  结果  53-56
  讨论  56-60
  结论  60-61
  参考文献  61-64
综述  64-73
  参考文献  70-73
附录  73-74
攻读学位期间发表文章情况  74-77
致谢  77-79
个人简历  79

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 微生物学检验
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