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1-溴丙烷亚急性吸入染毒对大鼠大脑NR2B和GluR2的影响

作 者: 张伟
导 师: 黄建勋
学 校: 山西医科大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 1-溴丙烷 离子型谷氨酸受体 NMDA受体 AMPA受体 NR2B GluR2 大鼠
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:初步探讨1-溴丙烷(1-bromopropane,1-BP)对大鼠大脑离子型谷氨酸受体NR2B亚基和GluR2亚基的影响,以探索1-BP的神经毒性作用机制。方法:1.建立1-BP亚急性吸入染毒模型成年、雄性无特定病原体(specific pathogen-free, SPF)级Wistar大鼠48只,随机分为对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组4组,采用动式吸入染毒方式分别给与新鲜空气、设计浓度为1250mg/m3、2500mg/m3和5000mg/m3的1-BP气体(8小时/天,5天/周,连续4周),每天采样并检测染毒柜中1-BP的实际染毒浓度。每天观察实验动物的一般情况及行为表现,3天称量一次大鼠的体重。实验结束后处死大鼠,分离大脑、心脏和肝脏等脏器进行相关指标的检测。2.每组取3只大鼠采用免疫荧光技术观察各组大鼠大脑中NR2B和GluR2的分布情况。3.每组取9只大鼠分别应用蛋白质印迹(western blot, WB)法和实时荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法测定各组大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白和基因表达水平。结果:1.1-BP亚急性吸入染毒模型(1)1-BP实际染毒浓度的检测结果为:①低浓度组:1285.00(1198.50,1429.50)mg/m3;②中浓度组:2554.00(2423.25,2735.25)mg/m3;③高浓度组:5270.00(4994.00,5408.00)mg/m3。(2)实验动物的一般情况染毒1周后,中和高浓度组大鼠逐渐出现食欲减退、活动减少的表现;染毒3周后高浓度组大鼠出现后肢肌力明显下降、毛色暗淡污秽;低浓度组大鼠出现上述异常表现的时间晚于中、高浓度组,且症状较轻微;对照组大鼠无上述异常表现。全部大鼠在染毒期间无死亡发生。(3)大鼠的体重增长情况:实验动物体重的增长依次为:对照组>低浓度组>中浓度组>高浓度组。①中浓度组:染毒的第6天、第9天及第18天至染毒结束,其体重均低于对照组(P<0.05或P<0.01);实验的第29天,其体重也低于低浓度组(P<0.05)。②高浓度组:染毒的第6天,其体重低于对照组(P<0.01)和低浓度组(P<0.01);自染毒的第9天到染毒结束,其体重均低于其他3组动物的体重(P<0.01)。2.1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑中NR2B和GluR2蛋白的分布免疫荧光显示NR2B和GluR2蛋白在低、中和高浓度组大鼠的大脑皮质中均有表达,表达部位与对照组相比无明显差异,NR2B和GluR2蛋白的阳性表达部位较为一致。3.1-BP亚急性吸入染毒对大鼠大脑NR2B和GluR2蛋白表达的影响(1)中浓度组和高浓度组大鼠大脑NR2B蛋白的表达水平均高于对照组(P<0.05),低浓度组大鼠大脑NR2B蛋白的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)中浓度组和高浓度组大鼠大脑GluR2的蛋白表达水平均高于对照组(P<0.01和P<0.05),低浓度组大鼠大脑GluR2蛋白的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。4.1-BP亚急性吸入染毒对大鼠大脑中NR2B mRNA和GluR2mRNA表达水平的影响(1)低、中和高浓度组大鼠大脑中NR2B的mRNA表达水平与对照组大鼠相比差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)低、中和高浓度组大鼠大脑中GluR2的mRNA表达水平与对照组大鼠相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.在本实验条件下,1-BP染毒组大鼠大脑皮质中均有NR2B和GluR2分布表达且两者的表达部位较为一致。2.一定浓度的1-BP亚急性吸入染毒可引起大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白表达增加,但相应的mRNA表达水平未见明显变化。

全文目录


縮略词表  5-6
中文摘要  6-9
Abstract  9-13
前言  13-17
研究对象和方法  17-34
  1. 1-BP亚急性吸入染毒模型的建立  17-20
  2. 1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑中NR2BGluR2的分布  20-23
  3. 1-BP亚急性吸入染毒对大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白及基因表达水平的影响  23-34
    3.1 1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白表达水平  23-29
    3.2 1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑NR2B和GluR2的mRNA表达水平  29-34
实验结果  34-48
  1. 1-BP亚急性吸入染毒模型结果  34-36
  2. 1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑中NR2B和GluR2的分布情况  36-40
  3. 1-BP亚急性吸入染毒大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白和基因表达水平  40-48
讨论  48-52
结论  52-53
参考文献  53-59
综述  59-71
  参考文献  64-71
附录  71-72
攻读学位期间发表论文情况  72-73
致谢  73-74
个人简介  74

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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