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甲胺磷降解细菌的分离、鉴定及降解特性的研究

作 者: 廖金英
导 师: 赵士熙
学 校: 福建农林大学
专 业: 农业昆虫与害虫防治
关键词: 甲胺磷 降解细菌 分离 鉴定 生长特性 紫外诱变
分类号: X172
类 型: 硕士论文
年 份: 2004年
下 载: 238次
引 用: 2次
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内容摘要


从土壤中分离筛选获得两株对甲胺磷农药有较强降解效能的甲胺磷降解细菌,经鉴定分别为头状葡萄球菌(Staphylococcus capitis)(称为D菌)和粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)(称为J菌)。 采用气相色谱法测定甲胺磷农药的残留,甲胺磷在水中的添加回收率在92.896至96.4%之间,变异系数在2.2%至3.9%之间,甲胺磷的标准曲线为Y=398421+2530507X,r=0.9917。甲胺磷降解细菌的活菌数和用分光光度计测定的其菌体悬浮液的浓度的OD650mm呈现显著直线关系,回归方程为y=0.1233x-2.3051,r=0.9171。 降解细菌D菌和J菌都能降解甲胺磷,D菌和J菌在甲胺磷浓度为500mg/L,30℃,180r/min摇床上用基础培养基培养72小时,对甲胺磷的降解率分别达到58.49%和65.80%。D菌和J菌具有联合作用,两菌混合培养可提高对甲胺磷的降解效能,72小时中对甲胺磷的降解率达到72.93%。甲胺磷降解细菌D菌和J菌在甲胺磷浓度不同的情况下的生长存在显著差异,30℃,180r/min摇床上用基础培养基培养72小时,D菌在1000mg/L的甲胺磷浓度下生长最好,J菌在2000 mg/L的甲胺磷浓度下生长最好。 甲胺磷降解细菌的生长曲线测定表明,30℃,180r/min摇床上用改造的基础培养基培养,D菌在培养6小时后进入对数生长期,18小时后进入稳定生长期,36小时后进入衰败期。J菌在培养18小时后才进入对数生长期,30小时后进入稳定生长期,39小时后开始衰败期。 甲胺磷降解细菌D菌和J菌在土壤中的施用,有利于提高整体土壤微生物的活性。培养基的pH值对甲胺磷农药的降解细菌的生长有较大的影响。不同pH值的缓冲液配制的培养基相对于直接用蒸馏水配制的更有利于降解菌的生长。D菌和J菌都在缓冲液pH值为6时生长最好,30℃,180r/min摇床上用基础培养基培养,培养72小时后的OD650mm值分别为1.093和1.586,而用蒸馏水配制的不同pH值的培养基,D菌和J菌的最适生长pH值都为7,培养72小时后的OD650mm值分别为0.756和0.858,并且培养后的培养基的DH也出现了较大的变化。 甲胺磷降解细菌D苗和J菌经紫外诱变后。筛选出D菌的突变株D1和J菌的突变株福建农林大学硕士学位论文甲胺磷降解细菌的分离、鉴定和降解特性研究J3,30℃培养3d后对甲胺磷的降解率达到52.85%和56.6既,分别比出发菌株提高了5.87%和5.70%。农药斜面连续传代10次,降解活力保持穆定。突变株和出发菌株在农药降解谱上没有明显差异。 添加一定的碳源有利于降解菌的生长。在培养基中加入1%的葡萄糖量对出发菌株D菌和J菌及突变菌株D1菌和J3菌的生长都达到最理想的促进作用。 分别用甲胺磷降解菌和培养液灌施,芥菜苗上的桃蚜死亡率没有显著差异。在灌施IO00mg/L甲胺磷溶液的同时也施入甲胺磷降解细菌,桃蚜的死亡率比只灌施甲胺磷的有极显著的降低,而在灌施甲胺磷之前24小时就加有甲胺磷降解细菌的,其上生长的桃蚜的死亡率比施药同时加菌的和只灌施甲胺磷的都有大幅度的降低。

全文目录


中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-16
1 材料与方法  16-23
  1.1 材料及仪器  16
    1.1.1 菌株来源  16
    1.1.2 化学试剂与药品  16
    1.1.3 主要农药  16
    1.1.4 主要仪器  16
  1.2 培养基  16-17
  1.3 菌株的分离鉴定  17
    1.3.1 菌株的分离筛选  17
    1.3.2 菌株鉴定  17
  1.4 降解效能研究  17-19
    1.4.1 色谱条件  17
    1.4.2 农药标准曲线的制作  17-18
    1.4.3 水中甲胺磷的添加回收实验  18
    1.4.4 农药降解菌的降解效能测定实验  18
    1.4.5 细菌的联合作用对降解效能的影响  18-19
  1.5 菌株生长特性的研究  19-20
    1.5.1 OD值与细菌活菌数关系标准曲线测定  19
    1.5.2 生长曲线制作  19
    1.5.3 不同农药浓度对菌株生长的影响  19
    1.5.4 不同pH对菌株生长的影响  19-20
  1.6 降解菌的紫外诱变  20-21
    1.6.1 杀菌曲线的测定  20
    1.6.2 紫外诱变处理及突变菌株的筛选  20
    1.6.3 突变菌株的稳定性测定  20-21
    1.6.4 突变菌株的降解谱测定  21
    1.6.5 不同含量的碳源对菌株生长的影响  21
  1.7 降解菌对土壤微生物活性的影响  21-22
  1.8 甲胺磷降解菌对甲胺磷杀虫效果的影响  22-23
    1.8.1 供试昆虫的饲养  22
    1.8.2 甲胺磷降解菌对甲胺磷杀虫效果的影响试验  22-23
2 结果与分析  23-42
  2.1 菌株的分离、鉴定结果  23-25
  2.2 降解效能研究  25-27
    2.2.1 甲胺磷浓度和峰面积关系的标准曲线制作  25
    2.2.2 水中甲胺磷的添加回收率测定  25-26
    2.2.3 D菌对甲胺磷的降解  26
    2.2.4 J菌对甲胺磷的降解  26
    2.2.5 D菌和J菌的联合作用对降解效能的影响  26-27
  2.3 D菌和J菌的生长特性的研究  27-33
    2.3.1 细菌活菌数与OD值关系的标准曲线  27-28
    2.3.2 D菌的生长曲线  28-29
    2.3.3 J菌的生长曲线  29-30
    2.3.4 不同甲胺磷浓度对D菌生长的影响  30
    2.3.5 不同甲胺磷浓度对J菌生长的影响  30-31
    2.3.6 不同pH值的缓冲液对菌株生长的影响  31-32
    2.3.7 不同pH值的培养基(非缓冲液配制)对菌株生长的影响  32-33
  2.4 甲胺磷降解细菌的紫外诱变  33-39
    2.4.1 紫外诱变杀菌曲线的测定  33-34
    2.4.2 甲胺磷降解细菌的紫外诱变及突变株的筛选  34-35
    2.4.3 突变菌株的稳定性测定  35-36
    2.4.4 突变菌株降解谱测定  36
    2.4.5 不同含量的碳源对菌株生长的影响  36-39
  2.5 甲胺磷降解菌对土壤微生物活性的影响  39
  2.6 甲胺磷降解菌对甲胺磷杀虫效果的影响  39-42
3 结论  42-44
4 讨论  44-47
参考文献  47-56
致谢  56

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境微生物学
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