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抗内毒素IgY生物学效应的实验研究

作　者: 李强
导　师: 张雅萍
学　校: 第三军医大学
专　业: 外科学
关键词: 鸡卵黄抗体 内毒素 异硫氰酸荧光素-内毒素 乳酸脱氢酶 二胺氧化酶 肿瘤坏死因子 肠源性内毒素血症 烧伤
分类号: R644
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
下　载: 95次
引　用: 2次
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内容摘要


烧伤后，肠道三大屏障功能均有不同程度下降，包括肠粘膜机械屏障破坏，出现粘膜糜烂及溃疡；肠道内固有菌群失调；全身免疫系统功能降低，肠腔内sIgA水平下降。这些因素造成了肠腔内细菌和内毒素（LPS）进入血液循环，即细菌和LPS移位，形成菌血症或内毒素血症（intestinal endotoxemia，ITEM），这是导致全身性感染及多器官功能哀竭的重要原因之一，但目前尚无特别有效的拮抗LPS的药物应用于临床。近年来，发现在鸡蛋的蛋黄中富含来源于鸡血清的免疫球蛋白IgG，国际上命名为IgY，其含量远高于血清，且对相应的抗原有较强的拮抗作用。本研究希望能从中找到一种既能有效拮抗LPS，又有较大临床应用价值的新药。本研究用LPS免疫鸡，通过改良水溶法（WD法）从蛋黄中提取、纯化特异性抗内毒素IgY。通过急性毒性实验，测定了小鼠喂服IgY的LD50，对照国际通用的外来化合物毒性六级分类标准，证明了IgY的无毒性，口服安全可靠。对比小鼠烧伤前后喂服LPS的LD50，验证了肠粘膜屏障的保护作用，并为后面动物实验提供了用药量的依据。在体外，通过IgY与LPS的直接中和实验，获得了当二者浓度比为15︰1左右时有较好的量效匹配关系，为后续实验提供了用药量依据。IgY能明显抑制FITC-LPS与原代培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的结合，拮抗LPS对HUVEC的损伤作用，表现为IgY拮抗组细胞的荧光强度明显减弱，细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量明显降低，说明IgY在体外有良好的拮抗LPS的作用。将纯系昆明种小鼠制成30%TBSAⅢ°烧伤合并内毒素血症的动物模型，同时喂服IgY治疗后，能明显降低实验小鼠的死亡率；明显降低小鼠血浆中LPS、二胺氧化酶（DAO）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量；回肠病理切片显示，经IgY治疗后，回肠粘膜的损伤程度明显减轻。实验结果提示IgY除了拮抗LPS，减少其移位入血外，对回肠粘膜亦有一定的保护作用。从体外及动物实验可以看出，IgY有较好的拮抗LPS作用，对小鼠烧伤后肠源性内毒素血症有较好的治疗作用。

全文目录


英文缩写一览表  3-4
英文摘要  4-6
中文摘要  6-7
论文正文 抗内毒素IgY生物学效应的实验研  7-48
  前 言  7-9
  第一部分 毒性实验  9-14
    材料和方法  9-10
    结 果  10-12
    讨 论  12-14
  第二部分 IgY体外生物学效应  14-23
    材料和方法  14-17
    结 果  17-20
    讨 论  20-23
  第三部分 抗内毒素IgY防治烧伤小鼠肠源性内毒素血症的实验研究  23-33
    材料和方法  23-25
    结 果  25-30
    讨 论  30-33
  全文结论  33-34
  致 谢  34-35
  照 片  35-44
  参考文献  44-48
文献综述一 肠源性内毒素血症的研究进展  48-54
  参考文献  51-54
文献综述二 鸡卵黄免疫球蛋白IgY的研究进展  54-60
  参考文献  57-60
在读硕士期间论文发表情况  60

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 创伤外科学 > 烧伤及烫伤（灼伤）
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