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胡椒碱对淡色库蚊幼虫及草地贪夜蛾细胞毒力作用的研究

作　者: 王佳
导　师: 诸葛洪祥
学　校: 苏州大学
专　业: 病原生物学
关键词: 胡椒碱淡色库蚊幼虫 Sf-21细胞植物源杀虫剂
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的研究胡椒碱对淡色库蚊(Culex pipiens pallens)幼虫和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda) Sf-21细胞的毒力作用和后致死作用,进一步揭示胡椒碱的作用机制及作用方式,以便进一步研究其对昆虫细胞离子通道的影响。方法测定胡椒碱对淡色库蚊Ⅳ龄幼虫的LC50,观察胡椒碱的致毒症状和后致死作用,利用改良微波Giemsa染色法对胡椒碱引起的淡色库蚊血淋巴细胞形态改变进行观察,研究胡椒碱对淡色库蚊幼虫的毒理学;胡椒碱处理Sf-21细胞后,用MTT微量酶反应比色法、改良微波Giemsa染色法检测细胞死亡率及形态学改变,用冲击式测试法检测细胞生长率及受损细胞的恢复,研究胡椒碱对Sf-21细胞毒性作用和生长抑制作用。结果(1)胡椒碱有较好的触杀活性,其对淡色库蚊Ⅳ龄幼虫的LC50值为0.368μg/L。(2)胡椒碱的典型致毒症状为:经历兴奋、痉挛、昏迷、死亡等几个阶段。(3)胡椒碱处理48h后,LC30、LC50、LC70和LC90处理组蚊虫羽化前的累积总死亡率分别为83.6%、93.8%、97.5%、99.5%和100%。存活幼虫的发育受到影响,幼虫期延长,从而导致化蛹延迟,成蚊产卵时间推迟。(4)淡色库蚊幼虫血淋巴细胞可分为5种类型:原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞和类绛血胞。胡椒碱处理后淡色库蚊幼虫血细胞出现空泡化、细胞变形、颗粒浓集。(5)胡椒碱处理24h后,对Sf-21细胞的半数毒性浓度(IC50)为95.37μg/ml,且毒性作用强度随着药物浓度增加而增强。胡椒碱浓度在10μg/ml以上时可诱发Sf-21细胞形态学改变,表现为细胞呈多形性、细

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