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急性β射线皮肤损伤创面及其表皮干细胞变化的实验研究

作　者: 陈季玲
导　师: 李利平
学　校: 南华大学
专　业: 烧伤整形外科
关键词: 辐射损伤 皮肤 表皮干细胞 β1整合素 p63
分类号: R818
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：研究SD大鼠皮肤急性β射线损伤后局部创面内不同时期表皮干细胞表面标记物β1整合素和p63表达的动态变化，探讨急性β射线皮肤损伤创面难愈合的机制，为临床治疗提供一定的理论依据。方法：正常2～3月龄SD大鼠102只，雌雄不限，体重（200±20）g，随机分为3组。照射组（实验组）：n=48，以直线加速器产生6MeV高能电子束单次照射大鼠臀部裸露皮肤，照射直径为3cm，总吸收剂量35Gy，建立急性深Ⅱ度β射线皮肤损伤动物模型；烫伤组（阳性对照组）：n=48，选用直径为2.5cm装满热水的试管置于温度设定为91℃的电热恒温水浴锅内，将大鼠裸露的臀部轻按在试管口并与水面紧密接触，致伤时间为8s，建立皮肤深Ⅱ度热力烫伤动物模型，作为普通烫伤对照；正常组（阴性对照组）：n=6，正常大鼠。取正常大鼠臀部皮肤组织及不同时间点（建立模型后的第1、3、7、14、21、28、35天）创面皮肤组织，采用组织病理切片技术、免疫组织化学法（SP法）及图像分析方法检测不同时相点表皮干细胞表面标记物β1整合素和p63的表达情况。结果：1、大体观察：照射组：大鼠于照射后3～5天臀部皮肤开始出现干性脱皮，受照局部出现充血性红斑；照射后7～14天，红斑颜色逐渐加深，形成与照射面积大小一致的皮肤坏死区，局部肿胀，大鼠易激惹；照射后14～21天，坏死的皮肤脱落后形成干燥创面，创缘红肿；照射后21～28天，创面周围渐有新生上皮长入，但生长缓慢；照射28~35天后，创面逐渐收缩，新生表皮区毛发生长缓慢。烫伤组：烫伤后即刻创面皮肤变白，光泽差，轻度肿胀，无水疱形成；烫伤3天后创面呈灰白色，边界清晰，无渗出；烫伤5～7天后创面干燥，开始结痂；烫伤9～14天后痂皮颜色加深，创面收缩，创缘无红肿及渗出；烫伤21天后痂皮脱落，创面微湿，逐渐缩小；烫伤后28天左右，创面基本愈合，有稀疏毛发生长。2、组织病理变化：照射组：照射后1～7天，表皮细胞及毛囊上皮肿胀，细胞数量减少，真皮及皮下组织出现充血性血管反应，胶原纤维排列紊乱；照射后14天表皮脱落消失，基底层破坏，真皮层受累，部分毛囊及皮脂腺破坏，血管扩张、充血，内皮细胞肿胀、脱落；照射后21～28天坏死组织层下胶原纤维变性、溶解、断裂、排列紊乱，可见成纤维细胞松散聚集形成的细胞团块，有畸形成纤维细胞，新生毛细血管数量较少，炎症细胞数量不多，肉芽组织增生不良；照射后35天表皮未完全覆盖创面，可见少量新生血管，胶原排列紊乱。烫伤组：烫伤后1～3天，表皮及大部分真皮组织凝固性坏死，胶原纤维融合成片，血管内皮细胞肿胀，创面有炎性细胞浸润，大部分毛囊、皮脂腺和汗腺被破坏，结构不清；烫伤后7天坏死组织与生活组织部分分离，散在肉芽组织形成；烫伤后14天肉芽组织生长活跃，同时表皮细胞增殖移行；烫伤后21天坏死组织脱落，可见大量新生表皮组织；烫伤后28～35天创面完全由表皮覆盖，有毛囊和皮脂腺长出。3、免疫组化：显示β1整合素和p63阳性细胞的表达：同一组织标本连续切片中基因物质p63阳性细胞的IOD均高于同时相点β1整合素阳性细胞的IOD，二者的变化规律一致。与正常对照组相比，照射组和烫伤组大鼠从造模后第1天起β1整合素和p63阳性细胞IOD值开始升高。烫伤组在伤后1～21天β1整合素和p63阳性细胞IOD与正常组比较均有统计学意义（P<0.05），在伤后14～21天阳性细胞IOD达高峰，之后随创面逐渐愈合而渐降低，烫伤后28～35天创面完全愈合后IOD值与正常组相比无统计学意义（P>0.05）；照射组在照射后1～7天β1整合素和p63阳性细胞IOD增加不明显，与正常组比较差异无统计学意义（P>0.05），照射后14～35天皮肤坏死区形成，创面出现后，阳性细胞表达增强，IOD值与正常组比较差异有统计学意义（P<0.05）；与烫伤组相比，照射组β1整合素和p63阳性细胞持续低表达，IOD值增加缓慢，在造模后第1、3、7、14、21天5个时间点两组比较均有统计学差异（P<0.05）。结论：1、以直线加速器产生6MeV高能电子束单次照射大鼠臀部皮肤，总吸收剂量35Gy，成功建立深Ⅱ度急性β射线皮肤损伤动物模型。2、局部皮肤受到一次大剂量β射线外照射后引起的急性损伤创面，与深Ⅱ度烫伤组大鼠相比，愈合过程中，表皮干细胞增殖、分化延迟，不能形成明显高峰，可能是急性β射线皮肤损伤创面迁延反复、经久不愈的原因之一。

全文目录


主要英文缩写中英文对照表  4-5
中文摘要  5-8
Abstract  8-12
引言  12-14
材料和方法  14-19
  （1） 实验材料  14-15
  （2） 实验方法  15-19
实验结果  19-31
讨论  31-36
结论  36-37
应用前景  37-38
参考文献  38-42
综述  42-53
  参考文献  49-53
攻读硕士研究生期间发表的论文  53-54
致谢  54

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中图分类: > 医药、卫生 > 特种医学 > 放射医学 > 放射病、放射损伤
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