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李、杏、杏李S基因型确定及其在种间杂交亲本选择中的应用
作 者: 李洪果
导 师: 乌云塔娜
学 校: 中南林业科技大学
专 业: 森林培育
关键词: 李亚科 自交不亲和 S-基因型 种间杂交 杂交亲本
分类号: S662
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
我国是李、杏种质遗传多样性中心,拥有最丰富的李、杏种质资源。国外通过李、杏种间杂交已培育出一系列优良的品种(杏李),这些品种的品质均超过了国内外所有李、杏品种,但由于国际知识产权保护,杏李品种在我国大量商业化栽培受到了限制,因此掀起了利用国内杏、李品种与杏李进行杂交以及杏、李种间杂交新品种创制的研究热潮。但李、杏种间普遍存在杂交不亲和现象,其中品种的自交不亲和性是导致杂交不亲和的原因之一。另外,李、杏生产中由于自交不亲和性的存在,必须通过人工授粉或配置授粉品种才能保证稳产、高产,也需要确定自交不亲和基因型。故本文以38个李、18杏地方品种和7个杏李品种为实验材料,确定了63个李亚科果树的自交不亲和基因型,分离鉴定了15个新的雌蕊自交不亲和基因和3个新的花粉自交不亲和基因,在此基础上根据李、杏、杏李品种的S基因型、花期、果品、果实大小筛选出了15个种间杂交优良亲本和66个可行的杂交组合,为李和杏种间杂交新品种创制提供了重要理论依据。(1)确定了63个李、杏、杏李品种S基因型。‘味王’Sh/Se、‘味厚’Sh/Se、‘风味玫瑰’的S基因型均为Sh/Se;‘恐龙蛋’、‘味帝’、‘风味皇后’的S基因型均为’S1/Sb;‘蜜李’、‘水晶李’、‘不祥李’的S基因型均为Sc/Se;‘空心李’、巴塘李’的S基因型均为S10/S11;‘绥棱红李’、‘早黄李’的S基因型均为S10/Sg;‘李子梅’、‘麦黄2号’的S基因型均为S10/S22;‘离核1号’、‘离核4号’的S基因型均为S11/Se。其他品种的S基因型如下:‘新疆1号’S17/S8、‘朱砂李’S11/S8、‘、‘平顶香’Sk/Se、‘大青稞’S10/S8、‘青州李’S41/Sc、‘连平三花李’S10/S6、‘早李’S10/S15、‘横道河子大红李’S17/S10、‘苹果李’S15/S16、‘紫云鸡血李’S17/S11、‘芙蓉李’Si/Se、‘早熟李’S9/S18、‘金沙李’S18/S10、‘大黄李’S10/Sg、‘秋红李’Sb/Sg、‘康什李’S10/Se、‘奉化李’S7/Sb、‘瓜李’S32/S11、‘灰子李’S17/S32、‘早熟红李砧’S18/S9、‘孔雀蛋实生’S10/S8、、‘无名李’S17/S8、‘广东红心李’S10/S14、‘五香李’Sk/Se、‘叶里藏’S3/S35、‘奈曼晚熟’S22/S11、‘巴斗杏’S11/S26、‘友谊银白’S12a/S26、‘克孜克西米西’S14a/S9、‘土香白’S22/S4a、‘浙江杏’S17/S37、‘黑叶杏’S8/S27、‘锦西大红杏’S16/S22、‘9803’S12/S3、‘金奎’S22/S17、‘银香白’S23/S36、‘龙垦5号’S39/S8、‘关爷脸4号’S24/S38、‘兰州大接杏’S11/S22a、‘沙金红’S16/S22b、‘味馨’S2/Se、‘早白花李’S10/Sx、‘晚熟黄李砧’S8/Sx、‘五月李’S10/Sx‘广东红李’S23/Sx、‘县荷包杏’S40/Sx。(2)鉴定了15个新S-RNase基因和3个新SFB基因。分别从‘青州李’,‘广东红李’、‘友谊银白’、‘银香白’、‘沙金红’、‘兰州大接杏’、‘龙垦5号’、‘关爷脸4号’‘叶里藏’、‘县荷包’、‘克孜克西米西’、‘瓜李’、‘浙江杏’、‘土香白’等15个品种中分离出S41、S23、S12a、S36、S22b、S22a、S39、S38、S35、S40、S14a、S32、S37、S4a、S23-RNase等15个新S-RNase基因:从‘瓜李’、‘浙江杏’、‘土香白’等3个品种中分别分离鉴定了新花粉SFB基因:SFB32、SFB37、SFB22。(3)筛选出了15个优良杂交亲本和66对可行的杂交组合。根据果实品质、果实大小筛选出了‘沙金红杏’、‘味馨’、‘蜜李’、‘风味玫瑰’、‘恐龙蛋’、‘味厚’、‘味王’、‘奉化李’、‘康什’、‘巴塘李’、‘风味皇后’、‘味帝’、‘克孜克西米西’、‘兰州大接杏’、‘平顶香’等15个优良品种,并结合品种S基因型和花期,最终筛选出了66对可行的种间杂交组合,为李亚科种间杂交新品种创制提供理论指导。
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全文目录
摘要 4-6 ABSTRACT 6-11 1 文献综述 11-23 1.1 自交不亲和性的定义 11 1.2 自交不亲和性的分类及表现特征 11-12 1.2.1 自交不亲和性的分类 11-12 1.2.2 不同类型自交不亲和性的表现特征 12 1.3 自交不亲和性细胞生物学基础 12-13 1.4 自交不亲和性的分子生物学研究 13-17 1.4.1 自交不亲和性的遗传控制 13 1.4.2 S基因产物作用机理及模式 13-15 1.4.3 S基因的作用 15-17 1.5 自交不亲和性对植物的影响 17-18 1.5.1 S基因在自交不亲和中的作用 17 1.5.2 S基因在种间杂交不亲和中的作用 17-18 1.6 李、杏自交不亲和基因的研究进展 18-20 1.7 李、杏杂交育种的可行性和果树远缘杂交育种的成就 20-21 1.8 本研究的目的意义及技术路线 21-23 1.8.1 目的意义 21-22 1.8.2 技术路线 22-23 2 李、杏、杏李品种S基因型的确定 23-42 2.1 材料与试剂 23-25 2.1.1 植物材料 23-25 2.1.2 实验仪器及试剂设备 25 2.2 方法 25-30 2.2.1 基因组DNA提取 25 2.2.2 S-RNase引物设计 25-27 2.2.3 S-RNase基因组PCR扩增 27 2.2.4 PCR产物回收 27-28 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 28-29 2.2.6 载体连接 29 2.2.7 大肠杆菌的转化 29-30 2.2.8 测序及序列分析 30 2.3 结果与分析 30-39 2.3.1 李品种S基因型的确定 30-35 2.3.2 杏品种S基因型的确定 35-38 2.3.3 杏李品种S基因型的确定 38-39 2.4 小结与讨论 39-42 3 李、杏新S基因的鉴定 42-57 3.1 李品种新S基因的鉴定 42-45 3.1.1 李品种S-RNase基因的鉴定 42-44 3.1.2 李品种SFB基因的鉴定 44-45 3.2 杏品种S基因的鉴定 45-53 3.2.1 杏品种S-RNase基因的鉴定 45-52 3.2.2 杏品种SFB基因的鉴定 52-53 3.4 小结与讨论 53-57 3.4.1 从李、杏品种中鉴定了18个新的自交不亲和基因 53 3.4.2 蔷薇科S-RNase基因多态性及分子进化分析 53-57 4 自交不亲和基因型的应用 57-68 4.1 实验材料 57 4.2 实验方法 57-58 4.2.1 取样 57-58 4.2.2 可溶性固形物含量测定 58 4.2.3 可溶性糖测定 58 4.2.4 可滴定酸测定 58 4.2.5 维生素C(Vc)测定 58 4.3 结果与分析 58-64 4.3.1 李、杏、杏李果实平均单果重差异 58-59 4.3.2 李、杏、杏李果实品质差异 59-62 4.3.3 花期和成熟期 62-64 4.4 S基因型的应用 64-66 4.5 小结与讨论 66-68 4.5.1 小结 66 4.5.2 讨论 66-68 5 结论与创新点 68-70 5.1 结论 68-69 5.2 创新点 69-70 参考文献 70-77 攻读学位期间的主要学术成果 77-78 致谢 78
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 核果类
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