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葡多酚的提取、纯化工艺及抗氧化性研究

作 者: 高婷
导 师: 董俊兴
学 校: 中南大学
专 业: 药学
关键词: 葡萄籽 多酚 工艺优化 原花青素B2 抗氧化
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 64次
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内容摘要


葡萄(Vitis vinifera L.)为葡萄科葡萄属植物,是世界上起源最早,种植范围最广的植物之一。我国葡萄资源丰富,种植面积和年产量均居世界首位,这些葡萄80%用于酿酒,酿酒产生的副产品葡萄籽因为未被充分开发利用,从而导致资源的巨大浪费。研究发现葡萄籽中含有多种化学成分,其中以葡多酚为主要成分。近年来对葡多酚的研究已成为热点,研究发现葡多酚能有效清除体内自由基、具有很好的抗氧化活性,对多种慢性疾病具有治疗和预防效果,在医疗保健等领域具有广阔的应用前景。本文以葡萄籽为原料,提取和纯化葡萄籽中多酚物质,以葡多酚含量为指标对提取工艺进行优化。并探讨了葡多酚的抗氧化性。主要的研究结果如下:1.采用Folin-Ciocalteu(?)匕色法测定葡萄籽中多酚的含量,并对其比色条件进行考察,确定最佳比色条件,建立了准确、可靠、完善的质量控制标准。2.选择乙醇为提取溶剂,通过单因素实验和正交实验系统地考察影响多酚提取率的主要因素,并确定了最佳提取工艺,按此工艺操作得到的葡萄籽提物多酚含量为38.4%。3.选用AB-8型大孔吸附树脂对葡萄籽粗提物进行纯化,考察树脂的静、动态吸附-解吸性能以及树脂使用次数,确定了最佳纯化工艺,按此工艺纯化后的葡萄籽提取物中多酚含量为51.39%,较未纯化之前有明显的提升。4.运用大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、制备型高效液相色谱等分离手段,探索葡多酚中二聚体原花青素B2的富集和提纯工艺,制备出纯度大于95%的原花青素B2单体化合物。5.以维生素C(Vc)作对照,通过DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的体外清除实验,研究了葡萄籽提取物中多酚的抗氧化能力。结果显示葡多酚在三种抗氧化实验中均表现出较强的抗氧化活性,且清除自由基能力与含量有较好的量效关系。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
英文缩写词  10-11
第1章 前言  11-19
  1.1 葡萄概述  11-12
    1.1.1 葡萄的资源分布及研究现状  11
    1.1.2 葡萄籽的应用现状及研究前景  11-12
  1.2 葡多酚概述  12-16
    1.2.1 葡多酚的化学组成  12-14
    1.2.2 葡多酚的生物活性  14-16
  1.3 本课题研究概述  16-19
    1.3.1 研究目的和意义  16-17
    1.3.2 研究内容和技术路线  17-19
第2章 葡多酚的含量测定研究  19-28
  2.1 实验材料  19-20
    2.1.1 原料与试剂  19-20
    2.1.2 仪器与设备  20
  2.2 实验方法  20-22
    2.2.1 溶液的配制  20
    2.2.2 Folin-Ciocalteu比色测定原理  20
    2.2.3 Folin-Ciocalteu比色条件选择  20-21
    2.2.4 正交实验  21
    2.2.5 方法学考察  21-22
  2.3 实验结果与讨论  22-27
    2.3.1 Folin-Ciocalteu比色条件选择  22-25
    2.3.2 正交实验结果  25
    2.3.3 方法学考察结果  25-27
  2.4 小结  27-28
第3章 葡多酚的提取工艺研究  28-37
  3.1 实验材料  28-29
    3.1.1 原料与试剂  28-29
    3.1.2 仪器与设备  29
  3.2 实验方法  29-31
    3.2.1 原料的处理  29
    3.2.2 葡多酚的提取方法  29
    3.2.3 提取液中多酚的检测方法  29
    3.2.4 单因素实验  29-30
    3.2.5 正交实验  30-31
    3.2.6 葡萄籽多酚粗提物的得率和含量测定  31
  3.3 实验结果与讨论  31-36
    3.3.1 单因素实验结果  31-35
    3.3.2 正交实验结果  35
    3.3.3 葡萄籽多酚粗提物的得率和含量测定结果  35-36
  3.4 小结  36-37
第4章 葡多酚的纯化与分离工艺研究  37-45
  4.1 实验材料  37-38
    4.1.1 原料与试剂  37
    4.1.2 仪器与设备  37-38
  4.2 实验方法  38-40
    4.2.1 样品溶液的配制  38
    4.2.2 大孔树脂的预处理  38
    4.2.3 吸附液和洗脱液中多酚的检测方法  38
    4.2.4 大孔树脂静态学性能考察  38-39
    4.2.5 大孔树脂动态学性能考察  39-40
    4.2.6 大孔树脂的重复使用次数和再生  40
    4.2.7 葡萄籽多酚纯化样品的多酚含量  40
  4.3 实验结果与讨论  40-44
    4.3.1 大孔树脂静态学性能考察实验结果  40-42
    4.3.2 大孔树脂动态学性能考察实验结果  42-44
    4.3.3 树脂的使用次数和多酚含量的考察结果  44
  4.4 小结  44-45
第5章 原花青素B2的制备工艺  45-55
  5.1 实验材料  45-46
    5.1.1 原料与试剂  45
    5.1.2 仪器与设备  45-46
  5.2 实验方法  46-48
    5.2.1 AB-8型大孔吸附树脂对多酚的分级纯化  46-47
    5.2.2 化学成分的分离纯化  47
    5.2.3 制备样品的HPLC-MS分析  47-48
  5.3 实验结果与讨论  48-53
    5.3.1 AB-8型大孔吸附树脂对多酚的分级纯化  48-50
    5.3.2 化学成分的分离纯化  50
    5.3.3 HPLC-MS对纯化样品的分析  50-53
  5.4 小结  53-55
第6章 葡多酚的抗氧化性活性评价  55-63
  6.1 实验材料  56
    6.1.1 原料与试剂  56
    6.1.2 仪器与设备  56
  6.2 实验方法  56-59
    6.2.1 清除DPPH自由基的测定  56-57
    6.2.2 清除羟基自由基的测定  57-58
    6.2.3 清除超氧阴离子自由基的测定  58-59
  6.3 实验结果与讨论  59-62
    6.3.1 清除DPPH自由基活性的测定结果  59-60
    6.3.2 清除羟基自由基活性的测定结果  60-61
    6.3.3 清除超氧阴离子自由基活性的测定结果  61-62
  6.4 小结  62-63
第7章 总结  63-65
  7.1 实验结论  63-64
  7.2 实验创新点  64-65
参考文献  65-69
攻读硕士学位期间主要研究成果  69-70
致谢  70

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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