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DNA四面体-CpG复合结构激活细胞免疫

作　者: 诸兵
导　师: 朱军
学　校: 南京农业大学
专　业: 微生物学
关键词: CpG序列 DNA四面体 细胞摄取 细胞毒性 结构稳定性 免疫刺激
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 2次
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内容摘要


CpG是由非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤脱氧核苷酸组成的而核苷酸基序,广泛存在于细菌的基因组中,具有免疫刺激作用。人工合成的含有CpG的寡聚脱氧核糖核苷酸(CpG ODN)可以模拟细菌肉CpG序列的免疫刺激活性,可以被被哺乳动物的免疫系统视为“外源威胁”,从而诱发机体的免疫应答。所以,CpG ODN具有成为治疗性DNA或免疫佐剂的潜在能力,在治疗普通疾病甚至癌症的过程中发挥辅助治疗的作用。但是,未甲基化的CpG ODN易降解,且不易被细胞摄取,需要反复给药并且提高给药剂量,这是严重限制CpG应用的一大缺陷。随着纳米技术的发展,为药用CpG的体内递送提供了新的方法。现有的大量研究报道证明,由纳米材料载带的CpG表现出了活性高、细胞毒性低、生物相容性好等新特点,有成为某些疾病治疗和预防的新型免疫制剂的潜能。我们将不同数目的CpG序列与DNA四面体结合,得到不同价态的CpG-四面体复合结构,研究了该复合结构的细胞毒性和摄取率以及进入细胞后结构的稳定性,并评估了它们的免疫刺激效果：我们发现DNA四面体-CpG结构在没有转染试剂辅助的情况下DNA四面体可以有效地携带CpG基序进入小鼠巨噬样细胞Raw264.7,不会产生细胞毒性,能在细胞内稳定存在8小时以上,并刺激细胞产生免疫应答；随着四面体上负载的CpG序列数量增加,免疫刺激性也随之增强；另外我们还发现,负载四段CpG序列的四面体能引起更强的免疫刺激效果。我们首次实现了DNA四面体在药物递送上的应用,并且克服了CpG序列易降解和细胞摄取率低的问题,为CpG在疾病防治方面的研究提供了新的思路和方法。相信DNA四面体结构也将成为一个有前途的靶向给药工具。

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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