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桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠踝关节RANKL/OPG水平的影响
作 者: 虞佳乐
导 师: 张杰
学 校: 辽宁中医药大学
专 业: 中医内科学
关键词: CIA模型 桂枝芍药知母汤 RANKL/OPG系统
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 25次
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内容摘要
研究背景:类风湿关节炎(RA)是一种以累及周围关节为主的系统性炎症性自身免疫病,致残率高,是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要疾病之一。RA主要的致残原因为滑膜炎症、关节血管翳形成后造成的关节骨质破坏。本病为全球性疾病,多发在育龄期妇女,RA的发病率在我国约为0.4%,全球为0.5%~1.0%。其致病因素尚不明确。属中医“痹证”范围。就目前的研究成果来看目前,已经明确破骨细胞(OC)是导致RA发病过程中多关节进行性软骨和骨质侵蚀破坏、骨矿物质密度溶解丢失的重要参与者,而RANK/RANKL/OPG系统是调节破骨细胞分化、成熟和凋亡最重要的信号通路,参与RA骨破坏的基本过程。《金匮要略》中经典方剂桂枝芍药知母汤,因其疗效确切,临床广泛应用于治疗类风湿关节炎。目前研究表明桂枝芍药知母汤可以减轻RA的临床症状,使病情缓解。但桂枝芍药知母汤对于RA的治疗作用的机制还尚不明确,需要近一步的研究。研究目的:采用病理形态学、分子生物学等指标,观察经方桂枝芍药知母汤对CIA模型鼠骨破坏的抑制作用,以免疫抑制剂和非甾类抗炎药作对照,探讨其对骨破坏的作用机制。实验方法:本研究采用公认的II型胶原诱导性大鼠关节炎模型(collagen—inducedarthritis CIA),采用免疫抑制剂来氟米特、非甾体抗炎药萘普生作对照,将50只大鼠随机分为5组,即桂枝芍药知母汤组;来氟米特组;萘普生组;空白对照组;模型组共五组。除空白对照组外其他4组均以含II型胶原的完全弗氏佐剂致敏后第14天后,灌胃给药。空白对照组、CIA模型组不做任何处理。观察记录大鼠的一般状况,各个时间关节肿胀程度的变化。在免疫4周后,脱颈处死大鼠,HE染色制作左后肢踝关节病理切片观察病理形态学变化。用原位杂交技术检测CIA大鼠踝关节组织RANKL/OPG的表达水平。探讨桂枝芍药知母汤缓解和抑制CIA大鼠关节骨破坏的作用机理。结果:在对关节炎的改善程度上,给药2周时,桂芍知母汤组与萘普生及来氟米特组疗效相当,药物干预4周后,桂枝芍药知母汤组优于萘普生组,差异显著(P<0.01);与来氟米特组疗效相当,差别无意义(P>0.05);对OPGmRNA、RANKLmRNA光密度值的影响上桂枝芍药知母汤组优于萘普生组,差别有意义(P<0.05);来氟米特组与桂枝芍药知母汤组相比,疗效相当,差别无意义(P>0.05)。结论:桂枝芍药知母汤对CIA模型鼠继发性关节肿胀起有显著的改善作用;其可能通过通过抑制RANKLmRNA的表达水平,提高OPGmRNA的表达水平,起到抑制破骨细胞的分化与活化,达到缓解或阻止关节的损伤破坏的作用。
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全文目录
中文摘要 4-6 Abstract 6-8 前言 8-9 文献综述 9-25 综述一 9-17 综述二 17-25 1 实验材料 25-26 1.1 实验动物 25 1.2 实验药品 25 1.3 实验试剂 25-26 1.4 实验仪器 26 2 实验方法 26-28 2.1 CIA 模型的建立 26 2.2 分组及处理 26-27 2.3 关节炎评价指标 27 2.4 病理组织学检查方法 27 2.5 OPGmRNA、RANKLmRNA 光密度值测定 27-28 2.6 统计方法 28 3 结果 28-33 讨论 33-39 结论 39-40 参考文献 40-51 致谢 51-52 个人简历 52-53 附图 53
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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