学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

核心蛋白聚糖在肝细胞肝癌中的表达及作用机制研究

作　者: 上官建营
导　师: 窦科峰；遆振宇；李霄
学　校: 第四军医大学
专　业: 外科学
关键词: 核心蛋白聚糖肝细胞肝癌免疫组织化学细胞周期凋亡细胞生长曲线流式细胞术
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,预后差,通常患者在6-20个月内死亡。目前治疗原则是以外科手术治疗为主的综合治疗,非手术治疗包括局部肿瘤治疗、放射治疗、化学治疗和生物治疗,肝移植技术逐渐走向成熟,但也主要适用于早期肝癌患者,晚期患者预后不佳,加之费用昂贵、供体紧缺,不能广泛造福于患者。人们一直在探寻更为有效的治疗肝癌的药物和方法。核心蛋白聚糖(Decorin,DCN)是机体重要的细胞外基质成分之一,属于富含小型亮氨酸蛋白聚糖基因家族(SLRP)的成员。有大量体外研究证实DCN能够抑制多种肿瘤细胞的增殖。其抑制肿瘤细胞的机制主要有:(1)结合并抑制TGF–β生物活性,减少肿瘤发生和转移。(2)DCN可以调整细胞周期,使G1期细胞数增加,S期细胞数显著降低,抑制肿瘤细胞增殖。(3)DCN可诱导肿瘤细胞凋亡。因此,DCN可能作为肝细胞肝癌一种新的治疗靶点。深入的了解DCN,对于肝癌预防和治疗都具有重要的意义。目的研究核心蛋白聚糖在肝细胞肝癌组织中的表达情况及其对HuH7细胞系体外增殖的影响。探讨揭示DCN与原发性肝癌发生、发展的关系,为肝癌新基因治疗靶点选择提供理论依据。方法1.以免疫组织化学(SP法)分别检测16例正常肝组织、20例肝硬化组织、30例肝癌及癌旁组织中DCN的表达,采用阳性表达率及光密度值,进行半定量及定量分析。2.加入含不同浓度(0、25、50、75、100、125、150、200ng/ml)DCN的培养液培养HuH7细胞系不同时间(12、24、48、72、96h、2W),用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法及克隆实验测定细胞增殖速度和活力,流式细胞技术测定细胞周期和凋亡情况。结果1. DCN在肝硬化及癌旁组织中呈强阳性表达,阳性表达率(55%、73.3%)、平均光密度值(OD)(0.2357±0.0396、0.2983±0.1990)与正常肝组织及肝癌组织阳性表达率(0、10%)、平均OD(0.1394±0.0072、0.1589±0.0115)比较,表达有显著性差异。结果提示DCN在癌旁及肝硬化组织中呈阳性表达,在肝癌及正常肝组织中为弱阳性表达。2. DCN对HuH7细胞增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性。DCN可以调整细胞周期,使G1期细胞数增多,S期减少,G2期无变化,提示DCN可抑制肿瘤细胞由G1/S转化。DCN作用HuH7细胞后,HuH7凋亡率升高。结论DCN可能作为一种负性调控蛋白参与肝癌的发生发展。体外培养HuH7细胞随DCN浓度增加及作用时间延长,细胞增殖速度减慢、活力减低,G1期细胞增多,凋亡增加。通过调节细胞周期,促进细胞凋亡,抑制肝癌细胞的增殖。DCN将可能成为一种理想的肝癌基因靶向治疗药物。

全文目录

缩略语表  4-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
前言  11-13
文献回顾  13-24
正文  24-41
  实验一 DCN 在肝癌组织中的表达及其意义  24-32
    1. 实验材料  24-26
    2 方法  26-28
    3.实验结果  28-30
    4.讨论  30-32
  实验二 DCN 对 HUH7 细胞增殖影响及机制  32-41
    1.实验材料和方法  32-33
    2.方法  33-35
    3.实验结果  35-39
    4.讨论  39-41
小结  41-42
参考文献  42-53
附图  53-54
个人简历和研究成果  54-55
致谢  55

核心蛋白聚糖在肝细胞肝癌中的表达及作用机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文