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枇杷果实品质分析及CCD1基因克隆与表达研究

作　者: 梁乘榜
导　师: 周春华
学　校: 扬州大学
专　业: 果树学
关键词: 枇杷 芳香物质 营养品质 基因克隆 基因表达
分类号: S667.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


枇杷(Eriobotry japonica Lindl)为原产我国的常绿果树,按照果肉颜色不同可分为红沙和白沙两大类。枇杷果实色泽艳丽,果肉柔软多汁,营养丰富,目前关于其品质的研究以糖酸代谢、类胡萝卜素积累为主,而关于香气的研究较少。本研究以枇杷果实为试材,在分析测定基础品质指标、色泽指标的基础上,对不同品种枇杷成熟果实及不同发育期果实果肉香气进行分析,并进行枇杷果实CCD1基因克隆和表达研究,主要研究结果如下：1、对2011年采集的3个红沙和12个白沙品种枇杷成熟期果实的品质进行检测,结果显示“大五星”单果重和纵横径平均值最大,最小的是“冰糖种”；红沙品种可溶性固形物普遍比白沙品种低,其中“鸡蛋白”含量最高,“大五星”含量最低。2012年采集的发育过程中的果实样品测试数据显示出5月4日“金丰一号”和“冠玉”同时进入快速发育期,果实重量和纵横径在成熟前1-2周就达到了品种固有大小,成熟的“金丰一号”平均值为37.75g,“冠玉”果实平均值达到39.96g。色差分析显示红沙品种果皮和果肉明亮度均低于白沙品种,颜色更接近于黄色。果实芳香成分GC-MS检测分析结果表明,15个枇杷品种均以醇类平均含量最高,其次是醛类,红沙和白沙品种醇类含量平均值分别达到47.7%和53.63%,在较普遍存在的物质中反式-2-异氰基环己醇和苯甲醛为红沙和白沙枇杷共有。“金丰一号”和“冠玉”果实发育过程中分别检测到24种和32种香气物质,“金丰一号”7个时期样品中平均含量最高的是醛类,其次是酸类和醇类,分别为0.937μg·g-1、0.304μg·g-1、0.163μg·g-1;不同时期共有的成分是己醛,其次存在较普遍的是苯甲醛和2-己烯醛；“冠玉”不同发育时期样品中也是醛类总含量最高,醇类次之,以苯甲醛和2-己烯醛最为普遍存在,其中2-己烯醛的平均含量最高,苯甲醛次之；两品种果实中醛类和醇类总含量最大值同在4月19日样品中出现,反式-2-己烯-1-醇和正己醇最为普遍存在。2、克隆获得枇杷CCD1基因全长,命名为EjCCDl,该cDNA全长1735bp,有一个完整的1518bp的开放阅读框,编码由506个氨基酸组成的蛋白质,GenBank登录号为JQ317781：此外,克隆得到枇杷CCD4基因3’端片段,命名为EjCCD4,该cDNA片段长1405bp,包含一个1308bp的开放阅读框,可编码436个氨基酸组成的蛋白质片段,GenBank登录号为JQ317782。采用实时荧光定量PCR进行“金丰一号”和“冠玉”枇杷不同发育时期果肉EjCCDl表达分析,结果显示不同发育阶段的表达量有很大差异,同一时期不同品种果实间的表达量也有很大差异,但均以2012年5月25日样品中表达量最高。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-6
目录  6-8
缩略词表  8-9
第一章 文献综述  9-24
  1 枇杷种质资源研究  9-10
    1.1 枇杷资源  9
    1.2 资源分布  9-10
    1.3 种植资源收集与保存  10
  2 类胡萝卜素、类胡萝卜素裂解酶和脱辅基类胡萝卜素  10-15
    2.1 类胡萝卜素  10-13
    2.2 类胡萝卜素裂解双加氧酶  13-14
    2.3 脱辅基类胡萝卜素  14-15
  3 果实芳香物质研究进展  15-22
    3.1 果实芳香物质  15-17
    3.2 果实芳香物质的形成  17-19
    3.3 影响果实香气释放的因素  19-20
    3.4 芳香物质的提取、分离与鉴定  20-22
    3.5 芳香物质的鉴定  22
  4 本研究的目的和意义  22-24
第二章 枇杷果实香气成分分析  24-34
  1 材料与方法  24-26
    1.1 材料  24
    1.2 方法  24-26
  2 结果与分析  26-33
    2.1 枇杷果实品质指标  26-27
    2.2 枇杷果皮和果肉颜色评价  27-28
    2.3 枇杷果实芳香成分分析  28-33
  3 小结  33-34
第三章 枇杷CCD1和CCD4基因克隆与序列分析  34-48
  1 材料与方法  34-40
    1.1 材料  34-35
    1.2 方法  35-40
  2 结果与分析  40-47
    2.1 枇杷果实总RNA检测  40
    2.2 CCD1基因的克隆与序列分析  40-44
    2.3 CCD4基因的克隆与序列分析  44-47
  3 讨论  47-48
第四章 两品种枇杷果实不同发育时期芳香成分及CCD1基因表达分析  48-58
  1 材料与方法  48-50
    1.1 材料  48
    1.2 方法  48-50
  2 结果与分析  50-57
    2.1 枇杷果实品质指标  50-51
    2.2 枇把果皮和果肉颜色评价  51-52
    2.3 枇杷果实芳香成分分析  52-56
    2.4 不同发育时期CCD1基因荧光定量表达分析  56-57
  3 小结  57-58
参考文献  58-65
致谢  65-66
攻读学位期间发表论文  66-67

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 热带及亚热带果类 > 枇杷
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