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姜黄素对急性肺损伤大鼠HO-1表达及前炎症因子产生的影响

作　者: 刘玉斌
导　师: 罗百灵
学　校: 中南大学
专　业: 呼吸内科
关键词: 姜黄素急性肺损伤血红素加氧酶 TNF-α IL-1β IL-6
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的研究姜黄素对实验性急性肺损伤(acute lung injury, ALI)大鼠血红素加氧酶(hemeoxygenase, HO)-1表达的影响；研究HO-1对前炎症因子TNF-a, IL-1β和IL-6的表达的调控作用。方法将40只大鼠随机分为5组：A组(对照组)：舌静脉注入等量生理盐水；B组(ALI模型组)：按小鼠体重注入LPS(5mg/Kg)以构建ALI模型；C组(姜黄素+LPS组)：注入LPS后10min注入姜黄素(50mg/kg);D组[LPS+姜黄素+氯血红素(Hm)]：在第C组的基础上补充Hm(10mg/Kg);E组[LPS+姜黄素+锌原卟啉(ZnPP)]:在第C组的基础上按10mg/Kg补充ZnPP。肉眼及显微镜下观察肺组织的病理改变情况；免疫酶联吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中TNF-a,IL-1β和IL-6的水平；获取肺组织,测量肺湿干重比例(W/D)和丙二醛(MDA)含量,并检测肺组织匀浆中HO-1的活性；最后采用逆转录PCR (RT-PCR)和Western blot检测肺组织中HO-1的mRNA和蛋白表达水平。结果1 ALI的病理组织学变化A组肺外观呈浅红色,包膜光滑,表面末见肿胀及出血点,显微镜下肺泡腔及支气管腔未见明显细胞及渗出物。B组肺体积增大,表面淤血,病理改变以肺间质病变为主,肺组织毛细血管明显扩张、充血,肺泡隔增宽,大量白细胞渗出、聚集。C组及D组病变有不同程度减轻,炎性细胞浸润减少,肺泡腔渗液减少,肺泡结构较完整。2肺组织湿干比及MDA含量变化注射LPS前后肺组织W/D比值分别为(3.96+0.44)和(4.92±0.37),经统计学分析,P<0.05。姜黄素处理后,与B组以及E组比较,大鼠肺组织W/D比值有统计学意义。LPS注入2h后肺组织中MDA含量开始高于对照组(P<0.05),注入6h和12h后更高(均P<0.05)：C组和D组MDA含量明显低于相应LPS组(P<0.05)；E组MDA含量分别高于相应LPS组。3 BLAF中TNF-α,IL-1β和IL-6水平对于ALI模型组,BALF中TNF-a,IL-1p和IL-6水平分别为(1563±36)pg/ml, (172±12) pg/ml和(402±36)pg/ml;姜黄素处理后,三者水平分别为。(965±42)pg/ml, (114±7) pg/ml和(153±16)pg/ml;ZnPP能逆转姜黄素对IL-1p和IL-6的降低效应,但对TNF-α含量无明显影响。4 HO-1的活性,mRNA水平以及蛋白表达药物处理6h和12h后,C组和D组肺组织中HO-1活性分别为(782.45±33.41) nmol/h.mg.protein, (892.18±62.44) nmol/h.mg.protein和(869.71±64.72) nmol/h.mg.protein,(966.79±52.81) nmol/h.mg.protein,明显高于B组(P<0.05)；E组肺组织中HO-1活性低于LPS组(P<0.05)。C组HO-1基因mRNA表达水平明显高于对照组和LPS组,但略低于D组(LPS+姜黄素+Hm组)。而E组与对照组相比无明显差异。内参β-actin的mRNA水平在所有处理组当中保持恒定。Western blotting结果显示,LPS处理后HO-1蛋白表达量有所增加,而姜黄素能进一步增加HO-1的量。E组与A组相比,HO-1的量无明显变化。结论1.姜黄素能有效改善ALI肺组织的病理状况,并能降低MDA的含量和BALF中TNF-α,IL-1β和IL-6含量,以及增加HO-1的活性,并促进其mRNA和蛋白表达。2.姜黄素对ALI的保护作用与上调HO-1的表达有关,后者通过抑制IL-1β和IL-6水平可能是其发挥保护作用的机制之一。

全文目录

摘要  4-7
ABSTRACT  7-12
主要英文缩写词索引  12-13
第一章前言  13-16
第二章实验材料  16-18
第三章实验方法及步骤  18-26
第四章实验结果  26-32
第五章讨论  32-35
第六章结论  35-36
参考文献  36-41
综述  41-48
  参考文献  44-48
成果目录  48-49
致谢  49

姜黄素对急性肺损伤大鼠HO-1表达及前炎症因子产生的影响

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