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枸杞花药培养体系优化

作　者: 钱春艳
导　师: 段安安；曹有龙
学　校: 西南林业大学
专　业: 林木遗传育种
关键词: 构祀花药培养再生植株技术体系
分类号: S567.19
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

枸杞(Lycium Barbarum. L)为茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium)植物,为宁夏“五宝”之首,具有滋肝、补肾、明目、壮阳作用,是著名中药材、高级滋补品和保健品。枸杞是多年生落叶灌木,也是宁夏地区主要经济树种之一。近年来随着枸杞药用保健价值的进一步开发,栽培面积不断扩大,常规育种方法已不能满足现代农业对枸杞品种改良的需求,而培育枸杞新品种的新方法很少。目前,通过单倍体育种方法中的花药培养技术得到的单倍体植株,经加倍后产生的纯合二倍体,在育种上能极早稳定分离后代,缩短育种年限、简化选育程序。在枸杞花药培养上,前人虽有研究,但仅停留在理论探讨上,没有把枸杞花药培养技术真正用于生产实践中。本研究对影响枸杞花药培养的几个因素(基本培养基、激素、活性碳、温度、甘露醇预处理)进行了系统的研究,旨在得到再生植株并移栽,优化枸杞花药培养的条件,建立一套适合枸杞花药培养的技术体系,从而提高枸杞育种效率,加快枸杞育种的选育进程,为枸杞遗传改良和遗传机理研究提供理论依据,从而推动我国枸杞产业的快速发展。试验以宁杞1号、大麻叶、0207、蒙杞1号为材料,采用L32(2×45)正交设计,对影响枸杞花药褐化、愈伤组织诱导率和胚状体发生率的因素进行了研究。试验结果如下:1、不同基因型材料花药培养有显著的差异,在所接种的4个基因型中,褐化程度、愈伤诱导率和胚状体诱导率相差较大,宁杞1号是较易诱导的基因型。2、两种基本培养基的研究中发现:MS比B5更适合宁杞1号和大麻叶花药培养;0207和蒙杞1号在B5上的诱导率更高。3、植物生长调节剂在枸杞花药培养中起着重要的作用,采用不同浓度的2,4-D,KT配比,结果表明,1.0mg/L2,4-D和1.0mg/LKT的配比适合愈伤组织的形成。4、三种温度处理方式中,4℃花蕾低温预处理后经32℃高温培养1天然后转入25℃暗培养最适合宁杞1号的花药培养。5、培养基中加入0.8g/L的活性炭能有效地减轻花药的褐化程度,并能提高胚状体的发生率;但活性炭的加入却降低了愈伤组织的诱导率,而且活性炭浓度越高诱导率越低。6、接种前对花药进行甘露醇预处理能提高愈伤组织的诱导率,甘露醇浓度以0.3mol/L为最佳。7、正交试验结果表明:枸杞花药培养对基因型和植物生长调节剂有很大的依赖性;活性炭对花药褐化率有显著影响,其中影响主次顺序为:活性炭>甘露醇>基本培养基>热激处理>植物生长调节剂;基本培养基和甘露醇对愈伤诱导率的影响都达到了显著水平,主次顺序为:植物生长调节剂>基本培养基>甘露醇>活性炭>热激处理;活性炭对胚状体发生率差异极显著,基本培养基、热激处理,对胚状体发生率的影响都达到了显著水平,影响大小依次为:植物生长调节剂>活性炭>基本培养基>热激处理>甘露醇。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
1 文献综述  10-24
  1.1 枸杞研究现状  10-13
    1.1.1 枸杞的分布  10
    1.1.2 枸杞的生物学特性  10-11
    1.1.3 枸杞的药用价值  11
    1.1.4 枸杞的分子生物学研究  11-13
  1.2 花药培养研究进展  13-22
    1.2.1 国内外研究现状  13-15
    1.2.2 影响花药培养的因素  15-20
    1.2.3 花药培养再生植株的移栽  20-21
    1.2.4 花药培养的意义  21-22
  1.3 课题来源  22
  1.4 本研究的目的、意义  22-24
2 材料与方法  24-28
  2.1 材料  24
  2.2 试验方法  24-25
    2.2.1 取材  24
    2.2.2 花蕾消毒  24
    2.2.3 花药培养  24-25
    2.2.4 愈伤组织的继代、分化  25
    2.2.5 再生植株的生根与移栽  25
  2.3 试验设计  25-28
    2.3.1 单因子试验  25-27
    2.3.2 多因子试验  27-28
3 结果与分析  28-48
  3.1 枸杞花药培养  28
  3.2 花药愈伤组织的继代、分化  28
  3.3 再生植株的生根与移栽  28-30
  3.4 单因子试验  30-39
    3.4.1 两种基本培养基对四种枸杞材料花药培养诱导率的影响  30-32
    3.4.2 植物生长调节剂对枸杞花药培养诱导率的影响  32-33
    3.4.3 温度对枸杞花药培养诱导率的影响  33-36
    3.4.4 活性炭对枸杞花药培养诱导率的影响  36-38
    3.4.5 甘露醇预处理对枸杞花药培养诱导率的影响  38-39
  3.5 多因子试验  39-48
    3.5.1 多因素变化对枸杞花药培养的正交试验结果  39-41
    3.5.2 多因素变化对不同基因型枸杞花药培养褐化率的影响  41-42
    3.5.3 多因素变化对枸杞花药培养愈伤组织的影响  42-44
    3.5.4 多因素变化对枸杞花药培养胚状体发生率的影响  44-46
    3.5.5 枸杞花药培养培养基和培养条件的优化  46-48
4 结论与讨论  48-54
  4.1 影响枸杞花药培养的因素  48-52
    4.1.1 基因型对枸杞花药培养的影响  48-49
    4.1.2 基本培养基对枸杞花药培养的影响  49
    4.1.3 植物生长调节物质对枸杞花药培养的影响  49-50
    4.1.4 温度对枸杞花药培养的影响  50-51
    4.1.5 活性炭对枸杞花药培养的影响  51
    4.1.6 甘露醇预处理对枸杞花药培养的影响  51-52
  4.2 枸杞花药培养  52-54
5 存在问题与展望  54-56
参考文献  56-64
已发表论文  64-66
致谢  66-68
图版  68-72
附录  72-73

枸杞花药培养体系优化

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