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TRAIL及其受体在外周血淋巴细胞AICD及诱导人肝癌细胞凋亡中作用的研究

作 者: 季军捷
导 师: 郭亚军;时玉舫
学 校: 第二军医大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 凋亡 激活诱导细胞死亡 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 探针 死亡受体
分类号: R735.7
类 型: 博士论文
年 份: 2002年
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内容摘要


Activation-induced cell death (AICD)是机体免疫系统维持平衡、稳定,防止机体产生过度免疫反应,清除自身反应淋巴细胞的重要机制;TNF related apoptosis inducing ligand (TRAIL)是新近发现的TNF(肿瘤坏死因子)家族新成员,其诱导细胞凋亡的能力可与FasL相媲美,尤其它能够特异性诱导某些肿瘤细胞凋亡的功能更是受到人们的关注,本研究观察了TRAIL及其受体在外周血淋巴细胞AICD中的表达变化以及它们同Fas-FasL系统的相互联系和作用;最后利用TRAIL的五种受体的基因探针检测了它们在具有不同TRAIL敏感度的肝癌细胞上的表达分布,并同时检测了这些肝癌细胞经放线菌素D处理后TRAIL受体的变化,本研究旨在对TRAIL及其受体在机体淋巴细胞AICD中的作用以及同Fas-FasL系统的相互关系、肿瘤细胞对TRAIL的敏感性差异、TRAIL抗肝癌的临床应用提供理论基础。实验分为两个部分,第一部分首先利用分离的外周血淋巴细胞建立了AICD模型,然后通过RT-PCR反应构建了TRAIL及其受体R1、R2、R3、R4、R5的基因探针,并用同位素标记,利用Northern-blot检测了外周血淋巴细胞AICD过程中连续不同时间点的TRAIL及其受体的表达变化,得出TRAIL及其死亡受体R2参与了淋巴细胞的AICD过程,它们在细胞的凋亡阶段达到最高水平,TRAIL的其它类受体没有表达,TRAIL同其受体R2与Fas-FasL系统协同诱导淋巴细胞的凋亡,通过R2、Fas的blocking peptide干扰、阻断外周血淋巴细胞AICD的实验表明:Fas-FasL系统在外周血淋巴细胞AICD中发挥着主导作用;第二部分利用TRAIL的五种受体的基因探针检测了对TRAIL具有不同敏感度肝癌细胞株中的TRAIL受体组成以及这些肝癌细胞经放线菌素D处理后TRAIL受体的变化,得出TRAIL死亡受体R2在肝癌细胞中的表达较为显著,其对放线菌素D的反应因细胞株不同而不同,有的表达升高、有的表达降低、有的表达无变化,对TRAIL具有相同敏感度的细胞株,其受体R2的表达量也不同,因此肝癌细胞对TRAIL的敏感性不仅与其受体有关,还同其它因素有关,如何利用TRAIL的死亡受体R2提高肝癌细胞对TRAIL的敏感性及疗效在理论研究及临床治疗上都具有重要的意义。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-9
第一部分 TRAIL及其受体在外周血淋巴细胞AICD中作用的研究  9-37
  1. 材料和方法  9-22
  2. 结果  22-32
  3. 讨论  32-37
第二部分 TRAIL受体在诱导肝癌细胞凋亡中作用的研究  37-45
  1. 材料和方法  37-41
  2. 结果  41-42
  3. 讨论  42-45
参考文献  45-49
小结  49-51
综述1  51-74
综述2  74-81
致谢  81

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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