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纺织用化学品对体外细胞增殖抑制影响的研究

作 者: 陈晓伟
导 师: 廖青
学 校: 北京服装学院
专 业: 纺织化学与染整工程
关键词: 脂肪醇聚氧乙烯醚 N,N-二烷基脲 CHO细胞 HeLa细胞 MTT 增殖抑制
分类号: TS195.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 21次
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内容摘要


本文采用噻唑蓝(MTT)比色法研究了纺织行业中常用助剂脂肪醇聚氧乙烯醚系列表面活性剂(AEO5、AEO9、AEO15)及N,N-二烷基脲系列化合物(N,N-二乙基脲、N,N-二丙基脲)对中华仓鼠卵巢CHO细胞及人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制情况,结果表明:脂肪醇聚氧乙烯醚系列表面活性剂中,AEO5、AEO9、对CHO细胞及HeLa细胞增殖抑制作用随着其浓度增大而增强。AEO5、AEO9、AEO15对两种细胞增殖抑制产生显著变化的浓度范围分别为0.005~0.025mg/mL、0.005~0.05mg/mL和0.01~0.075mg/mL。AEO5、AEO9、AEO15对CHO细胞及HeLa细胞增殖影响存在一定的差异,随着环氧乙烷(EO)数量增大对CHO细胞及HeLa细胞增殖抑制率逐渐减小。N,N-二烷基脲系列化合物中,N,N-二烷基脲对CHO细胞及HeLa细胞增殖抑制率随着其浓度增大而增大,但当浓度大于10mg/mL时抑制率变化不再明显。N,N-二乙基脲和N,N-二丙基脲对CHO细胞增殖抑制产生显著变化的浓度范围为2.5~10mg/mL,N,N-二乙基脲对HeLa细胞增殖抑制产生显著变化的浓度范围为5~10mg/mL之间, N,N-二丙基脲对HeLa细胞增殖抑制产生显著变化的浓度范围为7.5~10mg/mL之间。N,N-二乙基脲、N,N-二丙基脲对CHO细胞增殖影响几乎不存在差异,N,N-二乙基脲、N,N-二丙基脲对HeLa细胞增殖影响有一定的差异。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-9
第1章 文献综述  9-29
  1.1 本课题立项依据  9-10
  1.2 纺织品安全评价体系  10-14
    1.2.1 国外生态标准  10-13
      1.2.1.1 Oeko-Tex 100 标准  10-12
      1.2.1.2 欧盟生态标志(Eco-Label)  12
      1.2.1.3 REACH 法案  12-13
    1.2.2 国内生态标准  13-14
  1.3 纺织品与皮肤  14-18
    1.3.1 皮肤的生理学特点  14-15
    1.3.2 皮肤接触毒作用类型  15-16
      1.3.2.1 刺激性皮炎  15
      1.3.2.2 化学灼伤  15-16
      1.3.2.3 变态反应性皮炎  16
    1.3.3 纺织服装与皮肤微生态平衡  16
      1.3.3.1 皮肤微生态平衡机理  16
      1.3.3.2 纺织服装维护皮肤微生态平衡的性能  16
    1.3.4 化学品摄入皮肤的机理  16-17
    1.3.5 纺织品的安全性  17-18
      1.3.5.1 纤维材料安全性  18
      1.3.5.2 染料和印染助剂的安全性  18
  1.4 皮肤接触毒性研究方法  18-22
    1.4.1 动物实验法  18-20
      1.4.1.1 皮肤刺激性实验  18-19
      1.4.1.2 皮肤致敏性实验  19-20
    1.4.2 体外细胞毒性实验  20-22
      1.4.2.1 皮肤组织毒性检测法  21
      1.4.2.2 替代皮肤毒性检测法  21-22
    1.4.3 替代方法的应用及前景  22
  1.5 细胞活性检测方法  22-25
    1.5.1 噻唑蓝(MTT)比色法  22-23
    1.5.2 XTT 比色法  23
    1.5.3 CCK-8 法  23
    1.5.4 噻唑蓝(MTT)比色法的原理、特性及应用  23-25
      1.5.4.1 MTT 比色法的原理  23-24
      1.5.4.2 MTT 比色法的特性  24
      1.5.4.3 MTT 比色法应用  24-25
  1.6 细胞培养前处理  25-27
    1.6.1 清洗与灭菌  25-26
      1.6.1.1 干热灭菌法  25-26
      1.6.1.2 湿热灭菌法  26
      1.6.1.3 过滤除菌法  26
    1.6.2 细胞培养用液  26-27
      1.6.2.1 培养基  26
      1.6.2.2 磷酸盐缓冲液(PBS)  26
      1.6.2.3 消化液  26-27
  1.7 脂肪醇聚氧乙烯醚简介  27
  1.8 N,N-二烷基脲简介  27-29
第2章 实验部分  29-39
  2.1 实验药品及仪器  29-30
    2.1.1 实验药品  29-30
    2.1.2 实验仪器  30
  2.2 清洗、包装与灭菌  30-31
    2.2.1 玻璃器皿的清洗、包装和灭菌  30
    2.2.2 塑料用品的清洗、包装和灭菌  30-31
    2.2.3 胶塞的清洗、包装和灭菌  31
  2.3 细胞培养  31-33
    2.3.1 细胞培养用溶液的配制  31-32
      2.3.1.1 培养基的配制  31
      2.3.1.2 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制  31-32
      2.3.1.3 胰蛋白酶消化液的配制  32
      2.3.1.4 细胞冻存液的配制  32
      2.3.1.5 MTT 溶液的配制  32
    2.3.2 细胞的培养  32-33
      2.3.2.1 细胞传代  32-33
      2.3.2.2 细胞冻存  33
      2.3.2.3 细胞复苏  33
  2.4 细胞计数  33-34
    2.4.1 制备细胞悬液  33
    2.4.2 细胞计数及密度计算  33-34
  2.5 脂肪醇聚氧乙烯醚的细胞增殖抑制实验  34-36
    2.5.1 脂肪醇聚氧乙烯醚对HeLa 细胞的增殖抑制实验  34-35
      2.5.1.1 HeLa 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  34-35
      2.5.1.2 脂肪醇聚氧乙烯醚对HeLa 细胞增殖抑制实验  35
    2.5.2 脂肪醇聚氧乙烯醚对CHO 细胞增殖抑制实验  35-36
      2.5.2.1 CHO 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  35-36
      2.5.2.2 脂肪醇聚氧乙烯醚对CHO 细胞增殖抑制实验  36
  2.6 N,N-二烷基脲的细胞增殖抑制实验  36-38
    2.6.1 N,N-二烷基脲对HeLa 细胞的增殖抑制实验  36-37
      2.6.1.1 HeLa 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  36-37
      2.6.1.2 N,N-二烷基脲对HeLa 细胞的增殖抑制实验  37
    2.6.2 N,N-二烷基脲对CHO 细胞的增殖抑制实验  37-38
      2.6.2.1 CHO 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  37
      2.6.2.2 N,N-二烷基脲对 CHO 细胞增殖抑制实验  37-38
  2.7 统计学分析  38-39
第3章 结果与讨论  39-52
  3.1 脂肪醇聚氧乙烯醚对细胞增殖抑制的影响  39-45
    3.1.1 脂肪醇聚氧乙烯醚对HeLa 细胞增殖抑制的影响  39-42
      3.1.1.1 HeLa 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  39-40
      3.1.1.2 试剂浓度对HeLa 细胞增殖抑制的影响  40-41
      3.1.1.3 试剂EO 数对HeLa 细胞增殖影响  41-42
    3.1.2 脂肪醇聚氧乙烯醚对CHO 细胞增殖抑制的影响  42-45
      3.1.2.1 CHO 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  42-43
      3.1.2.2 试剂浓度对CHO 细胞增殖抑制的影响  43-44
      3.1.2.3 试剂EO 数对CHO 细胞增殖影响  44-45
  3.2 N,N-二烷基脲对细胞增殖抑制的影响  45-52
    3.2.1 N,N-二烷基脲对HeLa 细胞增殖抑制的影响  45-48
      3.2.1.1 HeLa 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  45-46
      3.2.1.2 试剂浓度对HeLa 细胞增殖抑制的影响  46-47
      3.2.1.3 试剂脂肪链长度对HeLa 细胞增殖抑制的影响  47-48
    3.2.2 N,N-二烷基脲对CHO 细胞增殖抑制的影响  48-52
      3.2.2.1 CHO 细胞增殖抑制实验试剂浓度范围的确定  48-49
      3.2.2.2 试剂浓度对CHO 细胞增殖抑制的影响  49-50
      3.2.2.3 试剂脂肪链长度对CHO 细胞增殖抑制的影响  50-52
结论  52-53
参考文献  53-56
附录  56-64
攻读硕士学位期间发表的论文  64-65
致谢  65

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