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Snail和Twist在滑膜肉瘤中的表达及其与上皮分化的关系

作　者: 夏文彬
导　师: 孙保存
学　校: 天津医科大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 滑膜肉瘤转移 SYT-SSX Snail Twist E-cadherin
分类号: R738.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 26次
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内容摘要

目的：检测人滑膜肉瘤组织中Snail和’Twist的表达情况,分析它们与临床病理学参数的关系,以及其对滑膜肉瘤转移和患者总体生存的影响。探讨Snail和Twist促进滑膜肉瘤转移的可能机制。方法：本研究收集天津医科大学附属肿瘤医院1992年至2005年间的滑膜肉瘤手术切除、石蜡包埋的组织标本133例,通过免疫组化染色分析滑膜肉瘤中Twist和Snail的表达情况,结合临床病理资料分析二者与滑膜肉瘤病理特征的关系,以及对滑膜肉瘤转移和患者生存的影响。通过Real-time PCR (real-time reverse transcription-polymerase chain reaction)检测天津医科大学附属肿瘤医院组织库冻存的新鲜滑膜肉瘤标本中Twist和Snail的mRNA表达情况,通过逆转PCR检测(reverse transcription-polymerase chain reaction)滑膜肉瘤的融合基因亚型,分析融合基因不同的滑膜肉瘤中Twist和Snail的mRNA表达情况。通过免疫组化技术检测滑膜肉瘤中上皮标记蛋白CK、EMA和E-cadherin的表达情况,分析它们与Snail和Twist表达的关系,初步探讨Snail和Twist调节滑膜肉瘤转移的可能机制。结果：Snail主要表达于滑膜肉瘤细胞的细胞核,高表达率为65.7%(82/133),与组织学分型有关(P<0.05); Twist主要表达于滑膜肉瘤细胞的细胞质,高表达率为41.4%(55/133),两者的表达与组织学分型以及临床分期有关(P＜0.05)。而与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、组织学分级等无关(P＞0.05)。单因素生存分析结果显示,Twist高表达组患者总生存期和无转移生存期明显低于其低表达组,差异有统计学意义(Log Rank值=8.620,P=0.03和Log Rank值=11.462,P=0.001)；Snail高表达患者的无转移生存期明显低于其弱表达组,差异有统计学意义(x2=4.575,P=0.032),而总生存期的差异无统计学意义(x2=0.602,P=0.438)；且二者联合表达组患者总生存期和无转移生存期明显低于其弱表达组,差异有统计学意义(x2=13.619,P=0.003和x2=15.548,P=0.001)。PCR结果表明SYT-SSX1型滑膜肉瘤中Snail mRNA和Twist mRNA的表达率高于SYT-SSX2型滑膜肉瘤(分别为P=O.009,P=0.041)。免疫组化结果也表明SYT-SSX1型滑膜肉瘤中Snail和Twist的蛋白表达率高于SYT-SSX2型滑膜肉瘤,且Twist蛋白在融合基因不同的滑膜肉瘤中的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。E-cadherin蛋白的表达在Snail表达阳性的滑膜肉瘤中较Snail表达阴性者中较低；E-cadherin蛋白表达在Twist表达阳性的滑膜肉瘤中较Twist表达阴性者中较低,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论：1在SYT-SSX1型滑膜肉瘤中Twist mRNA和蛋白的表达较SYT-SSX2型滑膜肉瘤高。提示,融合基因可能对Snail和Twist具有调控作用。2滑膜肉瘤组织中存在Twist和Snail的高表达,且二者联合表达的滑膜肉瘤更容易转移,患者预后不良。3 Snail和Twist可下调E-cadherin的表达,从而促进了滑膜肉瘤的转移。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语  10-11
前言  11-15
  研究现状、成果  11-14
  研究目的、方法  14-15
一、Snail和Twist在人滑膜肉瘤组织中的表达及临床意义  15-31
  1.1 对象和方法  15-17
    1.1.1 对象和方法  15
    1.1.2 主要仪器和试剂  15
    1.1.3 实验方法  15-17
  1.2 结果  17-26
    1.2.1 滑膜肉瘤患者的临床病理和随访资料  17-18
    1.2.2 组织芯片结果  18
    1.2.3 免疫组化结果  18-19
    1.2.4 Snail和Twist与滑膜肉瘤临床病理参数之间的关系  19-22
    1.2.5 Snail和Twist对滑膜肉瘤组织分化的影响  22-23
    1.2.6 Snail和Twist对滑膜肉瘤转移的影响  23-26
  1.3 讨论  26-30
  1.4 小结  30-31
二、Snail和Twist与SYT-SSX及上皮分化的关系  31-49
  2.1 对象和方法  31-39
    2.1.1 实验材料  31
    2.1.2 逆转PCR和Real-time PCR  31-38
    2.1.3 免疫组织化学染色  38-39
    2.1.4 统计方法  39
  2.2 结果  39-44
    2.2.1 逆转PCR和Real-time PCR结果  39-43
    2.2.2 免疫组化染色结果  43-44
      2.2.2.1 SY-TSSX融合基因不同的滑膜肉瘤中nSail和Twits蛋白表达的差异  43
      2.2.2.2 滑膜肉瘤中Snail和Twist的表达与上皮标记CK、EMA、E-cadherin表达的关系  43-44
  2.3 讨论  44-48
  2.4 小结  48-49
结论  49-50
参考文献  50-58
发表论文和参加科研情况说明  58-59
综述 Snail和Twist在肿瘤细胞上皮间充质转变中的作用  59-69
  综述参考文献  65-69
致谢  69

Snail和Twist在滑膜肉瘤中的表达及其与上皮分化的关系

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