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蓝光诱导对海带microRNA表达影响的研究
作 者: 李伟
导 师: 段德麟
学 校: 中国科学院研究生院(海洋研究所)
专 业: 海洋生物学
关键词: 海带 蓝光 microRNA(miRNA)
分类号: S917.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 66次
引 用: 1次
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内容摘要
光是植物生长发育的一种重要调控因子,蓝光对海带(Saccharina japonica)的生长发育具有重要作用。本研究以高通量测序为手段,结合生物信息学分析以及qRT-PCR检测,研究了蓝光对海带microRNAs(miRNAs)表达谱的影响,获得了参与海带蓝光响应的miRNAs。以蓝光、黑暗处理海带幼孢子体为材料,构建了其小RNA文库,通过高通量测序,获得了差异表达谱。根据小RNA的分类注释及Mireap软件分析,得到20种海带新miRNAs。通过与长囊水云(Ectocarpus siliculosus)基因组的比对,预测了这20种新miRNAs的二级结构。其中,sj-MIR07,sj-MIR16,sj-MIR20均具有多种二级结构。通过预测这些新miRNAs的靶基因序列,证明其具有较强的保守性。这些基因主要与内切酶、钙调蛋白、半乳糖氧化酶、热休克蛋白及其调控因子等有关。其中,sj-MIR05、sj-MIR07、sj-MIR12、sj-MIR15在蓝光诱导下上调,推测其可能与海带蓝光诱导有关。通过对miRNA的差异表达分析,获得739种已知的miRNA和6种新miRNA与蓝光诱导相关。qRT-PCR表达分析表明海带幼孢子体中只有部分miRNA与高通量测序的结果相吻合,这可能与2种方法所采用的建库方法差异有关。通过GO(Gene ontology)富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)代谢网络分析,整合差异表达的数据,我们获得了一些miRNAs(如miR398、miR1110、miR2840),推测其可能参与了蓝光诱导响应,与受体信号、辐射反应、生物钟、光形态建成、光刺激响应、光周期及光转导相偶联,这些miRNA的功能有待在后续验证中深入探讨。
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全文目录
致谢 4-5 摘要 5-6 Abstract 6-8 第一章 文献综述 8-18 1. 高等植物的光形态建成 8-11 2. 藻类的光形态建成 11-14 3. micorRNA 及其在植物中的功能 14-16 4. 研究目的与意义 16-18 第二章 海带小RNA文库的构建及测序 18-28 1. 材料与方法 18-21 2. 结果与分析 21-25 3. 讨论与小结 25-28 第三章 海带miRNA的生物信息学分析 28-40 1. 材料与方法 28-29 2. 结果与分析 29-38 3. 讨论与小结 38-40 第四章 海带蓝光响应miRNA的筛选 40-58 1. 材料与方法 40-43 2. 结果与分析 43-55 3. 讨论与小结 55-58 第五章 结论 58-60 参考文献 60-74 缩略词表 74-75 作者简介 75
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产基础科学 > 水产生物学 > 水产植物学
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