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山茱萸活性成分对肿瘤及衰老细胞模型影响初探

作　者: 李沐涵
导　师: 王明艳
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中西医结合基础
关键词: 山茱萸活性成分抗衰老抗肿瘤细胞模型
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 114次
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内容摘要

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb. et Zucc的干燥成熟果肉,是中医临床常用的传统名贵滋阴补肾、抗衰老、抗肿瘤药物之一。本论文在前期研究的基础上,选择山茱萸的主要活性成分观察其对几种细胞模型的影响,旨在探讨山茱萸能通过多成分、多靶点发挥多效应的机制。本论文选取几种肿瘤细胞、D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞模型,观察山茱萸活性成分的作用,全文共分两大部分：一、文献研究通过查阅相关文献,概述山茱萸的本草研究,对山茱萸的资源分布、炮制研究、化学成分研究、药理研究、活性成分研究进行综述；概述山茱萸抗肿瘤、抗衰老等方面的研究。二、实验研究进行前期研究概述,在前期研究基础上展开实验。重点以山茱萸活性成分没食子酸为研究对象,观察其对几种肿瘤细胞的影响,并对人胃癌MGC-803细胞株、人肝癌SMMC-7721细胞株的作用及机制进行初探；制备D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞模型,观察山茱萸活性成分莫诺苷对细胞衰老通路关键分子p53、p16、pRb、p21蛋白表达及相关基因甲基化的影响；观察山茱萸活性成分莫诺苷对自然老化人胚肺成纤维细胞端粒的影响。结果表明：山茱萸活性成分没食子酸有明显的抑制肿瘤细胞的作用,其作用机制与抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡有关；山茱萸活性成分莫诺苷对D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞有保护作用,其作用机制与调控衰老通路关键分子,影响基因甲基化,影响端粒长度有关。结论：山茱萸活性成分没食子酸、莫诺苷分别具有抗肿瘤、延缓衰老作用。

全文目录

中文摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-10
第一部分文献研究  10-34
  一山茱萸概况  10-16
    1 山茱萸本草研究  10-12
    2 山茱萸化学成分与药理作用研究概况  12-16
  二山茱萸抗肿瘤研究  16-23
    1 中医肿瘤与抗肿瘤渊源述要  16-17
    2 中医药抗肿瘤作用、机制研究概况  17-19
    3 山茱萸抗肿瘤方面的配伍及复方研究概况  19-20
    4 山茱萸活性成分没食子酸抗肿瘤的研究概况  20-23
  三山茱萸抗衰老研究  23-27
    1 中医衰老与抗衰老渊源述要  23-24
    2 中药抗衰老作用、机制研究概况  24
    3 山茱萸抗衰老方面的配伍及复方研究概况  24-25
    4 山茱萸活性成分抗衰老的研究概况  25-27
  参考文献  27-34
第二部分实验研究  34-86
  一前期研究  34-35
  二山茱萸活性成分没食子酸对肿瘤细胞模型的影响  35-69
    1 没食子酸对几种肿瘤细胞模型的影响  35-45
      1.1 仪器与材料  35-36
      1.2 实验方法  36-37
      1.3 实验结果与分析  37-45
      1.4 讨论  45
    2 没食子酸对人胃癌细胞MGC-803模型的影响  45-59
      2.1 仪器与材料  45-46
      2.2 实验方法  46-52
      2.3 结果与分析  52-57
      2.4 讨论  57-59
    3 没食子酸对人肝癌细胞SMMC-7721的影响  59-69
      3.1 仪器与材料  59
      3.2 实验方法  59-61
      3.3 结果与分析  61-68
      3.4 讨论  68-69
  三山茱萸活性成分莫诺苷对D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞模型的影响  69-83
    1 仪器与材料  69
      1.1 实验试剂、仪器  69
      1.2 实验细胞、药品  69
    2 实验方法  69-72
      2.1 细胞培养  69
      2.2 莫诺苷样品、D-半乳糖溶液的配制  69
      2.3 细胞形态学观察  69
      2.4 RT-PCR法检测p53、pRb、p16基因  69-71
      2.5 western blot检测P53、P21、P16、PRb蛋白表达(同前)  71
      2.6 p53、p21、p16、pRb甲基化检测  71-72
      2.7 p53、p21、p16、pRb端粒检测  72
    3 结果与分析  72-78
      3.1 细胞形态观察  72
      3.2 莫诺苷对p53、p21、p16、pRb mRNA的影响  72-73
      3.3 western blot检测P53、P21、P16、PRb蛋白表达  73-74
      3.4 巢式PCR(MSP)对基因甲基化检测  74-76
      3.5 p53、p21、p16、pRb端粒检测  76-78
    4 讨论  78-83
  参考文献  83-86
全文总结  86-87
附录  87-89
攻读硕士学位期间取得的学术成果  89-90
致谢  90

山茱萸活性成分对肿瘤及衰老细胞模型影响初探

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