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湖南香柚中黄酮类化合物的研究

作　者: 彭程程
导　师: 邓放明
学　校: 湖南农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 湖南香柚 落果 黄酮类化合物 提取 定性 定量
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


本论文以湖南香柚落果为原料,探讨了其主要生物活性成分——黄酮类化合物的超声波提取工艺和分离纯化方法,并对香柚中的黄酮类物质进行了定性和定量研究。本文旨在为柚果类副产物的综合利用提供理论依据和技术支撑。其主要研究结果如下：1.采用双波长分光光度法建立了湖南香柚落果中黄酮类化合物含量的测定方法,检测方法呈现良好的线性关系,回归方程为：y=0.0071x+0.0081,线性相关系数R2=0.9995。2.通过比较四种不同的提取剂对香柚落果中黄酮类化合物提取量的影响,选择乙醇作为湖南香柚中黄酮类物质的提取溶剂,提取出的总黄酮含量为0.99%。3.对影响黄酮类化合物提取量的各个因素进行了单因素试验,采用正交试验设计,确定了香柚落果中黄酮类化合物浸提的最佳工艺条件,试验结果表明,最佳提取方案为乙醇浓度为80%、原料粉与提取液比为1：10、提取时间为60min、提取温度为70℃。最优试验组合中香柚落果中黄酮类化合物的提取率为4.52%。各个因素对香柚落果中黄酮类化合物得率的影响顺次为：A>D>C>B,即提取温度影响最大,其次是原料粉与提取液比和提取溶剂浓度,提取时间对黄酮类化合物的提取影响不大。4.在一定条件下,比较AB-8、NKA-9、D110、ADS-17四种大孔树脂对湖南香柚中黄酮类化合物的吸附率和解析率,试验结果表明,AB-8大孔树脂对湖南香柚中黄酮类物质具有良好的吸附作用,总黄酮吸附率达到0.70mg/mL,总黄酮回收率达到82.3%,用于纯化黄酮类物质是可行的。5.通过大孔树脂的动态吸附和动态洗脱试验得出,分离纯化湖南香柚中黄酮的最佳条件为：AB-8大孔树脂径高比1：10；吸附流速为1.5BV/h；淋洗液pH值为4.0；使用4BV用量70%的乙醇溶液作为洗脱剂；解析流速为2BV／h；大孔树脂重复使用3次之后需要再生。6.本试验采用液质联用仪对纯化后样品中黄酮类物质进行了定性检测,在30min内共分离出6个峰,经初步鉴定,其中四种物质为黄酮类物质,包括柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷。经加标回收率及精密度试验,该方法稳定可靠。7.本试验进行了纯化后样品中黄酮类化合物的定量分析,选取柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素以及桔皮素共五种黄酮类物质作为标准样品,通过对测定香柚黄酮色谱条件的试验,确定了检测波长,在l0min内分离出了柚皮苷和新橙皮苷,其中柚皮苷的保留时间为3.34min,含量为34.87mg/g,新橙皮苷保留时间为3.58min,含量为9.39mg/g。经加标回收率及精密度试验,该方法稳定可靠。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-13
第一章 绪论  13-23
  1 湖南香柚及其开发利用现状  13
  2 黄酮类化合物的研究现状  13-21
    2.1 黄酮类化合物的种类、结构及理化性质  13-14
      2.1.1 黄酮类化合物的种类及结构  13-14
      2.1.2 黄酮类化合物的理化性质  14
    2.2 黄酮类化合物的生理功能及作用机理  14-15
      2.2.1 防癌抗癌作用  14
      2.2.2 抗肿瘤作用  14
      2.2.3 抗心脑血管疾病作用  14
      2.2.4 抗骨质疏松作用  14-15
      2.2.5 消除自由基和抗氧化活性作用  15
      2.2.6 抗糖尿病作用  15
      2.2.7 抗辐射作用  15
    2.3 黄酮类化合物的提取方法  15-18
      2.3.1 热水提取法  15-16
      2.3.2 有机溶剂提取法  16
      2.3.3 碱液提取法  16
      2.3.4 微波提取法  16
      2.3.5 超声波提取法  16-17
      2.3.6 超临界流体萃取法  17
      2.3.7 酶解法  17
      2.3.8 半仿生提取法  17-18
      2.3.9 双水相提取法  18
      2.3.10 膜分离法  18
    2.4 黄酮类化合物的分离纯化方法  18-20
      2.4.1 柱色谱法  18-19
        2.4.1.1 硅胶柱色谱法  18
        2.4.1.2 聚酰胺柱色谱法  18
        2.4.1.3 葡聚糖凝胶(Sephadexgel)柱色谱法  18-19
        2.4.1.4 大孔吸附树脂分离法  19
      2.4.2 重结晶法  19
      2.4.3 高效液相色谱法  19
      2.4.4 聚酰胺薄层色谱法  19-20
      2.4.5 纸层析法  20
    2.5 黄酮类化合物的定性鉴定方法  20-21
      2.5.1 质谱(MS)法  20
      2.5.2 化学元素分析法  20
      2.5.3 紫外光谱(UV)检测法  20
      2.5.4 红外光谱(IR)法  20
      2.5.5 核磁共振波谱(1HNMR,13CNMR)法  20-21
  3 黄酮类化合物的应用前景  21-22
    3.1 制取天然抗氧化产品  21
    3.2 制备天然食品添加剂  21
    3.3 开发保健食品和新型药品  21
    3.4 研制无公害农药  21-22
  4 本研究的目的及意义  22
  5 本研究的主要内容  22-23
    5.1 香柚落果整果中黄酮类化合物的提取工艺研究  22
    5.2 香柚落果整果中黄酮类化合物的分离纯化工艺研究  22
    5.3 香柚落果整果中黄酮类化合物的定性与定量研究  22-23
第二章 湖南香柚中黄酮类化合物的提取工艺研究  23-35
  1 材料与方法  23-27
    1.1 试验材料  23
    1.2 仪器与设备  23-24
    1.3 试验方法  24-27
      1.3.1 提取工艺与操作要点  24
        1.3.1.1 提取工艺  24
        1.3.1.2 操作要点  24
      1.3.2 黄酮类化合物提取率的测定  24-26
        1.3.2.1 芦丁标准溶液的配制  24
        1.3.2.2 显色方法  24
        1.3.2.3 测定波长和参比波长的选择  24-25
        1.3.2.4 芦丁标准曲线的绘制  25
        1.3.2.5 样品中总黄酮提取率的测定  25
        1.3.2.6 重现性试验  25-26
        1.3.2.7 显色时间的稳定性试验  26
        1.3.2.8 回收率试验  26
      1.3.3 提取溶剂的选择及超声提取工艺的优化  26-27
        1.3.3.1 提取溶剂的选择  26
        1.3.3.2 提取黄酮类化合物的单因素试验  26
        1.3.3.3 超声提取黄酮类化合物工艺优化试验  26-27
  2. 结果与分析  27-35
    2.1 芦丁标准曲线的建立  27
    2.2 重现性试验结果  27-28
    2.3 显色时间的稳定性试验结果  28
    2.4 回收率试验试验结果  28
    2.5 提取溶剂的选择及超声提取工艺的优化  28-35
      2.5.1 提取溶剂的选择  28-29
      2.5.2 提取黄酮类化合物的单因素试验结果  29-32
        2.5.2.1 温度对黄酮类化合物提取量的影响  29-30
        2.5.2.2 提取时间对黄酮类化合物提取量的影响  30-31
        2.5.2.3 原料粉与提取液比对黄酮类化合物提取量的影响  31
        2.5.2.4 提取剂浓度对黄酮类化合物提取量的影响  31-32
      2.5.3 超声提取工艺优化试验结果  32-35
第三章 湖南香柚中黄酮类化合物的分离纯化工艺研究  35-44
  1 材料与方法  35-38
    1.1 试验材料  35
    1.2 仪器与设备  35-36
    1.3 试验方法  36-38
      1.3.1 分离纯化工艺流程  36
      1.3.2 大孔树脂预处理及再生  36
      1.3.3 大孔树脂的筛选  36-37
      1.3.4 大孔树脂动态吸附试验  37
        1.3.4.1 不同径高比对大孔树脂吸附效果的影响  37
        1.3.4.2 不同上样流速对大孔树脂吸附效果的影响  37
      1.3.5 大孔树脂动态洗脱实验  37-38
        1.3.5.1 不同淋洗液pH值对洗脱效果的影响  37
        1.3.5.2 不同浓度洗脱剂的洗脱效果  37-38
        1.3.5.3 不同用量洗脱剂的洗脱效果  38
        1.3.5.4 不同洗脱流速下的洗脱效果  38
        1.3.5.5 树脂重复使用次数的考察  38
  2 结果与分析  38-43
    2.1 大孔树脂的筛选结果  38-39
    2.2 大孔树脂动态吸附实验结果  39-40
      2.2.1 不同径高比对大孔树脂吸附效果的影响  39
      2.2.2 不同上样流速对大孔树脂吸附效果的影响  39-40
    2.3 大孔树脂动态洗脱实验结果  40-43
      2.3.1 不同淋洗液pH值对洗脱效果的影响  40-41
      2.3.2 不同浓度洗脱剂的洗脱效果  41
      2.3.3 不同用量洗脱剂的洗脱效果  41-42
      2.3.4 不同洗脱流速下的洗脱效果  42
      2.3.5 树脂重复使用次数的考察结果  42-43
  3 小结  43-44
第四章 湖南香柚中黄酮类化合物的定性定量研究  44-57
  1 材料和方法  44-46
    1.1 试验材料  44
    1.2 实验仪器与设备  44
    1.3 试验方法  44-46
      1.3.1 标准样品溶液的配制  44-45
      1.3.2 供试液制备  45
      1.3.3 定性分析试验  45-46
        1.3.3.1 色谱条件的选择  45
        1.3.3.2 质谱条件的选择  45
        1.3.3.3 回收率试验  45-46
        1.3.3.4 精密度试验  46
      1.3.4 定量分析试验  46
        1.3.4.1 色谱条件的选择  46
        1.3.4.2 检测波长的确定  46
      1.3.4.3 回收率试验  46
        1.3.4.4 精密度试验  46
  2 结果与分析  46-56
    2.1 香柚中黄酮类物质的定性分析结果  46-50
      2.1.1 香柚中黄酮类物质的质谱分析结果  46-48
      2.1.2 回收率试验  48-49
      2.1.3 精密度试验  49-50
    2.2 香柚中黄酮类物质定量分析结果  50-56
      2.2.1 检测波长的确定  50-52
      2.2.2 标样与样品的色谱图  52-54
      2.2.3 样品中黄酮类化合物的含量分析  54
      2.2.4 回收率试验  54-55
      2.2.5 精密度试验  55-56
  3 小结  56-57
第五章 全文结论  57-59
展望  59-60
主要创新点  60-61
参考文献  61-65
致谢  65-66
作者简历  66

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 中草药制剂的生产
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