α-淀粉酶抑制蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，建立测定小麦α-淀粉酶抑制蛋白的ELISA方法；用籽粒发芽法和整穗发芽法鉴定小麦花后不同时期的穗发芽抗性，用凝胶扩散法测定小麦花后不同时期的α-淀粉酶活性和α-淀粉酶抑制蛋白活性；用建" />

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一、α-淀粉酶抑制蛋白与穗发芽的关系及其ELISA检测方法的建立二、鸭跖草叶点霉的RAPD分析及其致病性与dsRNA的关系

作　者: 胡汉桥
导　师: 陈孝；朱平
学　校: 中国农业科学院
专　业: 作物遗传育种
关键词: α-淀粉酶抑制蛋白 α-淀粉酶 ELISA 穗发芽叶点霉 dsRNA RAPD 聚类分析
分类号: S435.121
类　型: 博士论文
年　份: 2001年
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内容摘要

制备抗小麦α-淀粉酶抑制蛋白的学位论文">α-淀粉酶抑制蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，建立测定小麦α-淀粉酶抑制蛋白的ELISA方法；用籽粒发芽法和整穗发芽法鉴定小麦花后不同时期的穗发芽抗性，用凝胶扩散法测定小麦花后不同时期的α-淀粉酶活性和α-淀粉酶抑制蛋白活性；用建立的夹心ELISA法和SDS-PAGE法测定小麦花后不同时期α-淀粉酶抑制蛋白的浓度。结果表明：小麦品种间穗发芽抗性、α-淀粉酶和α-淀粉酶抑制蛋白浓度存在极显著的差异。红粒品种的穗发芽抗性比白粒品种高。人王降雨整穗发芽法是测定小麦穗发芽抗性的一种简单有效的方法。α-淀粉酶活性在开花25d后逐渐下降，α-淀粉酶活性与穗发率呈显著的正相关，降落值的大小与穗发芽率呈极显著的负相关。种子发育后期的α-淀粉酶活性高低可以作为鉴定小麦穗发芽抗性的指标。用凝胶扩散法发现小麦种子中的α-淀粉酶抑制蛋白不能抑制标样α-淀粉酶活性。α-淀粉酶抑制蛋白的浓度与穗发芽率呈负相关，但相关不显著，α-淀粉酶抑制蛋白在一定程度上可以抑制穗发芽。α-淀粉酶抑制蛋白的浓度在开花后35d和40d时保持稳定。筛选出一些α-淀粉酶活性低、α-淀粉酶抑制蛋白含量高的抗穗发芽品种，可用来提高小麦品种的穗发芽抗性。提出了小麦穗发芽机制的一种模型：随着种子中脱落酸的积累，α-淀粉酶抑制蛋白逐渐升高，并抑制种子α-淀粉酶活性，使种子中α-淀粉酶活性下降，种子中剩余的α-淀粉酶活性是造成穗发芽的一个主要原因。测定来自东北地区鸭跖草叶点霉的生物学特性及致病力。根据菌落的形态、颜色、生长速率和产孢特性，初步将供试的12个菌株分为6种培养类型。菌株间存在明显的致病力分化现象，致病力强弱从南到北逐渐减弱。根据致病力的强弱可将供试菌株分为3种类型。研究供试菌株dsRNA与致病力的关系，在所测定的菌株中有10个含有dsRNA，2个不含dsRNA，菌株致病力强弱与dsRNA无相关性。CTAB法是提取真菌基因组的一种有效方法。运用RAPD技术对东北三省不同地区的鸭跖草叶点霉基因组DNA进行多态性分析。用18个随机引物对12个菌株进行扩增，所有的引物均出现扩增条带，大小在3.0-0.1kb之间，共扩增出104条带，其中43条具有多态性。系统分析的结果表明，在类间距离15以下可将12个鸭跖草叶点霉分为5个类群。来自辽宁和吉林地区的菌株类间距离较小，其亲缘关系较近；来自黑龙江的4个菌株有3个属于第1群，另外1个单独为第5群，它们与辽宁和吉林的菌株亲缘关系较远。

全文目录

第一部分 α-淀粉酶抑制蛋白的学位论文">α-淀粉酶抑制蛋白与穗发芽的关系及其ELISA检测方法的建立  3-67
  摘要  3-4
  前言  4-10
    一穗发芽的危害  4
    二 α-淀粉酶  4-5
    三 α-淀粉酶抑制蛋白  5-8
    四穗发芽的遗传  8
    五免疫学测定抗原的方法及α-淀粉酶抑制蛋白抗体特异性  8-10
  实验一春性小麦品种不同灌浆期穗发芽抗性的比较  10-25
    材料与方法  10-11
    结果与分析  11-25
  实验二 α-淀粉酶活性及降落值的测定  25-42
    材料与方法  25
    结果与分析  25-42
  实验三 α-淀粉酶抑制蛋白活性及浓度的测定  42-56
    1 α-淀粉酶抑制蛋白活性的测定  42-43
      材料与方法  42
      结果与分析  42-43
    2.SDS-PAGE薄层扫描测定α-淀粉酶抑制蛋白的浓度  43-49
      材料与方法  43-44
      结果与分析  44-49
    3 夹心法酶联免疫测定α-淀粉酶抑制蛋白的浓度  49-56
      材料与方法  49-52
      结果与分析  52-56
  讨论  56-59
  结论  59-60
  Abstract  60-61
  参考文献  61-67
第二部分鸭跖草叶点霉的RAPD分析及其致病性与dSRNA的关系  67-84
  摘要  67-68
  前言  68-73
    一农田杂草的危害及杂草防除中存在的问题  68
    二农田杂草病原真菌资源及其在杂草防除上的应用  68-69
    三病原真菌致病力的分化  69-71
    四 RAPD分子标记在植物病原真菌害研究中的应用  71-72
    五本项研究重要意义  72-73
  实验一鸭跖草叶点霉的培养性状、致病力与dSRNA的关系  73-77
    材料与方法  73
    结果与分析  73-76
    讨论  76-77
  实验二鸭跖草叶点霉的种内多态性RAPD分析  77-81
    材料与方法  77-78
    结果与分析  78-80
    讨论  80-81
  结论  81
  Abstract  81-82
  参考文献  82-84

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