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高强度Nd:YAG及其KTP倍频激光对单层成纤维细胞损伤作用和光生物调节作用的初步研究
作 者: 黄平
导 师: 刘承宜
学 校: 华南师范大学
专 业: 生理学
关键词: 高强度激光 损伤作用 光生物调节作用 光强分布 数值拟合
分类号: Q63
类 型: 硕士论文
年 份: 2004年
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内容摘要
随着激光研究理论和生产技术的不断发展,不但高强度激光手术在外科、眼科、牙科和皮肤科等领域获得了越来越为广泛的应用,而且低强度激光的光生物调节作用研究也已经获得相当的进展,但很少有人注意到两个领域的交叉。高强度激光在生物组织中迅速衰减,激光束边缘强度低到无法损伤细胞,这部分激光对已损伤组织边缘存活细胞的光生物调节作用(例如,对细胞增殖的促进或抑制效应,对免疫细胞功能的调节)是决定高强度激光手术后生物修复状况的主要因素之一。为了尽量减少激光束对存活细胞的热效应,本文用单层成纤维细胞作为模型,首先用高强度激光对单层成细胞造成局部破坏,然后研究高强度激光束边缘对周围细胞的光生物调节作用对单层细胞生物修复的影响。 在本文第一章中,首先讲述了机械创伤愈合以及高强度激光手术后创口愈合的生理过程。指出高强度激光在切割组织的同时,还对创口附近组织产生了两种一般外科手术所没有的效应:一是热损伤效应,二是光生物调节效应。这两种效应都会影响术后创口愈合过程;然后,介绍成纤维细胞体外培养在创伤愈合研究中的应用;最后,简述人皮肤成纤维细胞的培养方法。 在第二章中,本文提出建立细胞模型,用MTT比色法研究高强度Nd:YAG和KTP倍频激光照射对单层人成纤维细胞的损伤及其生物修复过程。同时通过多项式数学模型rd=A+B1×Epulse+B2×Epulse2【rd是损伤半径(mm),Epulse是脉冲能量(mJ)】,对实验结果进行数值拟合,探究激光照射造成的损伤和照射参数的关系。实验结果表明,无论是1064nm照射还是532nm照射,即时存活率都随着脉冲能量的增加或者脉冲频率的升高而降低;损伤半径随着脉冲能量的增加或者脉冲频率的升高而增大。而在相同参数的条件下,1064nm照射组的即时存活率比532nm照射组的小;前者的损伤半径比后者的较大。数值拟合结果表明,无论是红外光,还是绿光,脉冲频率越高,参数A越大,表示脉冲能量较低时,高频率的照射比低频且相同脉冲能量的照射所造成的细胞损伤范围更广;脉冲频率越高,参数B1越小,表示高频照射时,不同的脉冲能量引起损伤半径的差异比低频照射时较小。 在第三章中,首先综述了低强度激光对离体细胞的光生物调节作用,指出低高强度Nd涅人G及其KrP倍频激光对单层成纤维细胞损伤作用和光生物调节作用的初步研究强度激光对生物细胞的刺激作用的普遍性。在“可见光对细胞的光生物调节作用”这一节中,重点讲述了激光对淋巴细胞、巨噬细胞和成纤维细胞的刺激作用。旨在突出低强度激光对伤口愈合的影响。然后运用刘承宜等提出的低强度激光的信息生物模型(BIMP),从协同光信号转导的角度解释了低强度激光的信息功能。 本文的第四章探讨了高强度Nd:YAG和KTP倍频激光束边缘对单层人成纤维细胞的光生物调节作用。实验结果表明 1064刊m激光照射后24小时,1仪腼J/脉冲组和15OtnJ/脉冲组的细胞显著增殖印<0 .05);而532钊叮激光照射后24小时,1侃haJ/脉冲组的细胞显著抑制印<0.05)。其他各组和对照组相比有差异但不明显。光照48小时后,各组结果与24小时的结果相同,但1以讲刊m照射组与对照组的差异增大,而532钊m照射组与对照组的差异减少。激光束损伤半径以外强度分布的分析和BIMP的应用研究表明,在高强度激光束照射细胞单层时,激光束损伤半径以外的边缘部分对存活的细胞可能具有光生物调节作用。 本文的研究表明,在用高强度激光束照射细胞单层时,激光束除了对细胞单层有局部损伤作用外,不同参数的激光束对存活细胞具有不同的光生物调节作用。因此,在高强度激光的临床应用中,对于激光的种类和强度的选择应给与足够的重视和考虑。
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全文目录
中文摘要 7-8 Abstract 8-10 第一章 成纤维细胞培养与高强度激光手术后创口愈合 10-19 1.1 伤口愈合生理过程 10-13 1.1.1 机械创伤愈合 10-12 1.1.2 高强度激光手术后创口愈合 12-13 1.2 FBs体外培养在高强度激光手术后伤口愈合中的应用 13-15 1.3 单层成纤维细胞在研究强激光损伤效应中的应用 15-16 1.4 人皮肤成纤维细胞的培养 16-19 1.4.1 材料 16 1.4.2 方法 16-19 1.4.2.1 人皮肤成纤维细胞的传代准备 16-18 1.4.2.2 人皮肤成纤维细胞的培养、传代 18-19 1.4.3 细胞计数的方法 19 第二章 高强度Nd:YAG和KTP倍频激光照射对单层人成纤维细胞的损伤作用 19-26 2.1 导言 19-20 2.2 材料和方法 20-22 2.2.1 细胞培养 20 2.2.2 激光照射 20-21 2.2.3 激光照射后HSF细胞活性检测 21-22 2.2.4 计算方法和统计方法 22 2.2.4.1 存活率和损伤半径 22 2.2.4.2 数值拟合 22 2.3 结果 22-25 2.3.1 即时存活率和损伤半径 22-24 2.3.2 损伤半径和照射参数的关系 24-25 2.4 讨论 25-26 第三章 低强度激光对离体细胞光生物调节作用的研究进展 26-46 3.1 低强度可见光及红外光对离体细胞的光生物调节作用 27-30 3.1.1 淋巴细胞 27 3.1.2 巨噬细胞 27-29 3.1.3 成纤维细胞 29-30 3.2 低强度UVA照射对离体细胞的光生物调节作用 30-35 3.2.1 MAPKs对UVA的响应 30-31 3.2.2 活性氧自由基(ROS)和UVA 31-32 3.2.3 S6激酶的激活 32-34 3.2.4 UVA致细胞凋亡 34-35 3.2.5 小结 35 3.3 低强度激光的光生物调节现象机理和应用 35-46 3.3.1 生物调节作用只调节功能不正常的细胞或组织 36-38 3.3.2 倒易规则不成立 38 3.3.3 双向调节作用 38-39 3.3.4 信号转导作用 39 3.3.5 非共振作用 39-40 3.3.6 机理 40-43 3.3.7 安全性 43 3.3.8 应用 43-44 3.3.9 讨论 44-46 第四章 高强度Nd:YAG和KTP倍频激光束边缘对单层人成纤维细胞的光生物调节作用 46-55 4.1 导言 46-47 4.2 材料和方法 47-49 4.2.1 细胞培养 47-48 4.2.2 激光照射 48 4.2.3 激光照射后HSF细胞活性和增殖检测 48 4.2.4 计算方法和统计方法 48-49 4.2.4.1 存活率和损伤半径 48-49 4.2.4.2 高强度激光边缘的激光剂量计算 49 4.2.4.3 增殖率 49 4.3 结果 49-52 4.3.1 即时存活率和损伤半径 49-50 4.3.2 激光束光强分布 50-51 4.3.3 光照后24小时和48小时细胞增殖率 51-52 4.3.4 形态学 52 4.4 讨论 52-55 4.4.1 光调节作用 53-54 4.4.2 TMLR中可能存在光生物调节效应 54-55 第五章 总结 55-57 附1 高斯激光束光强分布计算方法 57-60 研究生期间(将要)发表论文与综述题录 60 参考文献 60-72 致谢 72-73
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中图分类: > 生物科学 > 生物物理学 > 生物光学
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