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芦苇叶黄酮类化合物提取、分离、鉴定及抗氧化性研究

作　者: 孙丽芳
导　师: 刘邻渭
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 粮食、油脂及植物蛋白工程
关键词: 芦苇类黄酮水解抗氧化性
分类号: TQ914.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

芦苇为多年生禾本科芦苇属植物,它生长力强,分布面广,具有“第二森林”的美誉。芦苇叶具有一定的医药功能,这与其中含有多种生理活性物质,包括含有一定量的黄酮类化合物有密切关系。在芦苇叶的开发中,芦苇叶黄酮类化合物的开发具有诱人的前景,对于人类的健康具有积极的作用。本论文以芦苇叶为研究材料,对芦苇叶类黄酮的提取、分离、纯化、组分鉴定和抗氧化性能进行了研究,主要结果如下:1.在乙醇浓度为70%的条件下,微波法提取芦苇叶类黄酮最佳工艺参数为:液料比为30:1,微波功率为600 W,提取时间13 min,微波压力为1.4 MPa,在此工艺条件下,类黄酮的得率为1.46%。与其他常规方法比较,微波提取芦苇叶类黄酮具有得率高,提取时间短的优点。2.浓缩的芦苇叶类黄酮提取液再经大孔树脂纯化,可获得芦苇叶类黄酮初纯物,同时,浓缩芦苇叶类黄酮提取液的过程中可在容器壁上形成黑色的类似结晶状态的析出物。采用薄层色谱法(TLC)对初纯物和析出物进行的定性分析结果表明,初纯物可被分离成8种类黄酮组分,析出物可被分离成5种类黄酮成分,且这两种物质中既有相同的类黄酮成分又有不同的成分。3.比色法分析表明,析出物和初纯物的总黄酮含量分别为57.1%和18.5%;它们在酸浓度为1.4mol/L、温度为80℃-90℃的条件下水解4h,可获得相对最好的水解效果;HPLC测定表明,析出物含32种组分,其中7种得到确定,初纯物含22种组分,其中5种得到确定;水解析出物含28种组分,其中7种得到确定,水解初纯物含25种组分,其中7种得到确定。根据已确定的物质可知,芦苇叶含有芦丁、野黄芩苷、橙皮苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素(或橙皮素)、异甘草素和黄芩素,其中芹菜素含量最高。4.体外抗氧化测定结果表明,初纯物经聚酰胺薄层层析,所得的五种分离组分均具有一定的抗氧化能力,并具有量效关系。(1)五种组分清除DPPH自由基能力的排序为:3#组分>2#组分>4#组分>1#组分>5#组分。(2)五种组分清除ABTS自由基能力的排序为:3#组分>2#组分>1#组分>4#组分>5#组分。(3)采用磷钼络合物法测定抗氧化活性时,五种组分的总抗氧化能力的强弱顺序依次为:2#组分>1#组分>3#组分>4#组分>5#组分。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-11
第一章文献综述  11-19
  1.1 芦苇综述  11-12
    1.1.1 芦苇资源总括  11
    1.1.2 芦苇的营养价值与医药保健功能  11
    1.1.3 芦苇的用途  11-12
    1.1.4 芦苇的研究范围  12
  1.2 黄酮类化合物研究现状  12-18
    1.2.1 黄酮类化合物的理化性质  12-13
    1.2.2 黄酮类化合物的提取方法研究进展  13-15
    1.2.3 黄酮类化合物的测定方法研究进展  15
    1.2.4 黄酮类化合物的纯化技术研究  15-16
    1.2.5 黄酮类化合物的结构研究  16-17
    1.2.6 黄酮类化合物的抗氧化性研究进展  17-18
  1.3 本研究的目的与研究内容  18-19
    1.3.1 研究目的  18
    1.3.2 研究内容  18-19
第二章微波提取芦苇叶类黄酮的工艺研究  19-26
  2.1 材料与方法  19-20
    2.1.1 材料与试剂  19
    2.1.2 仪器与设备  19
    2.1.3 方法  19-20
  2.2 结果与分析  20-25
    2.2.1 液料比对类黄酮得率的影响  20-21
    2.2.2 提取时间对类黄酮得率的影响  21
    2.2.3 提取压力对类黄酮得率的影响  21-22
    2.2.4 微波功率对类黄酮得率的影响  22
    2.2.5 正交试验  22-24
    2.2.6 不同提取工艺的结果比较  24-25
  2.3 小结  25-26
第三章芦苇叶类黄酮的分离及初步纯化  26-35
  3.1 材料与方法  26-28
    3.1.1 材料与试剂  26
    3.1.2 主要仪器  26
    3.1.3 试验方法  26-28
  3.2 结果与分析  28-33
    3.2.1 聚酰胺柱层析的分离结果分析  28-31
    3.2.2 薄层分离的结果分析  31-33
  3.3 小结  33-34
  3.4 讨论  34-35
第四章芦苇叶类黄酮HPLC 分析  35-47
  4.1 材料与方法  35-37
    4.1.1 材料与试剂  35
    4.1.2 仪器与设备  35
    4.1.3 方法  35-37
  4.2 结果与分析  37-46
    4.2.1 样品水解条件优化  37-39
    4.2.2 水解前后样品HPLC 图谱分析  39-41
    4.2.3 水解前后初纯物的HPLC 图谱分析  41-42
    4.2.4 水解条件对初纯物和黑色析出物水解产物的影响  42-46
  4.3 小结  46
  4.4 讨论  46-47
第五章芦苇叶类黄酮组分的抗氧化性测定  47-53
  5.1 材料与试剂  47
    5.1.1 材料  47
    5.1.2 主要试剂  47
    5.1.3 主要仪器  47
  5.2 试验方法  47-48
    5.2.1 芦苇叶粗提取液的制备  47
    5.2.2 抗氧化试验样品的制备  47-48
    5.2.3 抗氧化指标测定方法  48
  5.3 结果分析  48-52
    5.3.1 清除DPPH 自由基能力  48-51
    5.3.2 清除ABTS 自由基的能力  51
    5.3.3 总抗氧化能力  51-52
  5.4 小结  52-53
第六章结论  53-55
  6.1 结论  53-54
    6.1.1 微波提取芦苇叶类黄酮的工艺研究  53
    6.1.2 芦苇叶类黄酮的分离纯化鉴定  53
    6.1.3 芦苇叶类黄酮HPLC 分析  53-54
    6.1.4 不同组分的抗氧化测定  54
  6.2 本研究的创新点  54-55
参考文献  55-61
致谢  61-62
作者简介  62

芦苇叶黄酮类化合物提取、分离、鉴定及抗氧化性研究

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