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嗜线虫致病杆菌的杀虫机理及其水悬浮剂的研究

作　者: 李立涛
导　师: 王勤英
学　校: 河北农业大学
专　业: 农业昆虫与害虫防治
关键词: 嗜线虫致病杆菌杀虫蛋白昆虫中肠水悬浮剂增效作用
分类号: S482.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310(Xn HB310)是本实验室筛选得到的一株具有高毒力的昆虫病原线虫共生菌。该菌能够分泌多种杀虫毒素蛋白,具有广谱的杀虫活性,同时对不同昆虫的毒力差别又很大。为了明确影响其杀虫活性的主要因子及其杀虫机理,更好的应用这一微生物资源,本研究分析比较了对病原线虫共生菌不同敏感程度的昆虫的中肠组织及环境的差异性,另外,对其水悬浮剂的配方进行研究,并通过与七种常用杀虫剂的混配筛选出具有增效作用的杀虫剂。现将主要研究结果总结如下。1.对不同敏感性昆虫中肠环境的差异性进行分析,结果显示在较大的pH值范围内(4~10),Xn HB310均能保持较高的杀虫活性。分别用不敏感、敏感和次敏感的昆虫的中肠酶液酶解杀虫毒素粗提物,然后测定其对小菜蛾幼虫的杀虫活性,结果表明经不同昆虫中肠酶液酶解的毒素粗提物的杀虫活性没有明显的差异。杀虫活性的大小与中肠围食膜的薄厚和韧性有关,敏感昆虫的围食膜较薄、韧性差。此外,当以围食膜较厚的棉铃虫为检测对象时,对围食膜有破坏作用的荧光增白剂FB-28对Xn HB310有一定的增效作用,能显著提高Xn HB310对棉铃虫3龄幼虫的体重抑制率。2.以滴喂和浸叶饲喂东亚飞蝗Xn HB310菌液后,各时间段内均未在其血腔内发现共生菌的存在,这说明在整个杀虫过程中起到关键性作用的因子是Xn HB310毒素蛋白而非活细胞。3.对各种助剂进行筛选,最终获得40%共生菌水悬浮剂最佳配方为:Xn HB310细胞沉淀40%、OP-10 4%、乳化剂600# 2%、黄原胶0.1%、山梨酸钾0.1%、尼泊金甲酯0.03%、脱氢乙酸钠0.2%、乙二醇5%、有机硅0.6%、全脂奶粉2%和水45.97%。盆栽试验表明该制剂对小菜蛾有良好的防治效果,50倍、100倍和200倍稀释液对3龄小菜蛾72h的防治效果为分别为97.56%、90.24%和80.49%,均高于50倍的细胞悬浮液的防治效果(75.61%)。4.采用浸叶法测定了Xn HB310与七种常用杀虫剂混配后对小菜蛾3龄幼虫的毒杀增效作用,并对具有增效作用的混配组合进行了最佳配比的筛选和增效作用的评价。结果显示Xn HB310仅与氯氰菊酯混配表现出明显的增效作用,协同毒力指数(cf)为30.9;当Xn HB310与氯氰菊酯质量比在1006.4:2.6~816:4之间时,混配药剂均表现为增效作用;当两种药剂的质量比为952:3时,增效作用最强,此时的共毒系数最高为335。Xn HB310与乐斯本、吡虫啉或甲胺基阿维菌素苯甲酸盐混配均表现为相加作用,cf值分别为9.6、-6.9和-18.6,Xn HB310与菜喜、灭幼脲或阿维菌素混配则表现出明显的拮抗作用,cf值分别为-48.4、-24.9和-57.1。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第一章文献综述  9-16
  1.1 昆虫病原线虫共生菌的研究进展  9-12
    1.1.1 昆虫病原线虫及其共生菌  9-10
    1.1.2 共生菌胃毒杀虫毒素  10-11
    1.1.3 共生菌杀虫机理的研究  11-12
    1.1.4 共生菌农药剂型的研究  12
  1.2 微生物农药的研究  12-14
    1.2.1 微生物农药的种类  13-14
    1.2.2 微生物农药存在的问题及解决方法  14
  1.3 研究的目的与意义  14-16
第二章嗜线虫致病杆菌HB310 杀虫活性与昆虫中肠环境的关系的研究  16-24
  2.1 材料与方法  16-19
  2.2 结果与分析  19-23
    2.2.1 不同敏感性昆虫中肠pH 值及围食膜形态的差异  19-20
    2.2.2 荧光增白剂FB-28 与共生菌混配的增效作用  20-21
    2.2.3 不同pH 值条件下处理Xn HB310 菌液对其杀虫活性的影响  21-22
    2.2.4 不同敏感性昆虫中肠酶液对胞内蛋白杀虫活性的影响  22
    2.2.5 东亚飞蝗血淋巴中共生菌的检测结果  22-23
  2.3 结论与讨论  23-24
第三章嗜线虫致病杆菌HB310 水悬浮剂的研制  24-35
  3.1 材料与方法  24-28
  3.2 结果与分析  28-33
    3.2.1 防腐剂的选择结果  28
    3.2.2 湿润分散剂的确定  28-30
    3.2.3 增稠剂的确定  30
    3.2.4 紫外光照射对Xn HB310 菌液不同组分杀虫活性的影响  30-31
    3.2.5 最佳紫外光保护剂的筛选结果  31
    3.2.6 紫外光保护剂最适浓度的选择  31-33
    3.2.7 最优配方的确定  33
    3.2.8 盆栽试验结果  33
  3.3 结论与讨论  33-35
第四章嗜线虫致病杆菌与七种杀虫剂混配的增效作用  35-41
  4.1 材料与方法  35-36
  4.2 结果与分析  36-39
    4.2.1 Xn HB310 与七种杀虫剂混用对小菜蛾毒力的比较  36-37
    4.2.2 Xn HB310 与氯氰菊酯混配的最佳配比  37-39
    4.2.3 Xn HB310 与氯氰菊酯的混剂共毒系数  39
  4.3 结论与讨论  39-41
第五章结论  41-42
参考文献  42-48
在读期间发表论文  48-49
作者简介  49-50
致谢  50-51

嗜线虫致病杆菌的杀虫机理及其水悬浮剂的研究

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