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一粒小麦—野燕麦远缘杂交后代衍生系抗条锈病鉴定和筛选及其GISH技术体系建立

作 者: 张小娟
导 师: 康振生;韩德俊
学 校: 西北农林科技大学
专 业: 植物保护学
关键词: 一粒小麦 野燕麦 条锈病 远缘杂交 基因组原位杂交
分类号: S512.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 163次
引 用: 2次
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内容摘要


小麦条锈病是由小麦条锈菌引起的世界性重要的低温型病害,是限制小麦生产的重要因素之一。小麦条锈菌专化性强,生理小种变异快,需要寻找和引进新的抗条锈基因,满足生产需要。小麦近缘属种中含有丰富的抗病基因。葡萄牙野燕麦是小麦中一个野生近缘物种,对小麦白粉病、锈病、赤霉病高抗或免疫且具有早熟、抗旱、蛋白质、赖氨酸含量高的优良性状,是小麦育种的极好的种质资源。张庆勤教授用一粒栽培小麦与葡萄牙野燕麦杂交,得到杂种后代一粒葡系列。本研究通过形态学统计、条锈病鉴定和筛选、细胞学、原位杂交,对一粒小麦-野燕麦远缘杂交后代衍生系进行了系统的鉴定与分析。主要结果如下:1.田间农艺性状观察表明,一粒小麦-野燕麦远缘杂交后代衍生系综合性状良好,结实率和丰产性良好,建议作为抗条锈育种的抗源加以利用。2.本研究利用我国流行的小麦条锈菌生理小种对一粒小麦与燕麦杂交后代进行成株期和苗期抗病鉴定,并以抗病亲本葡萄牙野燕麦和感病亲本一粒小麦作对照,分离筛选出8个抗性稳定的株系,YLP-7、YLP-1-1、YLP-1-6、YLP-9-3、YLP-9-8、YLP-15-1、YLP-15-4和YLP-16-4,这些抗性系对所有参试条锈菌小种都表现为免疫或近免疫,表明,一粒葡材料具有超强的条锈病抗性。一粒葡抗性系鉴定和纯化为培育农艺性状优良的抗病新种质材料奠定了基础,建议作为抗源用于小麦抗病育种。3.对上述抗性稳定株系进行了根尖体细胞有丝分裂中期的染色体镜检。结果显示,染色体数均为46-52之间,可能为远缘杂交后代。4.以一粒小麦-葡萄牙野燕麦远缘杂交后代衍生系为实验材料,对影响其GISH实验效果的因素进行分析,研究结果表明:高质量的染色体制片是GISH体系的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例是GISH体系的关键。此外,还对实验中出现的情况和需注意的事项进行了分析,并提出了可能的原因及解决方法。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-11
第一章 文献综述  11-28
  1.1 小麦条锈病抗性资源的发掘  11-12
  1.2 小麦远缘杂交概况  12-13
    1.2.1 小麦远缘杂交的概念及意义  12
    1.2.2 普通小麦的近缘种属  12
    1.2.3 与普通小麦杂交成功的近缘种、属  12-13
  1.3 小麦远缘杂交中间材料的创制及应用  13-18
    1.3.1 人工合成双二倍体  13
    1.3.2 异附加系  13-15
    1.3.3 异代换系  15-16
    1.3.4 易位系  16-18
  1.4 小麦远缘杂交后代材料的鉴定  18-25
    1.3.1 形态标记鉴定  18-19
    1.3.2 细胞学标记  19-20
    1.3.3 生化标记鉴定  20
    1.3.4 原位杂交鉴定  20-22
    1.3.5 分子标记鉴定  22-25
  1.5 小麦与野燕麦远缘杂交的研究进展  25-26
  1.6 本研究的目的意义  26-28
第二章 材料与方法  28-33
  2.1 供试植物材料  28
  2.2 试剂与仪器  28
    2.2.1 试剂  28
    2.2.2 仪器  28
  2.3 研究方法  28-33
    2.3.1 小麦条锈菌菌种的繁殖  28
    2.3.2 苗期抗性鉴定  28-29
    2.3.3 根尖体细胞镜检  29
    2.3.4 农艺性状调查  29
    2.3.5 基因组原位杂交  29-33
第三章 结果与分析  33-39
  3.1 一粒小麦/葡萄牙野燕麦远缘杂交后代抗条锈病鉴定和筛选  33-34
    3.1.1 杂交后代成株期条锈病抗性鉴定和单株选择  33
    3.1.2 远缘杂交后代抗性系苗期对当前毒性小种抗性表现  33-34
  3.2 田间农艺性状观察  34-36
  3.3 抗性稳定材料的根尖体细胞及花粉母细胞染色体数观察  36
  3.4 基因组原位杂交技术体系的建立  36-39
    3.4.1 压片  36
    3.4.2 探针DNA 与封阻DNA 比例的确定  36-37
    3.4.3 杂交液变性条件的控制  37
    3.4.4 洗脱条件  37
    3.4.5 染色程度造成的差异  37-39
第四章 讨论  39-41
  4.1 一粒小麦/葡萄牙野燕麦远缘杂交后代衍生系的选育及应用价值  39
  4.2 影响原位杂交技术成功与否的关键因素  39-41
第五章 结 论  41-42
参考文献  42-50
附录  50-52
缩略词  52-53
致谢  53-54
作者简介  54

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > > 小麦
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