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丹参酮ⅡA对体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附作用的影响
作 者: 王宇非
导 师: 丛慧芳
学 校: 黑龙江中医药大学
专 业: 中医妇科学
关键词: 丹参酮ⅡA 子宫内膜异位症 在位内膜细胞 粘附作用
分类号: R711.71
类 型: 博士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
目的:子宫内膜异位症是目前临床常见的妇科疑难疾病之一,其发病机制至今尚不十分明确,因此其治疗也大多停留在改善临床症状上。目前多数中医学者认为瘀血阻滞是其主要的病因病机,活血化瘀为其基本治疗大法。现代研究证实子宫内膜能在异地种植生长,需经过粘附-侵袭-血管生成三个病理过程,分子水平的机理研究提示,阻断三者之一,即可影响子宫内膜异位症的形成和发展。而子宫内膜异位症在位内膜是关键,在位内膜的差异是发生内异症及内异症复发的决定因素。粘附是子宫内膜异位症形成的第一步骤。因此我们选择将药物直接干预在在位内膜上,研究其对粘附作用的影响,望求从“源头”阻止其发病。本课题成功的完成了子宫内膜异位症在位内膜细胞的体外培养工作,将活血化瘀药物丹参提取物丹参酮IIA作用于在位内膜,并探讨了丹参酮IIA对其粘附作用的影响。方法:1、参照Ryan等的细胞培养方法,成功建立了子宫内膜异位症在位内膜细胞体外培养模型。2、将不同浓度的丹参酮IIA作用于在位内膜细胞上,用western blot方法检测E-钙粘蛋白、CD44V6、ICAM-1蛋白含量的表达结果:1、本实验证明两组不同时期在位内膜细胞培养成活率具有统计学意义,P<0.05。两组经不同途径取材得到的子宫内膜细胞成活率无统计学意义,P>0.05。2、空白对照组E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白呈高表达丹参素IIA高剂量组与空白对照组比较,E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白含量较少,具有明显的统计学差异,p<0.01。丹参素IIA中剂量组和丹参素IIA低剂量组与空白对照组比较E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白明显较少,p<0.05。结论:1、体外培养子宫内膜异位症在位内膜细胞成功可行2、本实验结果表明丹参酮ⅡA可提高子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附蛋白E-cadherin.CD44v6及ICAM-1的含量,可能会阻止子宫内膜异位症的发生发展。
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全文目录
缩略词表 5-6 中文摘要 6-8 ABSTRACT 8-10 前言 10-12 文献综述 12-47 一、祖国医学对子宫内膜异位症的认识 12-30 (一) 对子宫内膜异位症病名的认识 12-13 (二) 对子宫内膜异位症病因病机的认识 13-18 1. 中医古籍对子宫内膜异位症病因病机的认识 13-15 2. 现代中医学对子宫内膜异位症病因病机的认识 15-18 (三) 中医药治疗子宫内膜异位症 18-30 1. 中医古籍对子宫内膜异位症的治疗 18-19 2. 现代中医药对子宫内膜异位症的治疗 19-30 二、现代医学对子宫内膜异位症的认识 30-47 (一) 现代医学对子宫内膜异位症的定义 30 (二) 现代医学对子宫内膜异位症病因病机的认识 30-39 (三) 现代医学对子宫内膜异位症病因病机的治疗 39-47 实验研究 47-67 一、子宫内膜异位症患者在位子宫内膜细胞与正常子宫内膜细胞培养 47-55 (一) 实验材料 47-49 1. 主要实验试剂 47 2. 主要仪器 47-48 3. 主要试剂的配制 48 4. 实验器材清洗与消毒 48-49 (二) 实验方法 49-53 1. 标本来源 49 2. 原代培养 49-50 3. 传代培养 50 4. 细胞观察与鉴定 50-51 5. 细胞冻存与复苏 51 6. 统计学分析 51 7. 结果 51-53 (三) 结论 53-55 二、丹参素ⅡA对子宫内膜异位症在位内膜粘附系列指标的影响 55-67 (一) 实验材料 55-58 1. 实验分组及给药 55 2. 实验仪器设备 55 3. 实验试剂 55-56 4. 实验所需溶液的配置 56-58 (二) 实验原理 58-59 (三) 实验方法 59-67 1. 总蛋白的提取 59 2. 测蛋白质(Pr)含量 59-60 3. 冻存变形的蛋白质(Pr) 60 4. Western Blot具体步骤 60-63 5. 统计学分析 63 6. 实验结果 63-67 讨论 67-73 一、立题依据 67-70 (一) 粘附与子宫内膜异位症 67-69 (二) 丹参酮ⅡA的药理药效研究 69-70 二、丹参酮ⅡA对体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附作用的影响 70-73 (一) E型钙依赖粘附蛋白(E-cadherin) 70-71 (二) 粘附分子CD44拼构变异体6(CD44v6) 71 (三) 细胞间粘附分子-1(ICAM-1) 71-73 结论 73-74 致谢 74-75 参考文献 75-85 附图 85-86 攻读博学位期间发表的论文 86-88 个人简历 88
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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 子宫内膜异位症
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