学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

流苏石斛多糖分离纯化、结构分析及免疫活性的研究

作　者: 张展
导　师: 罗建平
学　校: 合肥工业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 流苏石斛 多糖 分离纯化 结构表征 免疫活性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 85次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


流苏石斛是一种兰科石斛属多年生草本植物，为《中国药典》（2010版）收录。本文对流苏石斛多糖进行了提取、分离纯化、结构鉴定和免疫活性的研究。干燥的流苏石斛茎粉末脱色脱脂后，通过响应面优化法确定水溶性多糖WDFP的最佳提取条件为：温度82°C，时间51min，液料比33.3:1，在此条件下WDFP的提取得率为9.68%。水溶性多糖提取后的残渣先后进行碱溶液提取和酸溶液提取，获得碱溶性多糖BDFP和酸溶性多糖ADFP。WDFP经DEAE-Cellulose阴离子交换色谱柱分级得到五个组分： WDFP-1、 WDFP-2、WDFP-3、WDFP-4和WDFP-5。经葡聚糖凝胶渗透色谱，从WDFP-1中分离获得3种均一性多糖WDFP-1a、WDFP-1b和WDFP-1c，其相对分子量约为2.4×104Da、1.5×10~4Da、和7.6×10~3Da；从WDFP-4中分离获得1种均一性多糖WDFP-4a，其相对分子量约为2.3×10~6Da；从WDFP-5中分离获得1种均一性多糖WDFP-5a，其相对分子量约为1.9×10~6Da。采用甲基化分析、红外光谱分析、气相色谱分析、气质联用分析、核磁共振波谱分析等方法，对各均一多糖进行了结构鉴定。结果表明：（1）WDFP-1a由葡萄糖和甘露糖构成，摩尔比为2.41:1.00，其主链由1,4-linked β-D-Manp和1,4-linked β-D-Glcp构成，在1,4-linked β-D-Manp的O-2/3位存在乙酰基；（2）WDFP-1b由葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,4-linked Glcp、1,6-linked Manp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为3.99:2.81:1.08:1.00；（3）WDFP-1c由葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,4-linkedGlcp、1,6-linked Manp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为4.05:3.19:1.13:1.00；（4）WDFP-4a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,6-linked Galp、1,4-linked Glcp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为9.28:5.41:1.03:1.00；（5）WDFP-5a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,6-linked Galp、1,4-linked Glcp、1,3,6-linked Manp、1,3,6-linked Galp和1-linked Glcp，其摩尔比约为15.53:7.71:1.72:1.00:2.63。利用NMR技术，对各均一多糖组分中单糖残基的C、H进行了归属。免疫活性检测结果表明，流苏石斛多糖具有较高的肠道免疫活性，但不同多糖组分之间差异较大，其中WDFP、WDFP-1和WDFP-1b活性较高。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
致谢  8-11
插图清单  11-12
表格清单  12-13
第一章 绪论  13-25
  1.1 多糖分析方法概述  13-22
    1.1.1 多糖含量检测  14-15
    1.1.2 相对分子量和纯度  15-16
    1.1.3 单糖组成  16-18
    1.1.4 单糖残基连接方式  18-22
    1.1.5 多糖溶液的空间构象  22
  1.2 流苏石斛化学成分和药理活性研究进展  22-23
  1.3 课题研究目的意义及主要内容  23-25
    1.3.1 课题研究目的及意义  23
    1.3.2 课题研究内容  23-25
第二章 材料与方法  25-32
  2.1 实验材料  25
  2.2 主要试剂  25-26
  2.3 主要仪器  26
  2.4 实验方法  26-32
    2.4.1 流苏石斛化学成分分析  26-27
    2.4.2. 水溶性多糖（WDFP）提取工艺的优化  27-28
    2.4.3 碱溶性多糖（BDFP）的制备  28
    2.4.4 酸溶性多糖（ADFP）的制备  28
    2.4.5 不同方法脱蛋白  28
    2.4.6 多糖的分级和纯化  28-29
    2.4.7 基本理化性质测定  29
    2.4.8 红外光谱分析  29-30
    2.4.9 特性黏度  30
    2.4.10 分子量和纯度  30
    2.4.11 单糖组成分析  30
    2.4.12 甲基化分析  30-31
    2.4.13 核磁共振波谱分析  31
    2.4.14 免疫活性测定  31-32
第三章 结果和讨论  32-58
  3.1 流苏石斛化学成分分析  32-33
  3.2 多糖的提取与分离纯化  33-37
    3.2.1 多糖的提取工艺优化  33-35
    3.2.2 脱蛋白方法比较  35-36
    3.2.3 多糖的分离和纯化  36-37
  3.3 粗多糖及其分级组分的理化性质  37-39
  3.4 均一组分的一级结构表征  39-55
    3.4.1 理化性质分析  39-41
    3.4.2 甲基化分析  41-44
    3.4.3 核磁共振分析  44-55
  3.5 免疫活性比较  55-58
    3.5.1 粗多糖及其分级组分的免疫活性  55-56
    3.5.2 均一组分的免疫活性  56-58
第四章 结论  58-60
  4.1 结论  58-59
  4.2 展望  59-60
参考文献  60-68
攻读硕士学位期间待发表的论文  68-69
附图  69-75

相似论文

  1. 苹果多酚对γ射线引起的免疫系统损伤防护作用研究,S661.1
  2. 扩展青霉TS414脂肪酶在毕赤酵母的表达、纯化及其催化外消旋萘普生酯化拆分的研究,Q814
  3. 米曲霉FS-1脂肪酶发酵优化、分离纯化与酶学特性的研究,TQ925.6
  4. 金花茶多糖的分离纯化及化学结构的研究,S567.19
  5. 凡纳滨对虾虾头内源性蛋白酶分离纯化与酶学特性研究,S985.21
  6. 山野菜石参营养成分与品质分析,S647
  7. 雪莲果低聚果糖提取分离及分析研究,TS255.1
  8. 鸭源鸡杆菌抗体消长规律研究及抗脂多糖单抗杂交瘤细胞株的建立,S858.32
  9. 稳定分泌抗羊种布鲁菌脂多糖单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立,R392
  10. 海洋放线菌GY-4的鉴定及其抗菌物质研究,Q936
  11. 人源β-防御素-6的原核表达及纯化,Q78
  12. 水稻黄单胞菌clp基因的克隆及功能研究,S435.111.4
  13. PCV2分离株增殖特性研究及板蓝根多糖、黄芪多糖对PCV2体外复制的影响,S858.28
  14. 唾液酸近氨基端结构域功能及脂多糖对PRRSV诱导IFN-α的影响研究,S858.28
  15. 海蓬子脂溶性成分的分离及抗氧化活性的研究,R284.1
  16. 芜菁子化学成分的基础研究,R284
  17. 枯草芽孢杆菌fmbJ抗菌物质分离纯化及结构鉴定,TQ920.6
  18. 水稻条斑病菌harpin基因的筛选和胞外多糖相关基因的鉴定,S435.111.42
  19. 金华市猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查及板兰根多糖对PRRS疫苗的免疫增强效果,S858.28
  20. 板蓝根多糖对无初乳仔鼠免疫功能的影响,S853.7
  21. 桑黄（P.baumii Pilát）胞外多糖的液体发酵条件优化及免疫活性研究,R285

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
© 2012 www.xueweilunwen.com