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[目的]研究白细胞介素-17是否能够刺激肝星状细胞增殖,并研究其对肝星状细胞的细胞周期变化的影响。[方法]以体外培养的肝星状细胞为研究对象,分别以200、400、600、800、1000μg/L(终浓度)的IL-17刺激,以不加IL-17的肝星状细胞为空白对照组,将细胞接种于含不同浓度IL-17的1640培养液中,置于C02培养箱中培养,分别培养24,48,72 h,每日作细胞计数,并绘制细胞生长曲线。取对数生长期的HSC细胞,胰酶消化后制成细胞悬液,接种于96孔平底培养板上,培养箱中培养24h后分别加入0、200、400、600、800、1000μg/L(终浓度)的IL-17,每组设5个复孔,分别培养24、48、72 h后,加入MTT后用酶标仪测吸光度值。将传代的HSC接种于6孔培养板中,每组3复孔,同步化处理12h,然后使用1640培养液继续培养,同时加入0、200、400、600、800、1000μg/L(终浓度)的IL-17,C02培养箱中继续培养,分别于48h、72 h后取样,收集细胞,碘化丙啶染色后用流式细胞仪检测细胞周期。[结果]1.与空白对照组相比,不同浓度的IL-17刺激肝星状细胞后,细胞计数结果显示,24 h后肝星状细胞数量增加不明显,48 h后细胞数量明显增加,72 h后细胞数量增加最明显。2.与空白对照组相比,不同浓度的IL-17在24 h后对细胞均无明显的刺激作用(P均>0.05),48 h后400,600,800μg/L的IL-17对细胞的刺激增殖作用明显增加,72 h后400,600,800μg/L的IL-17对细胞的刺激增殖作用最明显,而800μg/L的IL-17在细胞培养72 h后对细胞的刺激增殖作用最明显(P<0.01)；然而,1000μg/L的IL-17对细胞则有抑制作用(P<0.01),主要表现为24 h后抑制作用不明显,48 h开始出现抑制作用,72 h后对细胞的抑制作用最明显。3.与空白对照组相比,不同浓度的IL-17刺激肝星状细胞24h后对细胞的周期变化影响不明显,48h后400,600,800μg/L的IL-17所刺激的肝星状细胞S期细胞比例开始升高,G0/G1期的细胞比例开始降低,72 h后400,600,800μg/L的IL-17所刺激的肝星状细胞S期细胞比例明显升高,G0/G1期细胞比例显著降低,细胞增殖以S期为主。在细胞同等增殖时间范围内,细胞增殖指数随着IL-17浓度的增长而增加,800 gg/L的IL-17刺激的肝星状细胞增殖指数最高,而800μg/L的IL-17在72 h后对肝星状细胞的刺激增殖作用最明显。1000μg/L的IL-17则抑制细胞周期,24小时后对细胞周期的抑制作用不明显,48h后表现出明显的抑制作用,72h后对细胞的抑制作用最明显,其能使细胞周期停滞于G1期(P<0.01)。[结论]1.IL-17能刺激肝星状细胞的增殖,在一定的程度和范围内呈现剂量和时间依赖性。800μg/L的IL-17在细胞培养72 h后对细胞的刺激增殖作用最明显。2.IL-17刺激肝星状细胞后对细胞的周期有一定的影响。IL-17能够促进肝星状细胞由G0/G1期进入S期,细胞增殖以S期为主。
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