学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

CADPE抗肿瘤药效及其对结肠癌细胞的作用机制研究

作　者: 童莹慧
导　师: 吴永江；连晓媛
学　校: 浙江大学
专　业: 中药学
关键词: CADPE 结肠癌细胞周期阻滞细胞凋亡 Cdc25A ROS H22与S180小鼠肿瘤模型
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 25次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

结肠直肠癌(Colorectal cancer, CRC)是常见的致死性人类恶性肿瘤之一。目前的药物治疗仍存在着许多缺陷,因此研究新的抗肿瘤药物意义十分重大。本实验旨在研究咖啡酸3,4-二羟基苯乙酯(CADPE)抗肿瘤作用药效和对肠癌细胞的抗肿瘤作用机制。方法：在体外实验中,SRB法测定CADPE作用对多种人肠癌细胞的生长抑制作用,PI染色测定细胞周期变化,Annexin V/PI或Hoechst33342/PI双染检测细胞凋亡与坏死,Rhodaminel23和DCFH-DA染色分别检测线粒体膜电位变化和ROS水平变化。Western Blot检测CADPE对细胞存活相关蛋白表达的影响。在体内实验中,选取S180与H22小鼠肿瘤模型评价CADPE药效。结果：CADPE对四种人结肠肿瘤细胞株均能产生明显的细胞毒性,且作用呈剂量依赖性。CADPE在S180和H22小鼠模型上也表现出明显的抗肿瘤作用。CADPE能够使同步化的HCT-15细胞的细胞周期维持在G1期与S期,而不进入G2/M期。CADPE作用后,肠癌细胞胞内ROS水平上升,线粒体膜电位下降,细胞核形态发生变化,部分细胞凋亡或坏死。SW620细胞内凋亡相关Bax蛋白表达增加,控制细胞周期的Cdc25A蛋白表达减少,p-Cdc2 (Tyr15)增加,Rb蛋白磷酸化减少。MAPK通路中ERK 1/2和p38的磷酸化被激活或增强,但CADPE对JNK、Chkl与Chk2的磷酸化状态没有显著影响。结论：CADPE具有显著的抗肿瘤作用,其在肠癌细胞中的作用表现为引起细胞周期阻滞和细胞凋亡。此外,CADPE能够增加细胞内ROS水平,以及介导Cdc25A蛋白表达的下调,这可能与CADPE引起的抗肿瘤作用有关。

全文目录

致谢  4-5
摘要  5-7
Abstract  7-9
目次  9-11
第一章:引言  11-13
第二章:CADPE体外对肠癌细胞的抗肿瘤作用  13-43
  2.1 实验材料  13-17
    2.1.1 实验细胞系与所用药物  13
    2.1.2 实验仪器与耗材  13-14
    2.1.3 主要试剂  14-15
    2.1.4 主要抗体  15
    2.1.5 需自行配制的试剂  15-17
  2.2 实验方法  17-21
    2.2.1 SRB法检测CADPE对人肠癌细胞生长与存活影响  17-18
    2.2.2 流式细胞仪检测细胞周期  18
    2.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染)  18-19
    2.2.4 Hoechst 33342/PI染色观察细胞核形态和细胞死亡方式  19
    2.2.5 流式细胞仪检测细胞内ROS水平和线粒体膜电位  19
    2.2.6 DCFH-DA染色观察细胞内ROS水平  19-20
    2.2.7 Rhodamine123染色观察细胞线粒体膜电位变化  20
    2.2.8 Western blot检测细胞内各蛋白水平变化  20-21
  2.3 数据处理与统计学分析  21
  2.4 实验结果  21-37
    2.4.1 CADPE对多种人肠癌细胞生长均有明显的抑制作用  21-23
    2.4.2 CADPE对细胞周期的影响  23-24
    2.4.3 CADPE促进细胞凋亡和坏死  24-30
    2.4.4 CADPE能显著细胞内的ROS水平  30-32
    2.4.5 CADPE对细胞线粒体膜电位的影响  32-35
    2.4.6 CADPE对细胞内周期调控相关蛋白表达的影响  35-37
  2.5 讨论  37-42
  2.6 小结  42-43
第三章:CADPE的抗肿瘤作用体内药效初步研究  43-47
  3.1 实验材料  43
  3.2 实验方法  43-44
  3.3 统计学分析  44
  3.4 实验结果  44-46
  3.5 讨论与小结  46-47
第四章:总结  47-50
参考文献  50-53
文献综述  53-64
  参考文献  60-64
作者简介  64

CADPE抗肿瘤药效及其对结肠癌细胞的作用机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文