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四川重楼属植物细胞学及ITS序列研究

作　者: 岳海霞
导　师: 丁春邦
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物学
关键词: 重楼属染色体核型 Giemsa-C带 ITS序列亲缘关系
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

重楼Paris属于藜芦科(Melanthiaceae)重楼组(Parideae)植物,多年生草本,广布于欧亚大陆的热带及温带地区,在我国以西南各省区分布最多。目前发现全世界有28个种,我国分布有22个种,其中四川分布有19种(包括7变种)。该属植物具有清热解毒、消肿止痛、止血等功效,是我国传统的中药材。最新的研究发现,该属植物还具有抗癌的作用。其中P. polyphylla var. chinensis和P. polyphylla var. yunnanensis被中国药典2010版收载,其他种也作为民间中药材。重楼属植物是一类极具开发价值的药用植物。重楼属植物在四川地区资源分布广,种类多。由于种间形态差异小,人们的无意识采挖导致一些还未开发的种濒临灭绝。因此对重楼属植物资源的鉴别、优良品种的选育、野生资源的保护工作已经迫在眉睫。本文通过对12种川产重楼属植物的细胞学及ITS序列分析,旨在探讨重楼属资源种间亲缘关系和种质资源鉴定的方法。研究的主要结果如下：1、核型分析结果表明：12种川产重楼属植物的体细胞染色体数都是2n=10,基数为x=5,均为二倍体2n=2x=10,中期染色体由3对中部着丝粒染色体和2对端部着丝粒染色体或2对近端部着丝粒染色体。川产重楼属植物的核型具有多态性,不同居群在B染色体数量和随体有无上存在差异。P. undulatis核型中发现有primary lesion。2、带型分析结果表明：12种重楼属植物带型的共性体现在较长的端部着丝粒染色体上,这种共性显示了不同种间的亲缘关系。带型的差异性体现在其余染色体带的宽窄和多少上。带型在居群间具有多态性。首次报道了P. undulatis、P. polyphylla var. chinensis、P. marmorata和P. polyphylla var. alba的带型结构。3、采用UPGMA聚类方法,对ITS序列进行分析,结果表明：ITS序列中的522个碱基序列能够有效的将川产重楼属植物12个种区分开,其中,P. undulatis与P. cronquistii、P. polyphylla var. chinensis和P. polyphylla var. yunnanensis、P. polyphylla var. polyphylla与P. axialis和P. thibetica的亲缘关系较近。4、细胞学和ITS序列分析结果表明：采用ITS序列分析,结合Giemsa-C带带型和染色体核型分析,能较好地对重楼属植物进行鉴定,并能反映重楼属植物的亲缘关系。

全文目录

摘要  4-5
英文摘要  5-9
1 文献综述  9-15
  1.1 重楼属植物概述  9
  1.2 重楼属植物研究现状  9-15
    1.2.1 重楼属植物分类概况  9-10
    1.2.2 重楼属资源研究概况  10-11
    1.2.3 重楼属化学成分及临床应用研究概况  11
    1.2.4 重楼属细胞学研究概况  11-13
    1.2.5 重楼属的分子系统学研究概况  13-15
2 立题依据  15-16
3 材料与方法  16-22
  3.1 供试材料  16
  3.2 研究方法  16-22
    3.2.1 核型分析  16-18
    3.2.2 带型分析  18-20
    3.2.3 ITS序列分析  20-22
4 结果与分析  22-41
  4.1 核型分析  22-30
    4.1.1 卷瓣重楼Paris undulatis H.Li  23-24
    4.1.2 华重楼P.polyphylla var.chinensis(Franch.)Hara  24
    4.1.3 滇重楼P.polyphylla var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz  24-25
    4.1.4 凌云重楼P.cronquistii(Takht.)H.Li  25
    4.1.5 多叶重楼P.polyphylla var.polyphylla Smith  25
    4.1.6 五指莲P.axialis H.Li  25-26
    4.1.7 球药隔重楼P.fargesii var.brevpetalata(Huang et Yang)H.Li  26
    4.1.8 毛重楼P.mairei Levl  26-27
    4.1.9 花叶重楼P.marmorata Stearn  27
    4.1.10 禄劝花叶重楼P.luquanensis H.Li  27-28
    4.1.11 白花重楼P.polyphylla var.alba H.Li et R.J.Mitchell  28
    4.1.12 黑籽重楼P.thibetica Franch  28-30
  4.2 带型分析  30-36
    4.2.1 卷瓣重楼Paris undulatis H.Li  30-31
    4.2.2 华重楼P.polyphylla var.chinensis(Franch.)Hara  31
    4.2.3 滇重楼P.polyphylla var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz  31
    4.2.4 凌云重楼P.cronquistii(Takht.)H.Li  31-32
    4.2.5 多叶重楼P.polyphylla var.polyphylla Smith  32
    4.2.6 五指莲P.axialis H.Li  32
    4.2.7 球药隔重楼P.fargesii var.brevipetalata(Huang et Yang)H.Li  32
    4.2.8 毛重楼P.mairei Levl  32-33
    4.2.9 花叶重楼P.marmorata Stearn  33
    4.2.10 禄劝花叶重楼P.luquanensis H.Li  33
    4.2.11 白花重楼P.polyphylla var.alba H.Li et R.J.Mitchell  33-35
    4.2.12 黑籽重楼P.thibetica Franch  35-36
  4.3 ITS序列分析  36-41
    4.3.1 电泳结果  36
    4.3.2 ITS区长度及变异信息  36-40
    4.3.3 种间亲缘关系  40-41
5 讨论  41-51
  5.1 川产重楼属植物核型特征  41-44
    5.1.1 核型与居群关系  41-43
    5.1.2 核型进化关系  43-44
  5.2 川产重楼属植物带型特征  44-48
    5.2.1 Giemsa-C带技术的优化  44-45
    5.2.2 带型与居群关系  45-47
    5.2.3 种间带型比较  47-48
    5.2.4 带型与核型关系  48
  5.3 川产重楼属植物亲缘关系  48-49
  5.4 细胞学与ITS序列结果的一致性  49-51
6 结论  51-52
参考文献  52-56
致谢  56-57
在校期间研究成果  57

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