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微小隐孢子虫感染小鼠肠道细胞因子和抗菌肽表达

作　者: 黄清花
导　师: 刘波
学　校: 吉林大学
专　业: 动物学
关键词: 微小隐孢子虫细胞因子抗菌肽
分类号: S852.723
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 22次
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内容摘要

生物体内含有大量的抗菌肽，是先天性免疫系统的重要组成部分，具有抗细菌、真菌、病毒以及原虫感染等作用。Th17是Th1和Th2之外重要免疫应答系统，在机体的抗炎症抗感染过程中发挥重要作用。IFN-γ诱导的趋化因子如CXCL-9，CXCL-10和CXCL-11是体液免疫的重要细胞因子，协同IFN-γ积极应答病原微生物的入侵。微小隐孢子虫（Cryptsporidium parvum，C. parvum）是重要的人兽共患寄生虫，感染可引起隐孢子虫病。主要临床表现为腹泻，特别是艾滋病患者并发隐孢子虫病可引起致命性腹泻，是艾滋病致死的一个重要原因。目前，人们对内凝集蛋白（intelectin）等抗菌肽和Th17免疫应答的研究侧重于胃肠道发生细菌感染后细胞因子及抗菌肽表达水平的变化，对于C.parvum感染后抗菌肽表达水平的变化，是否引起Th17免疫应答反应，IFN-γ诱导的趋化因子以及IL-10等抗炎症细胞因子变化的研究较少。因此，探讨C. parvum感染后抗菌肽和Th17细胞因子的变化对研究小鼠的肠道免疫应答机制具有重要意义。本研究对C. parvum感染的BALB/c小鼠肠道内抗菌肽和相关细胞因子的变化进行了检测。3—4周龄BALB/c小鼠经口灌胃感染1×106C. parvum卵囊，经感染7d和14d后颈椎脱臼法处死小鼠，采集空肠和结肠进行肠道组织的体外培养。18h后收集肠道组织培养上清液，ELISA方法检测IL-12和IL-17的表达量，实验结果证实微小隐孢子虫感染可引起显著的Th17和Th1免疫应答反应。采集小鼠空肠和结肠组织经固定后制成石蜡组织切片。经H.E和AB-PAS染色显微镜下观察，可见BALB/c小鼠感染C. parvum后引起杯状细胞和潘氏细胞显著增生。Real-time PCR实验结果表明，同未感染的空白对照组相比，黏蛋白和内凝集蛋白等表达量显著增加，表明抗菌肽在宿主抗寄生虫感染的免疫应答中具有重要作用。但由潘氏细胞分泌的溶菌酶（lysozyme）在感染后7d表达量显著降低。同时，Real-time PCR结果中可以发现微隐孢子虫感染后，IL-17A，IL-17F，IFN-γ以及IFN-γ诱导的趋化因子表达显著升高，说明微小隐孢子虫可以同时激活Th1和Th17免疫应答。

全文目录

内容提要  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-11
前言  11-12
第一篇文献综述  12-22
  第1章微小隐孢子虫感染小鼠的免疫研究进展  12-18
    1.1 微小隐孢子虫感染后的先天免疫  12-13
    1.2 微小隐孢子虫感染后的获得性免疫应答  13-14
    1.3 微小隐孢子虫感染细胞因子和趋化因子研究  14-18
  第2章抗菌肽的免疫研究  18-22
    2.1 抗菌肽理化特性的研究  18
    2.2 先天免疫应答中的抗菌肽研究  18-22
第二篇研究内容  22-45
  第1章微小隐孢子虫感染小鼠肠道细胞因子的表达  22-34
    1.1 材料  22-23
    1.2 方法  23-26
    1.3 结果  26-31
    1.4 讨论  31-33
    1.5 小结  33-34
  第2章微小隐孢子虫感染小鼠肠道抗菌肽的表达  34-45
    2.1 材料  34-35
    2.2 方法  35-39
    2.3 结果  39-42
    2.4 讨论  42-44
    2.5 小结  44-45
结论  45-46
参考文献  46-63
导师简介  63-64
作者简介  64-65
硕士期间所取得的科研成果  65-66
致谢  66

微小隐孢子虫感染小鼠肠道细胞因子和抗菌肽表达

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