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抗颤宁方对6-OHDA诱导PC-12细胞损伤的保护作用研究

作　者: 石建超
导　师: 田军彪
学　校: 河北医科大学
专　业: 中医内科学
关键词: 帕金森病抗颤宁方 PC-12细胞 MTT 流式细胞术 RT-PCR
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

目的：通过对PC-12细胞凋亡率,细胞成活率,及Caspase-3表达情况的分析研究抗颤宁方对6-OHDA诱导PC-12细胞损伤的保护作用及其可能作用机制。方法：1，将40只SD大鼠分为30只含药血清组和10只空白血清组，含药血清组每只每天灌服浓缩抗颤宁方，早晚各一次，每次2ml,空白血清组每天灌服生理盐水,剂量同前。一周后，对40只大鼠腹主动脉取血，静置，离心，过滤，收集含药血清及空白血清。2，购买PC-12细胞株，传代培养细胞，冻存细胞备用。当PC-12培养处于生长对数期时，消化，离心，接种在96孔板，设置六组实验组，分别为正常细胞组，中药高剂量损伤组，中药中剂量损伤组，中药低剂量损伤组，空白血清损伤组，对照损伤组。每组设6个复孔，MTT法检测各组细胞成活率。3，取对数生长的细胞接种于6孔板，同样分为以上六组，每孔设为一组，分别进行流式细胞仪检测早期凋亡率，共检测六次，计算平均值及标准差，分析各组细胞早期凋亡情况。4，取对数生长期PC-12细胞接种于6孔板，同样分为以上六组，每组设一孔，RT-PCR荧光定量检测分析各组Caspase-3mRNA表达情况，检测6次，计算平均值及标准差，统计分析各组间差异。结果：1与损伤组比较，空白血清组吸光值无明显差异，与损伤组比较，正常组，中药高剂量组，中药中剂量组及低剂量组吸光值有明显增大。中药高剂量组与中药中剂量组吸光值无明显差异。2空白血清组与损伤对照组早期凋亡细胞率无明显差异，随着含药血清浓度的增大，早期凋亡细胞率逐渐降低。正常细胞组亦出现早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞或碎片。3损伤对照组，空白血清组Caspase-3mRNA表达无明显差异，随着含药血清浓度的增加，细胞的Caspase-3mRNA表达逐渐减少，差异有统计学意义。结论1、抗颤宁方对6-OHDA诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。2、抗颤宁方有抗细胞凋亡作用，通过对凋亡相关基因Caspase-3的调控可能是主要作用机制之一。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
前言  9-10
材料与方法  10-15
结果  15-16
附图  16-21
附表  21-22
讨论  22-24
结论  24-25
参考文献  25-27
综述老年颤证的当代治疗研究现状与展望  27-37
  参考文献  34-37
致谢  37-38
个人简历  38

抗颤宁方对6-OHDA诱导PC-12细胞损伤的保护作用研究

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