学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

2010年宁夏致病疫霉群体特征的研究

作　者: 宋俊丽
导　师: 朱杰华; 杨志辉
学　校: 河北农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 致病疫霉交配型甲霜灵抗性线粒体单倍型简单序列重复扩增片段长度多态性
分类号: S435.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 27次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

马铃薯晚疫病是由致病疫霉Phytophthora infestans (Mont.) de Bary引起的,是马铃薯生产上最具毁灭性的病害之一,给马铃薯生产造成了巨大损失。本研究对2010年采集自宁夏的94个马铃薯晚疫病菌株进行了交配型和甲霜灵抗性的表型测定,并利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、简单序列重复(SSR)和扩增片段长度多态性(AFLP)等分子标记技术对该群体的基因型进行了分析。由于在实验过程中发现了大量的A2交配型菌株,又选取了黑龙江、吉林和河北等地8省以及瑞士、美国和荷兰共计82株致病疫霉菌株,其中A1交配型40株,A2交配型42株,测定了该群体对甲霜灵的敏感性,并分析了该群体的线粒体基因型、SSR基因型及AFLP基因型。主要研究结果如下:1.宁夏致病疫霉群体特征:1.1交配型的测定:对2010年采自宁夏的94株致病疫霉进行了交配型的测定,结果表明,A2交配型86株,A1交配型1株,自育型7株。1.2甲霜灵敏感性测定:测定了94株宁夏致病疫霉菌株对甲霜灵的敏感性,结果供试菌株全部为抗性菌株,其中高抗菌株89株,中抗菌株5株。1.3线粒体DNA单倍型测定:以来自其它地域的8株致病疫霉菌株作参考,利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对94株宁夏致病疫霉菌株的线粒体DNA单倍型进行了分析,发现所有被测菌株均为Ia型。1.4 SSR基因型分析:以来自其它地域的8株致病疫霉菌株作参考,利用6对SSR引物对94株宁夏致病疫霉菌株进行了基因型鉴定,共鉴定出了2种SSR基因型,I型93株,是优势基因型,聚类结果显示群体的遗传多样性并不高,遗传差异比较小。1.5 AFLP基因型分析:利用4对多态性高、稳定性好的选择性扩增引物组合,对供试50个致病疫霉菌株(其中包括8个参考菌株)进行了AFLP扩增,共扩增出201条谱带,其中多态性条带173条,多态性百分率为86.1%。遗传多样性分析表明供试致病疫霉群体遗传多样性水平并不高,聚类结果显示A2交配型菌株与自育型菌株亲缘关系比较近,宁夏致病疫霉群体存在遗传分化。2.致病疫霉A1、A2交配型群体特征:2.1甲霜灵敏感性测定:测定了采集自黑龙江、吉林、河北和内蒙古等地的82个致病疫霉不同交配型菌株对甲霜灵的敏感性,结果A1交配型抗性比率为55%,A2交配型抗性比率为97%。2.2线粒体DNA单倍型测定:利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对82个致病疫霉菌株的线粒体DNA单倍型进行了分析,发现A1交配型菌株为Ⅱa和Ⅱb型,A2交配型菌株均为Ia型。2.3 SSR基因型分析:利用6对SSR引物对黑龙江、吉林、河北和内蒙古等地82个致病疫霉菌株进行了基因型鉴定,共鉴定出了17种SSR基因型。A1交配型菌株鉴定出12种SSR基因型,ⅩⅡ型是优势基因型;A2交配型菌株鉴定出5种SSR基因型,Ⅲ型是优势基因型。2.4 AFLP基因型分析:利用4对选择性扩增引物组合,对供试82个致病疫霉菌株进行了AFLP扩增,共扩增出212条谱带,其中多态性条带190条,多态性百分率为89.6%。遗传多样性分析表明供试致病疫霉群体遗传多样性水平并不高,聚类结果显示整体上A1交配型菌株与A2交配型菌株聚在不同的分支上,AFLP基因型与病菌的交配型有一定的相关性,与地理来源没有明显相关性。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
1 引言  10-16
  1.1 致病疫霉交配型的研究  10-11
  1.2 致病疫霉甲霜灵抗性的研究  11-12
  1.3 致病疫霉线粒体基因型的研究  12-13
  1.4 致病疫霉 SSR 分子标记的研究  13-14
  1.5 致病疫霉 AFLP 分子标记的研究  14-15
  1.6 本研究的目的及意义  15-16
2 材料与方法  16-28
  2.1 试验材料及使用仪器  16-22
    2.1.1 供试菌株  16-19
    2.1.2 供试培养基  19-20
    2.1.3 供试主要试剂  20
    2.1.4 供试主要仪器  20
    2.1.5 mtDNA 单倍型测定 PCR 扩增引物和限制性内切酶  20-21
    2.1.6 SSR 引物  21
    2.1.7 AFLP 接头、引物的编号及序列  21-22
  2.2 试验方法  22-28
    2.2.1 致病疫霉的分离及纯化  22
    2.2.2 致病疫霉交配型的测定  22
    2.2.3 致病疫霉对甲霜灵的敏感性测定  22
    2.2.4 致病疫霉线粒体基因型分析  22-24
    2.2.5 致病疫霉 SSR 基因型分析  24-25
    2.2.6 致病疫霉AFLP 基因型分析  25-28
3 结果与分析  28-42
  3.1 宁夏致病疫霉群体特征的研究  28-37
    3.1.1 宁夏致病疫霉交配型分析  28
    3.1.2 宁夏致病疫霉对甲霜灵敏感性分析  28
    3.1.3 宁夏致病疫霉群体线粒体DNA 单倍型分析  28-29
    3.1.4 宁夏致病疫霉群体 SSR 基因型分析  29-32
    3.1.5 宁夏致病疫霉群体 AFLP 基因型分析  32-37
  3.2 致病疫霉A1、A2 交配型群体特征的研究  37-42
    3.2.1 致病疫霉A1、A2 交配型群体对甲霜灵抗性的比较  37-38
    3.2.2 致病疫霉A1、A2 交配型群体线粒体DNA 单倍型的分析  38
    3.2.3 致病疫霉A1、A2 交配型群体SSR 基因型的分析  38-40
    3.2.4 致病疫霉A1、A2 交配型群体AFLP 基因型的分析  40-42
4 讨论  42-44
  4.1 2010 年宁夏致病疫霉群体特征的研究  42-43
  4.2 致病疫霉A1、A2 交配型群体特征的研究  43-44
5 结论  44-45
参考文献  45-53
附录  53-57
在读期间发表的学术论文  57-58
作者简历  58-59
致谢  59-60

2010年宁夏致病疫霉群体特征的研究

内容摘要

全文目录

相似论文