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苹果褐斑病病原多样性及品种抗病性鉴定研究

作　者: 黄园
导　师: 张荣
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 植物病理学
关键词: 苹果褐斑病 SSR聚类分析多基因序列分析抗性鉴定
分类号: S436.611
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 96次
引　用: 3次
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内容摘要

由冠盘二孢Marssonina coronaria引起的苹果褐斑病(Marssonina leaf blotch)是造成我国苹果早期落叶的主要原因。该病害在我国各苹果产区均普遍发生。近年,随着套袋技术的发展,一些果农放松了对叶部病害的防治,使其危害呈逐年加重的趋势。导致苹果树势减弱、产量降低、品质下降。苹果褐斑病田间症状复杂多样,不同地区、不同果园症状不同,甚至在同一果园、同一颗树上多种症状类型能够同时发生。本研究通过SSR分子标记与多基因分析对苹果褐斑病病原菌进行了遗传多样性分析。结合病原研究论文对我国主要苹果种质资源进行了抗病性初步鉴定,以期了解我国苹果种质资源的抗褐斑病特点,为抗病育种工作和品种合理布局等提供参考依据。取得如下结果:(1)SSR聚类分析初步表明苹果褐斑病病原存在明显遗传多样性;症状类型与SSR类群表现明显的相关性,可以将症状划分为四种类型:黑褐斑型、黄化落叶型、新梢斑点型、黄褐斑型,与一直沿用的“三种类型”划分法相比,更能代表田间症状。(2)苹果褐斑病部分菌株多基因(ITS、β-tubulin1、EF1、α-action、calmodulin )序列分析表明,病原菌不同菌株在各基因上都存在变异,但这些变异与症状类型间没有相关性,种内尚未形成与症状相关亚类群的种群分化,因此苹果褐斑病菌病原仍为一个种。(3)离体接种试验和田间品种圃自然发病调查,对苹果85个品种(品系、优系)抗褐斑病鉴定结果表明:高感品种包括美国八号、红玉等17个品种,占供试品种的20%;感病品种包括富士、粉红女士、秦阳等36个品种,占供试品种的42.4%;中抗品种包括皮诺娃、澳洲青苹等19个品种,占供试品种的22.4%;抗病品种包括鸡冠、嘎啦Ⅱ系等6个品种,占供试品种的7.1%;高抗品种包括延风、珊夏、倭金、东光、欢喜、延光、早捷7个品种,占供试品种的8.1%。供试的所有品种都能感染褐斑,没有发现免疫品种。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-12
第一章引言  12-19
  1.1 文献综述  12-17
    1.1.1 苹果褐斑病的症状  12
    1.1.2 苹果褐斑病病原  12-13
    1.1.4 苹果褐斑病防治方法  13-14
    1.1.5 种质资源抗病性评价  14-15
    1.1.6 应用于真菌分子生物学鉴定和遗传分析的几种技术  15-17
  1.2 本论文的研究目的和内容  17-19
第二章基于SSR 技术的苹果褐斑病病原多样性分析  19-30
  2.1 材料与方法  19-24
    2.1.1 菌株来源  19-20
    2.1.2 试剂与仪器  20-21
    2.1.3 DNA 的提取  21
    2.1.4 DNA 产率和纯度检测  21
    2.1.5 SSR 扩增  21-22
    2.1.6 SSR 扩增产物检测  22-24
    2.1.7 SSR 扩增谱带记录及数据分析  24
  2.2 结果与分析  24-28
    2.2.1 PCR-SSR 产物扩增图谱  24-27
    2.2.2 SSR 聚类分析  27-28
  2.3 结论与讨论  28-30
    2.3.1 结论  28
    2.3.2 讨论  28-30
第三章苹果褐斑病病原菌多基因序列分析  30-53
  3.1 材料和方法  30-33
    3.1.1 菌株来源  30-31
    3.1.2 试剂  31
    3.1.3 仪器  31
    3.1.4 DNA 的提取  31
    3.1.5 DNA 的检测  31
    3.1.6 多基因序列的扩增  31-32
    3.1.7 多基因片段产物测序  32
    3.1.8 DNA 序列分析  32-33
  3.2 结果与分析  33-52
    3.2.1 PCR 扩增产物检测  33-35
    3.2.2 多基因序列分析  35-49
    3.2.3 多基因序列系统发育分析  49-52
  3.3 结论与讨论  52-53
第四章苹果褐斑病抗性鉴定评价  53-60
  4.1 材料和方法  53-55
    4.1.1 材料  53
    4.1.2 方法  53-55
  4.2 结果与分析  55-58
  4.3 结论与讨论  58-60
    4.3.1 结论  58-59
    4.3.2 讨论  59-60
参考文献  60-64
致谢  64-65
作者简介  65

苹果褐斑病病原多样性及品种抗病性鉴定研究

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