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慢性鼻—鼻窦炎手术样本的细菌培养研究

作 者: 诸葛盼
导 师: 杨蓓蓓
学 校: 浙江大学
专 业: 耳鼻咽喉科学
关键词: 慢性鼻-鼻窦炎 细菌培养 抗生素敏感试验
分类号: R446.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要


慢性鼻-鼻窦炎(Chronic Rhinosinusitis,CRS)是耳鼻咽喉科临床上的常见疾病,公认的致病因素为感染(细菌、真菌、病毒)、窦口鼻道复合体解剖结构异常、变态反应、黏膜黏液纤毛系统功能异常等。其中,细菌感染作为急性鼻-鼻窦炎的致病因素已无争议,但在CRS的致病作用尚未完全阐明。然而,临床上却是在每个CRS病例的手术前后都常规应用广谱抗生素治疗。随着抗生素的广泛应用,细菌的耐药现象得到了越来越多的关注。已经明确,需氧菌中的葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等均可被诱导产生β-内酰胺酶,大肠埃希菌和肺炎克雷伯氏菌可被诱导产生超广谱β-内酰胺酶,这类细菌对多数β-内酰胺类抗生素耐药。此外,耐甲氧西林葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococci,MRS)则具有对所有β-内酰胺类抗生素耐药的特征。用细菌培养的方法研究CRS病例的细菌感染率、菌群分布和耐药情况,对于规范应用抗生素,以及CRS的合理治疗都有重要意义。本研究对象为CRS病例,样本为内镜下鼻窦手术中获得的上颌窦口附近前组筛窦黏膜,采用需氧菌及厌氧菌培养,并进行抗生素敏感试验,检测抗生素耐药菌株。研究目的是调查本地区CRS病例的细菌培养阳性率、菌群分布和耐药菌株的生长情况,以便进一步规范CRS的治疗。材料与方法1、研究对象研究对象为2005年10月至2008年1月在金华市中心医院耳鼻咽喉科进行内镜下鼻窦手术的67例CRS病例。根据海口标准,Ⅱ型Ⅱ期51例、Ⅱ型Ⅲ期7例、Ⅲ型9例。所有病例术前均经过抗生素准备。2、标本收集在内镜下鼻窦手术过程中,无菌操作下取部分上颌窦口附近前筛窦黏膜样本,以连续平板划线法完成样本的厌氧血琼脂平板接种,将平板放入厌氧发生袋(含指示剂),封闭袋口。无菌操作下再取部分黏膜样本,置于无菌容器中,30分钟内与厌氧发生袋一同送细菌室。3、细菌培养与鉴定置于无菌容器中的样本以分区平板划线法分别接种于5%绵羊血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、巧克力琼脂平板,35℃、5%CO2孵箱孵育18-24小时观察菌落生长状况;厌氧发生袋也置于35℃、5%CO2孵箱内,孵育48小时观察结果。对分离的可疑病原菌行革兰染色,触酶或氧化酶试验,根据初步的革兰染色镜下观察结果选择相应的VITEK-AMS鉴定卡,所有细菌均鉴定到种。Nitrocefine纸片检测产β-内酰胺酶菌,双纸片法(头孢他啶及头孢他啶/克拉维酸组合,或头孢噻肟及头孢噻肟/克拉维酸组合)检测产超广谱β-内酰胺酶菌,头孢西丁纸片检测耐甲氧西林葡萄球菌。4、抗生素敏感试验采用标准琼脂扩散法(K-B法),并依据美国临床实验室标准研究所推荐使用的抗生素结合本地区临床用药习惯进行药敏纸片选择及抗生素敏感试验,按美国临床实验室标准研究所2005年抗微生物药物敏感性试验执行标准判断敏感、中介、耐药。嗜血杆菌的抗生素敏感试验按嗜血杆菌药敏试剂条操作规程进行实验及药敏判读。结果1、细菌培养与鉴定134份样本中共分离出40株细菌,其中需氧菌38株(95%),厌氧菌2株(5%)。培养分离出1株细菌的病例有38例,检出的细菌为需氧菌36株,厌氧菌2株;培养分离出2株细菌的病例有1例,检出的细菌均为需氧菌。培养检出细菌的病例共39例,阳性率为58.2%(39/67)。培养得到的革兰氏阳性需氧菌有21株,主要是凝固酶阴性葡萄球菌,有20株,占95.2%,见表1。表1样本中检出的革兰氏阳性需氧菌株培养得到的革兰氏阴性需氧菌有17株,主要是肠杆菌,有15株,占88.2%,见表2。表2样本中检出的革兰氏阴性需氧菌株培养得到的厌氧菌分别是1株消化链球菌,1株具核梭杆菌,见表3。表3样本中检出的厌氧菌株培养得到的葡萄球菌中,发现MRS15株,占71.4%,见表4。表4样本中检出的葡萄球菌和MRS培养得到的葡萄球菌中,发现产β-内酰胺酶菌(Beta-Lactamase-producingBacteria,β-LPB)20株,占95.2%,见表5。表5样本中检出的葡萄球菌和β-LPB2、抗生素敏感试验对葡萄球菌体外抗菌效果较好的抗生素有万古霉素、利福平等,见表6。表6葡萄球菌的部分抗生素敏感试验结果对肠杆菌体外抗菌效果较好的抗生素有亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶、庆大霉素,见表7。表7肠杆菌的部分抗生素敏感试验结果结论1、培养得到的阳性细菌均为鼻腔固定菌群,并且以条件致病菌为主,说明致病菌感染在CRS的发病机制中不是主要的。2、本地区CRS病例培养获得阳性细菌的耐药现象严重,应该引起重视,不加选择地应用抗生素治疗CRS的方法值得商榷。

全文目录


一、中文摘要  4-11
二、英文摘要  11-20
三、正文  20-39
  1、前言  20-22
  2、材料和方法  22-28
  3、结果  28-32
  4、讨论  32-35
  5、结论  35-36
  6、参考文献  36-39
四、综述  39-63
  参考文献  55-63
五、致谢  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 微生物学检验
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