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溴氰菊酯对鲫的毒性作用研究及残留检测

作　者: 胡琼予
导　师: 汪开毓；艾晓辉
学　校: 四川农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 溴氰菊酯鲫急性毒性解毒代谢酶乙酰胆碱酯酶遗传毒性残留气相色谱
分类号: S948
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 251次
引　用: 2次
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内容摘要

本研究对溴氰菊酯杀虫剂的各种毒性作用进行了综合性评价，以期为水产养殖的安全使用提供依据。以鲫（Carassius auratus）为试验鱼，研究了溴氰菊酯对鲫的急性毒性；研究了溴氰菊酯对鲫不同组织中的解毒代谢酶的影响以探讨其对机体解毒机制的毒性损伤；选择乙酰胆碱酯酶（AChE）为对象研究了溴氰菊酯对鲫靶标酶的毒性损伤；研究了溴氰菊酯对鲫的遗传毒性；以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和南美白对虾（Penaeus Vannamei）为试验材料，建立了水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留量的电子捕获气相色谱（GC-ECD）法。主要研究结果如下：在试验控制条件下，溴氰菊酯对平均体长4.5cm，平均体重2.7g的鲫的96hLC₅₀为61.17μg／L，安全浓度为6.117μg／L，属于高毒级药物。在试验条件下，2.039-6.117μg／L的溴氰菊酯对鲫的肝、鳃、肾等组织的解毒代谢酶活性变化规律大致一致表现为诱导机制，对其机体的抗氧化功能未造成损伤：在不同组织中解毒代谢酶活性受影响的程度不同，其中鳃的变化明显大于肝和肾；不同的溶剂对溴氰菊酯临床使用的毒性作用会产生影响。在试验条件下，2.039-6.117μg／L组的溴氰菊酯对鲫的肝、鳃、肾等组织的AChE活性表现为抑制到一定程度后转为诱导机制，各个溴氰菊酯浓度组并未影响各组织的AChE功能也未造成机体的组织损伤，鱼体对溴氰菊酯产生了一定的耐受性；在不同组织中AChE活性受影响的程度不同，其中肝的变化明显大于鳃和肾；溶剂对照组在试验中与空白对照组相比仍有一定的差异，这个结果与前一试验一致。在溴氰菊酯对鲫遗传损伤试验中，溴氰菊酯处理的浓度低于6.117μg／L时在试验期间未见与对照组的显著差异，仅在6.117μg／L浓度组发现微核率和总核异常率的明显变化，并且变化规律相似，随着溴氰菊酯处理的浓度和时间的增加，微核率和总核异常率也呈正相关增加；溴氰菊酯具有一定的遗传毒性。水产品中的拟除虫菊酯经乙腈提取，正己烷脱脂，ENVI-18柱和氧化铝柱AL-N净化后进样分析。结果表明，该方法中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的质量浓度在1.0μg／L-500.0μg／L范围内线性关系良好。3种菊酯加标水平在1.0μg／Kg-10.0μg／Kg时，方法回收率为78.5％-100.8％之间，相对标准偏差为3.1％-9.4％，本方法氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的最低检出限均为0.2μg／Kg。该方法处理后杂质干扰少，灵敏度高，检出限量低，适用性较强，能够满足水产品中拟除虫菊酯素类杀虫剂残留的检测。

全文目录

摘要  6-8
Abstract  8-10
文献综述  10-26
  1 拟除虫菊酯杀虫剂的发展概况  10-12
  2 拟除虫菊酯的作用机理  12-13
  3 拟除虫菊酯杀虫剂在水产养殖中的应用现状  13-14
  4 拟除虫菊酯杀虫剂对水生态系统的毒理学效应  14-20
    4.1 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的急性毒性效应  14-15
    4.2 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的亚急性毒性效应  15-17
    4.3 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类胚胎孵化的影响及致畸效应  17-18
    4.4 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的致突变效应  18-19
    4.5 拟除虫菊酯杀虫剂对浮游生物的生态毒理学  19-20
    4.6 拟除虫菊酯杀虫剂对水生态系统的研究展望  20
  5 拟除虫菊酯在鱼体内的蓄积与释放  20-21
  6 拟除虫菊酯在水体和水产品中的残留分析方法  21-23
    6.1 色谱分析方法  21-22
    6.2 免疫分析方法  22-23
  7 溴氰菊酯菊酯简介  23-24
  8 本研究的立项依据和目的  24-26
材料和方法  26-35
  1 溴氰菊酯对鲫的急性毒性试验  26-27
    1.1 试验药品的来源及配制  26
    1.2 试剂  26
    1.3 试验条件  26
    1.4 试验方法  26-27
  2 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织解毒代谢酶的影响  27-28
    2.1 试验药品的来源及配制  27
    2.2 试验鱼来源及饲养  27
    2.3 试验条件  27
    2.4 试验设计  27-28
      2.4.1 溴氰菊酯浓度的确定  27
      2.4.2 染毒方式  27-28
      2.4.3 鱼体组织的前处理  28
    2.5 分析方法  28
  3 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织靶标酶的影响  28-30
    3.1 试验药品的来源及配制  28
    3.2 试验鱼来源及饲养  28-29
    3.3 试验条件  29
    3.4 试验设计  29
      3.4.1 溴氰菊酯浓度的确定  29
      3.4.2 染毒方式  29
      3.4.3 鱼体组织的前处理  29
    3.5 分析方法  29-30
  4 溴氰菊酯对鲫遗传损伤的研究  30-31
    4.1 试验药品的来源及配制  30
    4.2 试验鱼来源及饲养  30
    4.3 试验条件  30
    4.4 试验设计  30-31
      4.4.1 溴氰菊酯浓度的确定  30-31
      4.4.2 染毒方式  31
      4.4.3 血涂片的准备  31
      4.4.4 数据记录及结果分析  31
  5 水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯残留量的测定方法的建立气相色谱法  31-35
    5.1 主要仪器及试剂  31
    5.2 色谱条件  31-32
    5.3 分析步骤  32-35
      5.3.1 标准曲线的绘制  32
      5.3.2 样品及其制备  32
      5.3.3 提取  32-33
      5.3.4 净化  33
      5.3.5 样品测定  33
      5.3.6 结果计算  33-34
      5.3.7 加标回收率的测定  34
      5.3.8 精密度的测定  34
      5.3.9 方法最低检测限(MDL)的测定  34-35
试验结果及讨论  35-58
  1 溴氰菊酯对鲫的急性毒性试验  35-36
    1.1 急性毒性试验中鲫的反应症状  35
    1.2 急性毒性试验中鲫的死亡情况  35-36
  2 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织解毒代谢酶的影响  36-44
    2.1 鲫各组织中GSH的含量  36-38
    2.2 各组织中GSH-Px的活性  38-40
    2.3.各组织中GST的活性  40-42
    2.4 讨论  42-44
  3 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织中靶标酶影响的研究  44-48
    3.1 各组织中的AChE的活性  44-46
    3.2 讨论  46-48
  4 溴氰菊酯对鲫遗传损伤的研究  48-50
    4.1 微核细胞、核异常细胞镜检特征  48-49
    4.2 不同浓度的溴氰菊酯对鲫血红细胞微核率的影响  49
    4.3 不同浓度的溴氰菊酯对鲫血红细胞核异常率的影响  49-50
  5 水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯残留量的测定方法的建立气相色谱法  50-58
    5.1 程序升温的优化  51
    5.2 试验鱼肌肉的选择  51
    5.3 配制标准溶液溶剂的选择  51
    5.4 提取溶剂的选择  51-52
    5.5 甲醇水溶液体积分数的选择  52-53
    5.6 净化柱的选择  53
    5.7 洗脱液的选择  53
    5.8 色谱图及标准曲线  53-56
    5.9 加标回收率、精密度及最低检出限(MDL)  56-58
结论  58-60
缩略语表  60-61
参考文献  61-70
致谢  70-71
图版  71-72
攻读硕士期间发表文章情况  72

溴氰菊酯对鲫的毒性作用研究及残留检测

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