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油茶炭疽病生防菌剂Y13的研制及应用
作 者: 游嘉
导 师: 周国英
学 校: 中南林业科技大学
专 业: 微生物学
关键词: 油茶 内生拮抗细菌 可湿性粉剂 定殖 生防菌剂
分类号: S763.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
油茶内生拮抗菌Y13是一株对油茶炭疽病原菌具有较强的抑制效果的细菌,该菌经鉴定为枯草芽孢杆菌。为开发该菌株作为生防菌剂,本文主要开展Y13菌株发酵条件、菌剂可湿性粉剂加工工艺,定殖能力及林间应用研究。主要研究结果如下:(1)生防细菌Y13菌株发酵条件的优化采用单因素实验和正交优化实验,确定了Y13发酵培养的最佳培养基配方为:葡萄糖2.0%,酵母膏1.0%,牛肉膏0.3%,NaCl浓度为1.5%;最佳发酵条件为:温度30℃,初始pH 6~7,摇瓶装液量为50 mL/250mL,接种量5%,摇床转速160 r/min,发酵周期36 h。(2)生防细菌Y13菌株可湿性粉剂的研制通过测定润湿时间、悬浮率及热稳定性得到了Y13可湿性粉剂的较佳组合为硅藻土、STPP、SDBS。采用L9(34)正交表安排实验,结果表明,Y13菌株可湿性粉剂的最佳配方为:硅藻土37.17%,STPP 4.13%,SDBS8.26%,腐植酸0.41%,Y13原粉50%。对Y13菌株可湿性粉剂的质量指标进行了测定,其含水量、润湿时间、pH值、细度悬浮率等指标达到了有关国家标准。菌株Y13经急性经口毒性实验和急性经皮毒性试验,小白鼠均无明显中毒表现。连续观察14d,小白鼠无死亡发生,说明生防细菌菌株Y13为微毒性。(3)生防菌剂Y13定殖及林间应用研究通过耐利福平标记菌株回收,研究其在油茶叶片和果实上的定殖能力及其影响因素。研究表明,该拮抗菌能在油茶叶部和果部良好定殖。较高的菌悬液浓度(>108cfu/mL),无炭疽病原菌干扰,温度较高(25℃~35℃)、湿度较大(RH95%-100%)对该拮抗菌的定殖有利。对油茶炭疽病进行了林间防治试验,结果表明:生防菌剂对油茶炭疽病有较好的防治效果(70%左右),与对照药剂百菌清的防治效果相当。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-9 1 绪论 9-26 1.1 植物病害生防细菌的研究进展 9-14 1.1.1 植物病害生防细菌概况 9-12 1.1.2 植物病害生防细菌剂型的研究与应用现状 12-14 1.2 枯草芽孢杆菌生物防治的研究进展 14-19 1.2.1 枯草芽孢杆菌概述 14-15 1.2.2 枯草芽孢杆菌菌剂国内外应用现状 15-19 1.3 油茶炭疽病防治研究进展 19-22 1.3.1 油茶炭疽病概况 19-20 1.3.2 油茶炭疽病的综合防治 20-21 1.3.3 油茶炭疽病的生物防治 21-22 1.4 枯草芽孢杆菌生防菌剂存在的问题及展望 22-25 1.4.1 在基础研究方面 22-23 1.4.2 在实践应用方面 23-25 1.5 本课题的来源、目的意义与研究内容 25-26 1.5.1 本课题的来源 25 1.5.2 目的意义 25 1.5.3 研究内容 25-26 2 生防细菌Y13菌株发酵条件的优化 26-35 2.1 材料与方法 26-28 2.1.1 材料 26 2.1.2 方法 26-28 2.2 结果与分析 28-33 2.2.1 发酵培养基的筛选 28-31 2.2.2 发酵条件的优化 31-33 2.3 小结与讨论 33-35 3 生防细菌Y13菌株可湿性粉剂的研制 35-46 3.1 材料与方法 35-38 3.1.1 材料 35-36 3.1.2 方法 36-38 3.2 结果与分析 38-44 3.2.1 可湿性粉剂助剂单因子初筛 38-40 3.2.2 可湿性粉剂配方的筛选与配比 40-43 2.2.3 可湿性粉剂加工及产品质量检测 43-44 3.2.4 可湿性粉剂急性毒性实验 44 3.3 小结与讨论 44-46 4 生防菌剂Y13定殖及林间应用研究 46-55 4.1 试验地概况 46 4.2 材料与方法 46-50 4.2.1 材料 46-47 4.2.2 方法 47-50 4.3 结果与分析 50-54 4.3.1 Y13菌株在油茶体内的定殖 50-53 4.3.2 Y13菌剂对油茶炭疽病的林间防治效果 53-54 4.3 小结与讨论 54-55 5 结论 55-57 6 本文创新点 57-58 参考文献 58-66 附录 攻读学位期间的主要学术成果 66-67 致谢 67
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