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不同负荷游泳运动对大鼠横纹肌细胞调节蛋白与超微结构的影响

作　者: 马彬
导　师: 朱永泽
学　校: 扬州大学
专　业: 运动人体科学
关键词: 大鼠 游泳运动 骨骼肌 心肌 肌钙蛋白 原肌球蛋白 电镜
分类号: G804.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 49次
引　用: 1次
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内容摘要


目的：通过大鼠不同负荷游泳运动,观察其心肌与骨骼肌的超微结构和调节蛋白(肌钙蛋白与原肌球蛋白)及其mRNA的变化情况。探讨不同负荷运动对心肌、骨骼肌调节蛋白及其超微结构的影响,以期为进一步研究运动性肌损伤提供形态学依据。方法：大鼠随机分为五个实验组,其中安静对照组、小负荷运动组、中等负荷运动组和大负荷运动组,游泳实验结束后,取大鼠股四头肌、比目鱼肌、左心室肌、右心房肌,所得石蜡切片分别进行troponin和tropomyosin的免疫组织化学染色(Envision法)与原位杂交实验,光镜下观察其分布的情况并通过图像分析软件计算其平均光密度和阳性面积的改变。安静对照组、小负荷运动组、中等负荷运动组、大负荷运动组和一次力竭组常规制作电镜样品,观察其超微结构变化。结果：(1)股四头肌：与安静对照组比较,随着运动负荷的增加,TnT和Tm逐渐降低；TnI mRNA和Tm mRNA表达量总体降低,但随着运动负荷的增加,其降低的程度越来越小(2)比目鱼肌：与安静对照组比较,随着运动负荷的增加,TnT逐渐降低；Tm表达量总体降低,但其降低的程度越来越小。TnI mRNA表达量总体升高,但随着运动负荷的增加,其升高的程度越来越小。Tm mRNA表达量总体降低,但随着运动负荷的增加其降低的程度越来越小。(3)左心室肌：与安静对照组比较,TnT和Tm表达量总体增加,但随着运动负荷的增加,其增加的程度越来越小。TnI mRNA表达量逐渐减少,而Tm mRNA表达量逐渐增多。(4)电镜观察结果：不同负荷游泳运动对骨骼肌的快肌(股四头肌)、慢肌(比目鱼肌)及心房肌与心室肌的超微结构影响有所不同。①随着运动负荷的增加,股四头肌肌细胞中出现巨型线粒体,线粒体嵴数目减少、排列较为紊乱。比目鱼肌线粒体嵴排列相对整齐。②心室肌肌细胞Z线和M线开始出现增粗、扭曲、缺损,线粒体肿胀,嵴的排列紊乱。心房肌肌细胞中这些变化不太明显。结论：1、从横纹肌(骨骼肌和心肌)调节蛋白形态学角度提示：游泳运动对肌细胞肌丝调节蛋白有影响,随着运动负荷加大,会造成这些蛋白质的减少或增加,对肌细胞来说可能是一种损伤。2、力竭游泳运动对骨骼肌快肌与慢肌以及左心室肌与右心房肌的超微结构有不同的影响,并且在运动后恢复过程中超微结构也有不同的变化。这一现象可能是与这些肌细胞在力竭游泳运动中的功能不同有关。

全文目录


中文摘要  5-7
Abstract  7-9
符号说明表  9-10
一、综述部分 肌细胞调节蛋白——肌钙蛋白与原肌球蛋白的结构与功能  10-32
  1. 前言  10-11
  2. 肌钙蛋白结的构和功能  11-14
  3. 原肌球蛋白构和功能  14-16
  4. 肌钙蛋白和原肌球蛋白的临床应用研究  16-18
  5. 运动对心肌和骨骼肌结构与功能的影响  18-19
  6. 运动对肌钙蛋白和原肌球蛋白的影响  19-20
  7. 研究展望及本文的研究依据  20-22
  8. 参考文献  22-32
二、实验部分  32-101
  1. 实验材料与方法  32-39
    1.1 实验对象与分组  32
    1.2 运动条件  32
    1.3 运动模型的建立  32-33
    1.4 大鼠肌肉组织材料的备  33-34
    1.5 主要仪器和设备  34
    1.6 主要实验试剂  34-36
      1.6.1 IHC实验主要试剂  34-35
      1.6.2 ISH实验主要试剂  35
      1.6.3 ISH电子显微镜主要试剂  35
      1.6.4 主要试剂配制  35-36
    1.7 IHC实验方法  36-37
      1.7.1 IHC切片与染色  36-37
      1.7.2 IHC的显微图像分析方法  37
    1.8 ISH实验方法  37-38
      1.8.1 ISH切片与染色  37-38
      1.8.2 ISH的显微图像分析方法  38
    1.9 电镜超微结构的实验方法  38-39
      1.9.1 电镜材料的半薄切片与定位  38
      1.9.2 超薄切片与染色  38
      1.9.3 超微结构的图像观察和分析方法  38-39
    1.10 统计方法  39
  2. 实验结果  39-91
    2.1 实验前后大鼠一般情况的对比察  39
    2.2 IHC和ISH阴性对照染色结果  39-40
    2.3 Troponin和Tropomyosin IHC与ISH染色结果  40-64
      2.3.1 股四头肌TroponinT ICH  40-42
      2.3.2 比目鱼肌TroponinT IHC  42-44
      2.3.3 左心室肌TroponinT IHC  44-46
      2.3.4 股四头肌Tropomyosin IHC  46-48
      2.3.5 比目鱼肌Tropomyosin IHC  48-50
      2.3.6 左心室肌Tropomyosin IHC  50-52
      2.3.7 股四头肌TroponinI ISH  52-54
      2.3.8 比目鱼肌TroponinI ISH  54-56
      2.3.9 左心室肌Troponin I mRNA ISH  56-58
      2.3.10 股四头肌Tropomyosin ISH  58-60
      2.3.11 比目鱼肌Tropomyosin mRNA ISH  60-62
      2.3.12 各组左心室肌Tropomyosin mRNA ISH  62-64
    2.4 实验组大鼠肌细胞超微结构  64-91
      2.4.1 股四头肌超微结构  64-71
      2.4.2 比目鱼肌超微结构  71-77
      2.4.3 右心房超微结构  77-84
      2.4.4 左心室超微结构  84-91
  3. 分析讨论  91-95
    3.1 不同负荷运动对骨骼肌与心肌细胞Tm及其mRNA的影响  91-93
    3.2 不同负荷运动对大鼠骨骼肌与心肌TnT和TnI mRNA的影响  93-94
    3.3 不同负荷运动对骨骼肌快肌与慢肌以及心房肌与心室肌超微结构的影响  94-95
  4. 小结  95-96
  5. 结论  96-97
  6. 参考文献  97-101
致谢  101
攻读学位期间参加课题、学术会议及发表的学术论文  101-102

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