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FoxP3、CD4~+CD25~+调节性T细胞、TLR2和TLR9在儿童传染性单核细胞增多症发病中的作用

作　者: 王佐凤
导　师: 王强
学　校: 泸州医学院
专　业: 儿科学
关键词: TLR2 TLR9 FoxP3 CD4~+CD25~+Treg 传染性单核细胞增多症 儿童
分类号: R725.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：本研究旨在探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞（Treg）及其转录因子FoxP3在儿童传染性单核细胞增多症（Infectious mononucleosis IM）发病中的作用；观察TLR2(Toll-like receptors， TLRs)和TLR9在传染性单核细胞增多症患儿外周血单个核细胞上的表达以及血浆IL-2、IL-10、TGF-β1、IFN-γ水平，分析其与IM发病的关系，为从细胞因子角度认识IM发病机制提供实验依据。方法：研究对象为2010年4月至2011年1月我院（四川省人民医院）儿科诊治的初次发病的急性期传染性单核细胞增多症患儿35例（IM急性期组），IM恢复期组35例（经治疗临床症状体征完全消失，病程一月时）以及健康对照儿童35例（对照组），三组儿童在年龄、性别上比较无统计学意义。1、采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2mRNA、TLR9mRNA、FoxP3mRNA的表达。2、采用液相芯片技术检测血浆IL-2、IL-10及IFN-γ的水平;双抗体夹心ABC-ELISA法检测血浆TGF-β1的水平。3、运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达率。4、统计学处理采用SPSS16.0统计软件进行分析，首先对数据进行正态性及方差齐性检验，运用one-way ANOVA比较三组儿童所测指标的差异，数据以均数加减标准差(±s)表示。结果：1、IM急性期组儿童外周血单个核细胞TLR2mRNA相对表达水平（4.03±0.56）显著高于对照组（2.22±0.57）及恢复期组（2.76±0.83）儿童TLR2mRNA相对表达水平（2.22±0.57）（P＜0.01）；2、IM急性期组儿童外周血单个核细胞TLR9mRNA相对表达水平（8.88±1.56）显著高于对照组（3.63±1.30）及恢复期组（5.34±1.60）儿童TLR9mRNA相对表达水平（P＜0.01），3、IM急性期组儿童外周血单个核细胞FoxP3mRNA相对表达水平（2.82±0.90）显著低于对照组儿童FoxP3mRNA相对表达水平（4.65±1.23）（P＜0.01），IM恢复期组儿童外周血单个核细胞FoxP3mRNA相对表达水平（4.11±1.37）与对照组儿童相对表达水平（4.65±1.23）比较无统计学意义（P＞0.05）。4、IM急性期组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：(42.97±16.36pg/ml)、(39.84±3.95pg/ml)，对照组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：(84.02±28.67pg/ml)、(69.86±3.95pg/ml)，IM恢复期组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：(58.85±19.42pg/ml)、(53.34±5.21pg/ml)，IM急性期组较对照组及恢复期组降低（P＜0.01）。IM急性期组儿童血浆细胞因子IFN-γ（108.82±14.34pg/ml）、TGF-β1（488.15±117.5pg/ml）的表达水平较对照组IFN-γ（22.00±9.74pg/ml）、TGF-β1（253.75±72.6pg/ml）及恢复期组IFN-γ（49.82±11.55pg/ml）、TGF-β1（318.62±90.1pg/ml）增高（P＜0.01）。5、IM急性期组儿童CD3~+、CD3~+CD4~+、 CD3~+CD8~+、 CD4~+/CD8~+、 CD4~+CD25~+测定结果分别为(80.66±4.88%)、(16.53±5.55%)、(62.71±8.76%)、(0.26±0.12)、(2.38±1.32%)，对照组儿童CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD4~+/CD8~+、CD4~+CD25~+测定结果分别为(63.04±5.51%)、(37.98±4.20%)、(27.71±6.52%)、(1.37±0.45)、(7.85±1.97%)，IM急性期组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），IM恢复期组儿童CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、 CD4~+/CD8~+、测定结果分别为(74.25±7.33%)、(29.89±6.03%)、(42.25±7.33%)、(0.71±0.19)，与急性期组比较差异有统计学意义（P＜0.01）， IM恢复期组儿童CD4~+CD25~+测定结果为(6.81±1.84%)，与对照组儿童(7.85±1.97%)比较无统计学意义（P＞0.05）。6、CD4~+CD25~+Treg与FoxP3mRNA的表达呈正相关，其相关系数为0.823（P＜0.05）。结论：1、IM急性期存在明显的免疫失衡，即CD3~+CD8~+明显增高，CD3~+CD4~+及CD4~+/CD8~+明显降低；IM免疫失衡的原因之一可能是由于CD4~+CD25~+Treg数量降低及其转录因子FoxP3表达下调导致的免疫抑制功能不足所致。本研究从调节性T细胞角度为进一步阐明IM的发病机制提供了实验依据；2、 IL-2、 TLR2和TLR9通过对CD4~+CD25~+Treg的调节参与了IM发病，并对CD4~+CD25~+Treg可能存在调控作用；3、细胞因子IFN-γ、IL-2、TGF-β1及IL-10参与了IM发病，本研究从细胞因子角度为认识IM发病机制提供了实验依据。

全文目录


摘要  4-7
Abstract  7-11
前言  11-18
材料与方法  18-29
结果  29-49
讨论  49-57
结论  57-58
参考文献  58-69
英汉缩略词对照表  69-70
致谢  70-71
综述  71-82
  参考文献  78-82

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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿内科学 > 小儿传染病
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