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喉癌LCRG1基因启动子克隆、突变和甲基化的研究

作 者: 唐世佳
导 师: 谢海龙
学 校: 南华大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 转录调控 最小启动子 瞬时转染 顺式作用元件 转录因子
分类号: R739.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 20次
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内容摘要


Laryngeal Carcinoma Related Gene 1(LCRG1)是一个喉癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不清。我们从如下几方面分析了LCRG1基因启动子的功能:1.通过5’-缺失突变方法,通过瞬时转染与荧光素酶报告基因检测,进一步分析了与该基因表达调控有关的启动子; 2.采用PCR-SSCP (single strand conformation polymorphism, SSCP)检测40例喉癌组织标本LCRG1基因启动子突变情况;3.应用甲基化特异性PCR(Methylation Specific PCR,MSP)检测40例喉癌组织标本LCRG1基因启动子甲基化状态;4.应用半定量RT-PCR检测该基因在40例喉癌组织标本的表达水平。在对LCRG1基因的转录调控机制的研究过程中,我们发现:1. LCRG1基因最小启动子是LCRG1基因转录起始位点上游-169位到-57位的DNA片段。2. LCRG1基因启动子在喉癌组织中无突变。3. LCRG1基因启动子在喉癌组织存在5.00%甲基化改变而正常喉黏膜无甲基化改变。4.RT-PCR显示有40%(16/40)的喉癌组织LCRG1基因存在表达下调。结论:1.LCRG1基因最小启动子是LCRG1基因转录起始位点上游-169位到-57位的DNA片段。2. LCRG1基因启动子在喉癌中无突变,提示它不是该基因在喉癌中表达下调的原因。3. LCRG1基因启动子在喉癌存在5.00%甲基化改变而正常喉黏膜无甲基化改变,启动子甲基化部分改变可能参与LCRG1基因的表达调控。

全文目录


一、中文摘要  5-6
二、英文摘要  6-8
三、前言  8-11
四、正文  11-33
  1、材料与方法  11-24
  2、结果  24-29
  3、讨论  29-33
五、结论  33-34
六、参考文献  34-37
七、综述  37-54
八、附录(主要英文缩略语索引)  54-55
九、硕士期间发表的论文  55-56
十、致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 耳鼻咽喉肿瘤 > 喉肿瘤
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