学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
三维回转模拟失重对人牙周膜成纤维细胞生物学性能的影响
作 者: 王磊
导 师: 曹军;骞爱荣
学 校: 第四军医大学
专 业: 口腔临床医学
关键词: 失重模拟 三维回转器 人牙周膜成纤维细胞 增殖 凋亡 细胞骨架 Ⅰ型胶原 RT-PCR
分类号: R85
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 24次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
微重力环境可引起肌肉骨骼系统、心血管系统、免疫系统、神经-内分泌系统、自主平衡系统等各个系统的改变,如骨丢失、肌肉萎缩、心血管系统失调、立位耐受性下降、认知功能降低等等。那么,微重力环境对牙周组织会造成怎样的影响呢?在本研究中我们拟采用三维回转器(three dimensional clinostat,TDC)来模拟失重环境,从这种失重环境对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts, hPDLFs)生物学性能的影响入手,对这一问题进行了探讨。目的:观察模拟失重环境对hPDLFs形态和功能的影响,初步探讨在这一特殊环境中工作、生活的个体(如宇航员、太空旅游者)的牙周组织对这种环境的耐受性。方法:取体外培养的4-7代hPDLFs,接种于20ml培养瓶贴壁24h,随机分为回转组和对照组。运用三维回转器(three dimensional clinostat,TDC)模拟失重环境,设定(4-10)r/min随机转速,所产生的重力水平在(10-3-10-4 )g间。回转组hPDLFs在TDC中分别培养48h、72h和96h,对照组细胞分别在常规环境中培养。然后进行以下检测,比较分析两组间细胞的差异性。1细胞形态学检测:利用HE染色、罗丹明-鬼笔环肽免疫荧光染色观察两组间细胞形态及细胞微丝骨架的变化。2细胞功能检测:利用细胞计数法、MTT细胞活力检测、流式细胞术、Hoechst 33258核染色及RT-PCR技术,比较两组细胞间增殖、凋亡及I型胶原mRNA的表达等细胞功能的差异。结果:1 TDC模拟失重对hPDLFs细胞形态的影响HE染色:培养48h后,回转组和对照组hPDLFs均呈梭形或多角形,细胞核大,居中,胞体丰满,胞浆均匀,未出现胞浆内颗粒增多、胞内空泡、核分叉、核碎裂等现象。但回转组细胞的胞核面积较对照组缩小约12%(P<0.05);培养72h和96h后,回转组细胞形态与对照组比较无明显差异。罗丹明-鬼笔环肽免疫荧光染色:培养48h后,回转组微丝骨架结构略显模糊,排列较对照组稍显紊乱。培养72h和96h后,回转组和对照组微丝骨架结构均呈现清晰而有规律的束状结构,分布均匀。2 TDC模拟失重对hPDLFs细胞功能的影响细胞计数仪计数:培养48h和72h后,回转组与对照组hPDLFs细胞数量无明显差异(P>0.05);培养96h后,回转组与对照组细胞计数结果有显著差异,回转组细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。MTT细胞活力检测:培养48h后,回转组与对照组细胞活力无明显差异(P>0.05);培养72h和96h后,回转组细胞活力明显高于对照组(P<0.01)。细胞周期:培养48h和72h后,回转组与对照组细胞周期S期所占总周期的百分比例结果无明显差异(P>0.05);模拟失重培养96h后,回转组细胞周期S期所占总周期的百分比例高于对照组(P<0.05)。Hoechst 33258核染色:培养48h、72h和96h后,回转组和对照组hPDLFs细胞核均呈弥散均匀荧光,细胞核边缘光滑圆润,未出现细胞核固缩、核碎裂、浓染致密的颗粒块状凋亡小体荧光。RT-PCR:培养48h和72h后,回转组hPDLFsⅠ型胶原mRNA表达较对照组变化不明显(P>0.05);培养96h后,回转组hPDLFsⅠ型胶原mRNA表达有所升高(P<0.05)。结论:暴露于微重力环境的初期(48h),hPDLFs表现出细胞核变小、微丝骨架结构稍显紊乱的形态学变化,但未出现细胞裂解、凋亡增强、细胞活性下降等破坏性变化。随着在微重力环境中暴露时间的延长(72h、96h),hPDLFs细胞形态恢复正常,并且逐渐表现出细胞活力、增殖能力及Ⅰ型胶原表达增强的功能状态。这一结果提示,hPDLFs对短期(96h)的微重力环境具有耐受性,但其所表现出的功能活动增强的情况会对牙周组织结构产生何种影响,尚需进一步的研究进行探讨。
|
全文目录
缩略语表 5-6 中文摘要 6-9 Abstract 9-13 前言 13-14 文献回顾 14-25 实验一 三维回转模拟失重对 hPDLFs 细胞形态的 影响 25-34 1 材料 25 2 方法 25-28 3 结果 28-31 4 讨论 31-34 实验二 三维回转模拟失重对 hPDLFs 细胞功能 的影响 34-44 1 材料 34-35 2 方法 35-38 3 结果 38-42 4 讨论 42-44 小结 44-46 参考文献 46-56 个人简历和研究成果 56-57 致谢 57
|
相似论文
- Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
- 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
- CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
- 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
- 螺原体细胞骨架蛋白与其细胞形态关系的研究,S945
- TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
- 凡纳滨对虾性腺抑制激素基因的克隆与表达,S917.4
- 冷却分割猪肉中腐败微生物分离鉴定与生长特性的研究,R446.5
- 昆虫OBP CSP和sid-1基因的预测及序列分析,Q78
- 河南省乙型脑炎病毒的分离鉴定及分子特性分析,S852.65
- PRRSV的感染差异性和抗体依赖性增强作用研究,S858.28
- 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
- 小麦苗期磷胁迫诱导紫色酸性磷酸酶基因和转录因子基因cDNA片段的克隆与分析,S512.1
- 茉莉离体快繁体系的建立,S567.239
- 蝴蝶兰(Phalaenopsis)脱毒快繁关键技术及其生理基础的研究,S682.31
- 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
- PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
- 血管生成调节因子对性成熟小鼠卵泡及其血管发育的影响,S852.2
- β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
- MMP-7和溶菌酶在DSS诱导的Balb/c小鼠溃疡性结肠炎模型发病机制中的作用,S858.91
- PCV2分离株增殖特性研究及板蓝根多糖、黄芪多糖对PCV2体外复制的影响,S858.28
中图分类: > 医药、卫生 > 特种医学 > 航空航天医学
© 2012 www.xueweilunwen.com
|