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疏肝清热健脾法对广泛性焦虑大鼠模型Papez环路相关脑区形态结构干预作用的机制研究
作 者: 徐硕
导 师: 唐启盛
学 校: 北京中医药大学
专 业: 中医内科学
关键词: 广泛性焦虑症 Papez环路 疏肝清热健脾 丹栀逍遥散
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
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内容摘要
目的:以焦虑大鼠模型为研究载体,采用具有疏肝清热健脾作用的丹栀逍遥散进行干预,从行为学、脑组织形态学,探讨广泛性焦虑症(GAD)发病机制以及中医疏肝清热健脾法的干预作用,明确丹栀逍遥散治疗GAD的作用途径,进一步完善疏肝清热健脾法在GAD治疗方面的理论学说。方法:选用雄性Wistar大鼠,随机分为正常、模型、中药、西药组。每组均设处理后7、14、21d三个不同观察时点。模型、中药、西药组制备空瓶饮水应激焦虑模型,后分别予蒸馏水、丹栀逍遥散、盐酸丁螺环酮灌胃干预。所有动物分别于7、14、21d不同时点予行为学测试。测试完毕后,行相关指标检测:①通过HE染色观察大鼠海马、杏仁核、下丘脑神经细胞损伤情况;②通过电镜观察大鼠的海马CA3区以及杏仁核复合体。结果:1行为学测试1.1高架十字迷宫试验与正常组比较,模型组、中药组、西药组各时点OE%均降低(P<0.05,P<0.01);中、西药组第21天较模型组明显升高(P<0.05,P<0.01),二者之间各时点比较无明显差异(P>0.05);模型组7天到21天呈明显的降低趋势(P<0.01);模型组14天与21天比较差异无统计学意义(P>0.05),中药、西药组7天与14天比较呈明显降低趋势(P<0.01),21天与14天、7天相比较呈明显升高趋势(P<0.01)。模型、中药、西药组各时点OT%较正常组降低(P<0.05,P<0.01);中药组第21天较模型组明显升高(P<0.01);模型组7天到21天呈明显的降低趋势(P<0.05,P<0.01);中药、西药组7天到14天呈明显的降低趋势(P<0.01),14天到21天呈明显的升高趋势(P<0.01)1.2旷场实验模型、中药、西药组各时点水平得分均较正常组降低(P<0.01);中、西药组第21天较模型组明显升高(P<0.01),二者之间各时点比较无明显差异(P>0.05);模型、中药、西药组7天到21天水平得分呈明显的降低趋势(P<0.01);模型组14天与21天比较差异有统计学意义(P<0.01),中药组与西药组14天与21天比较无明显差异(P>0.05)。模型、中药、西药组各时点垂直得分均较正常组降低(P<0.05,P<0.01);三者之间比较无明显统计学差异(P>0.05);模型、中药、西药组7天到第21天垂直得分呈明显的降低趋势(P<0.01);西药组14天与21天比较差异有统计学意义(P<0.01),模型、中药组14天与21天比较无明显差异(P>0.05)2光镜观察Papez环路相应区域正常组海马锥体细胞以及杏仁核和丘脑前核的神经细胞核大而圆,染色质分布均匀,核仁明显,染色较浅,细胞质粉红着色,细胞之间连接紧密,排列整齐;模型组则出现细胞核染色质边集,核固缩,深染,形态不规则,细胞质浓缩,呈深红色,胞质和胞核界限不明显,甚至形成凋亡小体,细胞周围存在空隙,其中海马的CA2和CA3区明显。中药组和西药组细胞较模型组有明显的改善,可见少量的凋亡细胞,核有轻微固缩,细胞质深染,细胞排列尚紧凑整齐。3电镜观察Papez环路相应区域正常组神经元细胞核大而透亮,呈圆形或椭圆形,核仁明显,多为一个,染色质分布均匀,较少分布在核膜附近,胞浆电子密度低,细胞器排列规律,整齐。模型组电镜下可见细胞核染色质分布不均,异染色质增多,多呈团块状或新月状边集在核膜附近,细胞核变形,失去正常的形态,核膜的双层膜结构模糊,肿胀,甚至分离。线粒体嵴排列紊乱,有的出现断裂,肿胀,内质网扩张,细胞质电子密度增高。中药组和西药组较模型组有明显的改善,染色质有轻微的边集现象,细胞核形态尚正常,核膜双层膜结构尚清晰完整,部分线粒体嵴肿胀,断裂,但病变较模型组轻。结论:1采用空瓶饮水刺激建立GAD动物模型,模型大鼠行为学方面可出现活动力的减弱、探索力的减低、面对逃脱反应下降等改变,脑组织形态学方面亦有相应结构损伤发生。该模型较好地模拟了GAD发病的病因以及发病的状态,可为深入研究GAD发病机制及新药研发等提供良好的研究平台。2本研究证实疏肝清热健脾法对与焦虑症状产生密切相关的Papez环路上相关部位损伤具有一定的改善效果。具有疏肝清热健脾作用的丹栀逍遥散对GAD模型大鼠焦虑症状有明显调节作用,同时可促进脑组织病理损伤的恢复。与对照药物盐酸丁螺环酮相比,者在改善大鼠焦虑行为以及脑组织病理损伤方面疗效相当,此为中医疏肝清热健脾法治疗广泛性焦虑症提供了理论依据,同时也为中药丹栀逍遥散的药效学研究奠定基础。
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全文目录
中文摘要 4-6 Abstract 6-9 英文縮略语 9-10 第一部分 文献综述 10-26 综述一 广泛性焦虑症西医研究进展 10-18 参考文献 16-18 综述二 广泛性焦虑症中医辨治研究进展 18-26 参考文献 25-26 第二部分 实验研究 26-47 前言 26-27 材料和方法 27-32 1 实验材料 27 1.1 实验动物 27 1.2 主要试剂 27 1.3 主要仪器 27 2 实验方法 27-32 2.1 动物分组与处理 27 2.2 空瓶饮水刺激模型 27-28 2.3 实验药物 28 2.4 药物干预 28 2.5 指标测定 28-30 2.6 统计学处理 30 2.7 实验流程图 30-32 结果 32-41 1 行为学观察 32-35 1.1 高架十字迷宫实验 32-33 1.2 旷场实验 33-35 2 光镜观察Papez环路相应区域 35-36 3 电镜观察Papez环路相应区域 36 4 附图 36-41 讨论 41-46 1 GAD动物模型建立的思路及理论依据 41 2 疏肝清热健脾法治疗GAD的理论依据 41-44 3 丹栀逍遥散对GAD模型大鼠行为学的调节作用 44-45 4 丹栀逍遥散对GAD模型大鼠Papez环路相关脑组织形态学的改善效果 45-46 参考文献 46-47 结论 47-48 致谢 48-49 个人简历 49
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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