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C57BL/6J小鼠耳蜗KCNQ1和NKCC1通道蛋白的年龄相关性表达及其与听力的关系

作　者: 李建玲
导　师: 褚汉启
学　校: 华中科技大学
专　业: 耳鼻咽喉—头颈外科
关键词: C57BL/6J小鼠老年性聋 KCNQ1 NKCC1 ABR RT-PCR
分类号: R764
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的研究KCNQ1和NKCC1这两种通道蛋白在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关性表达,并分析这两种通道蛋白与年龄相关性听力下降(Age-related Hearing Loss, AHL)的关系及其在听力中的作用。方法通过听性脑干反应(Auditory Brainstem Response, ABR)检测C57BL/6J小鼠各年龄段(4、8、14、24、40周龄)的听力变化。应用免疫组织化学检测方法确定KCNQ1和NKCC1蛋白在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁中的表达定位,并研究各年龄段C57BL/6J小鼠耳蜗外侧壁中两种通道蛋白含量随着鼠龄增加的表达变化。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测KCNQ1和NKCC1 mRNA在不同鼠龄小鼠耳蜗中的表达水平。结果随着C57BL/6J小鼠年龄的增加,其ABR反应阈值逐渐升高,4周龄和8周龄C57BL/6J小鼠对Click和4kHz、8kHz刺激声的ABR反应阈值均无显著性差异(P>0.05),从14周龄后,C57BL/6J小鼠对三种刺激声的ABR反应阈逐渐增加,其数值与低龄组小鼠相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。KCNQ1蛋白主要表达于耳蜗血管纹的边缘细胞顶膜,而NKCC1蛋白主要表达于血管纹边缘细胞、螺旋韧带及螺旋缘处的纤维细胞。随着C57BL/6J小鼠鼠龄的增加,血管纹上KCNQ1和NKCC1蛋白的表达逐渐减少。KCNQ1和NKCC1 mRNA的表达量也随着鼠龄的增加呈现减少的趋势,其中40周龄C57BL/6J小鼠KCNQ1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异具有统计学意义(P<0.05),40周龄以及24周龄的NKCC1 mRNA表达水平同4周龄相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论C57BL/6J小鼠耳蜗血管纹的KCNQ1和NKCC1蛋白表达随着鼠龄的逐渐增大而逐渐地减少。KCNQ1和NKCC1 mRNA水平在C57BL/6J小鼠耳蜗的年龄相关性改变呈现下降趋势,其中40周龄的C57BL/6J小鼠KCNQ1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异有统计学意义(P<0.05),40周龄以及24周龄的NKCC1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。KCNQ1和NKCC1两种通道蛋白在维持正常的听力中起着重要的作用。

全文目录

主要缩略词及中英文对照  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
主要试剂和仪器  10-12
前言  12-13
研究内容和方法  13-20
结果  20-24
讨论  24-28
结论  28-29
参考文献  29-32
综述  32-43
  参考文献  40-43
致谢  43

C57BL/6J小鼠耳蜗KCNQ1和NKCC1通道蛋白的年龄相关性表达及其与听力的关系

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