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四倍体鲫鲤F_9-F_(12)的遗传特性和雌、雄核发育研究
作 者: 孙远东
导 师: 刘少军
学 校: 湖南师范大学
专 业: 动物学
关键词: 异源四倍体鲫鲤 染色体 性腺 自然产卵 种群 雌核发育 雄核发育 性别决定机制
分类号: Q953
类 型: 硕士论文
年 份: 2003年
下 载: 125次
引 用: 2次
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内容摘要
异源四倍体鲫鲤是世界上首例人工培育的两性可育的四倍体鱼,这为研究四倍体的生物学特性提供了良好的实验材料,本文对异源四倍体鲫鲤的遗传特性进行了研究,主要包括其遗传稳定性、雌核发育、雄核发育方面的研究。 1.异源四倍体鲫鲤F9-F12染色体和性腺观察 采用肾细胞染色体制片技术,检测了异源四倍体鲤鲫F9—F12代的染色体数目,证明F9—F12继续保持四倍体性,染色体数目为4n=200条;观察了F9—F12的成熟性腺。在这三代四倍体鱼中它们仍然保持有正常的卵巢和精巢,能够分别形成正常的二倍体卵子和二倍体精子。用超薄切片技术,观察了四倍体鱼成熟卵巢和精巢的结构,并对成熟的卵子和精子的结构进行了观察,成熟的精巢由许多小叶组成,小叶内可观察到精源细胞、精子细胞、和成熟的精子,二倍体精子由头部和尾部组成,头部充满致密染色质,尾部中央轴丝具有典型的“9+2”微管结构;成熟卵巢中的Ⅳ时相和Ⅴ时相卵母细胞的细胞质内伸出许多微绒毛进入透明带内,并穿过厚厚的卵黄膜一直深入到细胞质中,推断微绒毛具有物质和信息交流的功能,Ⅳ时相和Ⅴ时相卵母细内的卵黄具有两种形式,一种其外有囊泡包围,另一种没有。在自然环境下,观察了异源四倍体鲫鲤自行产卵受精并形成存活后代的过程,证明在自然环境下,该四倍体群体群体能够自行繁殖传代。F9—F12染色体数目的稳定性和正常的性腺结构以及自然条件下的生殖传代行为,说明该异源四倍体鲫鲤已成为一个染色体数目为4n=200、遗传性状稳定的新型四倍体鱼群体,具备形成一个新的种群所需的关键因素。 2.人工诱导异源四倍体鲫鲤的雌核发育 异源四倍体鲫鲤能产生二倍体卵子,用UV处理镜鲤的精子,不进行染色体的加倍处理,能获得二倍体雌核发育鱼,通过冷休克对“受精卵”进行处理,仍然获得了二倍体雌核发育鱼。没有检测到雌核发育四倍体。这表明通过冷休克让二倍体卵子加倍成四倍体比较困难,但是经冷休克处理获得的雌核发育鱼的孵化率高于没有进行冷休克处理的。冷休克处理和未冷休克处理的雌核发育鱼均是二倍体(2n=100)的雌鱼,这证明了异源四倍体螂鲤是雌性的性别决定类型属于XXXX类型。二倍体雌核发育鱼的性成熟比普通的二倍体鲤、鱼即鱼的性成熟得晚,在一龄的雌核发育鱼没有发现达到性成熟的个体,只有到二龄时,才发行性成熟鱼。在第二年检测发现3070的雌核发育鱼是可育的,具有正常的卵巢,能产生成熟的卵子。在第三年可育的雌核发育鱼的比例有所增加。在外形上与湘螂FZ相似,在繁殖特性上,二倍体雌核发育鱼也与湘螂FZ相似,能产生二倍体卵子,其与红螂后代的染色体数为3n=150。3.人工诱导异源四倍体卿鲤的雄核发育 在2002年,将金鱼的在卵巢液保存下,用UV失活卵子的遗传物质。经UV处理的卵子与异源四倍体螂鲤的二倍体精子“受精”,诱导产生雄核发育鱼。观察发育过程发现,经照射过的卵子损伤比较大,到神经胚期,就大部分死亡,雄核发育鱼的孵化率极低,不到1%0,共得到8尾雄核发育仔鱼,鱼苗的死亡率很高,目前仅剩下两尾存活的雄核发育后代。目前还没有做进一步的染色体鉴定。2003年用失活的墨龙的卵子与四被体鱼的二倍体精子“受精”,获得了82尾雄核发育实验鱼。雄核发育的研究尚属起步阶段,有待进一步探索更好的诱导条件和改进诱导方法。
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全文目录
中文摘要 3-5 英文摘要 5-9 前言 9-16 1 异源四倍体鲫鲤F_9-F_(12)的遗传稳定性 9-11 2 人工诱导异源四倍体鲫鲤雌核发育与雄核发育 11-16 实验部分 16-39 1 异源四倍体鲫鲤F_9-F_(12)染色体和性腺观察 16-25 1.1 材料与方法 16-17 1.2 结果 17-23 1.3 分析 23-25 2 人工诱导异源四倍体鲫鲤雌核发育 25-35 2.1 材料与方法 25-26 2.2 结果 26-29 2.3 分析 29-35 3 人工诱导异源四倍体鲫鲤雄核发育 35-39 3.1 材料与方法 35 3.2 结果 35 3.3 分析 35-39 参考文献 39-45 附录一 45-46 附录二 46-47 致谢 47
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中图分类: > 生物科学 > 动物学 > 动物遗传学
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