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黄瓜立枯病拮抗木霉菌筛选及主要生防机理研究

作　者: 田淑慧
导　师: 刘开启
学　校: 山东农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 木霉菌(Trichoderma spp.) 立枯丝核菌(Rhizoctonia solani) 生物学特性防治机理
分类号: S436.421
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

本研究将采自山东、广东、广西、北京、甘肃、云南、越南等7个省份的土样，通过平板稀释法，分离出323株木霉菌菌株；通过对峙培养、耐性测定和防治效果的比较，筛选出一株优良木霉菌，定名为T05-049；根据在MA培养基上的培养性状和分子孢子梗、小瓶梗及孢子的特征，初步鉴定为拟康氏木霉。试验中测定了T05-049的基础生物学特性。通过正交试验L₉3⁴，确定该菌株生长的最优培养基配方为：麦芽糖18g、蛋白胨6g、KH₂PO₄1g、KNO₃ 1g、VB₂ 0.2g，琼脂20g；在最优培养基上生长时，可以生长的温度范围为5～35℃，适合菌丝生长、产孢和孢子萌发的温度范围为15～30℃，最适温度是25～30℃；pH值范围为4～11，最适pH为5、6；光照与菌丝生长无关，但有利于产孢。室内盆栽试验，研究了T05—049对黄瓜苗期立枯病的防治机理。该菌株具有较强的空间、营养竞争和重寄生能力，其菌丝可以缠绕、穿插、紧贴等方式寄生于立枯丝核菌R15菌丝上，最终使菌丝断裂、解体直至死亡。该菌株能够极快地在黄瓜苗根部定殖，同时抑制R15的定殖，说明该菌株是在抑制病原菌生长的基础上防治立枯病的。 T05-049能够产生挥发性和非挥发性抗生物质来抑制R15的生长，其中起主要作用的是非挥发性抗生物质。其挥发性抗生物质的抑菌率仅为23.5％，其非挥发性抗生物质含量为0.1％时其抑菌率就达61.3％。 T05-049能够诱导黄瓜苗POD、CAT等抗氧化酶活性的提高，增加可溶性蛋白的含量，减少MDA的含量，从而减少活性氧对黄瓜苗造成的伤害，增强黄瓜苗的抗病性。该菌株诱导黄瓜苗产生抗病性的特点，在苗期更为显著。 T05-049在黄瓜苗根部的施入，使根际真菌、放线菌和优势细菌的数量明显减少（同时也促进了个别菌种数量的增加），数量明显减少的多为病原菌。通过对峙培养，进一步证明了该菌株具有较广的抑制病原菌的能力。

全文目录

中文摘要  9-11
Abstract  11-13
引言  13-29
  1.黄瓜苗期立枯病的研究进展  13-16
    1.1 黄瓜立枯病的发生概况  13
    1.2 黄瓜立枯病的症状  13
    1.3 黄瓜立枯病病原学研究  13-15
    1.4 黄瓜苗期立枯病发生的原因  15
    1.5 防治方法  15-16
  2.拮抗木霉菌的研究进展  16-27
    2.1 木霉菌的生态学特性  17-19
    2.2 木霉菌的形态学特性  19
    2.3 木霉的抑菌特点  19-20
    2.4 木霉菌主要的拮抗机制  20-26
      2.4.1 竞争作用  21
      2.4.2 重寄生作用  21-22
      2.4.3 抗生作用  22-23
      2.4.4 木霉诱导抗性  23-25
      2.4.5 毒性蛋白  25
      2.4.6 蛋白酶的作用  25-26
      2.4.7 协同拮抗作用  26
      2.4.8 促进植物生长  26
    2.5 木霉的生防作用研究展望  26-27
  3.利用木霉菌防治立枯病的应用  27-28
  4.利用木霉菌防治黄瓜苗期立枯病的意义  28-29
第一章拮抗立枯丝核菌的木霉菌菌株的筛选  29-39
  1 材料与方法  29-31
    1.1 材料  29
    1.2 试验方法  29-31
      1.2.1初筛  29-30
      1.2.2复筛  30-31
        1.2.2.1 耐性测定  30
        1.2.2.2 防治效果  30-31
      1.2.3 T05-049的鉴定  31
  2 结果与分析  31-37
    2.1 初筛  32-34
    2.2 复筛  34-36
      2.2.1 耐性的测定  34-35
      2.2.2 防治效果  35-36
    2.3 鉴定  36-37
  3.讨论  37-38
  4.结论  38-39
第二章 T05-049的基础生物学特性  39-50
  1 材料与方法  39-41
    1.1 材料  39-40
    1.2 实验方法  40-41
      1.2.1 营养对菌丝生长和产孢量的影响  40-41
      1.2.2 温度对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响  41
      1.2.3 pH值对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响  41
      1.2.4 光照对菌丝生长、产孢量的影响  41
      1.2.5 培养时间对孢子萌发的影响  41
  2.结果与分析  41-48
    2.1 不同营养对菌丝生长和产孢量的影响  41-45
    2.2 温度对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响  45-46
    2.3 pH对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响  46-47
    2.4 光照对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响  47
    2.5 培养时间对孢子萌发的影响  47-48
  3.讨论  48-49
  4.结果  49-50
第三章木霉菌株T05-049防治黄瓜立枯病的主要拮抗机制  50-72
  1、材料与方法  50-56
    1.1 材料  50-51
    1.2 方法  51-56
      1.2.1 竞争作用  51
      1.2.2 重寄生作用  51-52
      1.2.3 抗生作用  52
      1.2.4 对防御酶系及可溶性蛋白的影响  52-54
      1.2.5 根际微生物的影响  54
      1.2.6 协同拮抗作用  54-55
      1.2.7 促进植物生长  55-56
  2 结果与分析  56-67
    2.1 竞争作用  56
    2.2 重寄生作用  56-57
    2.3 抗生作用  57
    2.4 对防御酶系及可溶性蛋白的影响  57-60
    2.5 促进植物生长  60-63
    2.6 根际微生物  63-65
    2.7 协同作用  65-67
  3.讨论  67-71
  4.结论  71-72
全文小结  72-73
参考文献：  73-82
致谢  82-83
发表论文  83-84
附图：  84-89

黄瓜立枯病拮抗木霉菌筛选及主要生防机理研究

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