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NGF促进再生周围神经血管生成及机制研究

作　者: 张玉波
导　师: 伍亚民
学　校: 第三军医大学
专　业: 外科学
关键词: 神经生长因子(NGF) 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 内皮细胞(ECs) 血管生成 vWf 大鼠
分类号: R651.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

血供对于损伤周围神经的再生修复十分重要。较丰富的血供,可使损伤神经内的变性崩解轴索和髓鞘碎屑得以较快地清除,以减轻继发性炎性损害;同时为雪旺氏细胞提供营养物质,增强雪旺氏细胞的生物学功能;重建再生的微环境,这样不仅利于损伤神经的轴索再生,而且,加快再生轴索的髓鞘再形成,促进再生神经纤维的生长、成熟和神经功能的恢复。粗、长段缺损的周围神经再生修复对于血供的要求更高。用带血供材料修复周围神经缺损的方法很多,较常见的如带血管的神经移植,含有血管的神经片段外膜管桥接神经缺损,含有血管和雪旺氏细胞的外膜管桥接神经缺损等方法,尽管方法很多,但效果都不甚理想。因此,如何改善损伤周围神经再生修复过程中的血供成为广大神经科学工作者关注的问题。神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是研究较早且较深入的神经营养因子,对神经系统发育、维持神经元存活和神经损伤后的修复均有重要作用。近年来研究发现NGF对外周非神经组织(如缺血肌肉组织、角膜、脉络膜和虹膜)有较强的血管生成作用,NGF可通过促进血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达而间接地促进血管生成;甚至认为NGF具有直接促进血管生成的作用,而将NGF称作血管诱导因子;但其是否能够促进再生周围神经中的血管生成,国内外鲜见报道。我们在比较研究NGF和CNTF促周围神经再生的差异性时初步观察到NGF治疗时再生周围神经血管增多的现象,但这种作用是否确实、是否存在一定的时效和量效关系,及该血管生成作用与神经再生的关系如何,作用的机制怎样等问题,均需进行深入研究。如能解决上述问题,对拓展NGF的生物学作用和促进损伤周围神经的再生修复都具有重要的理论意义和指导作用。为此,本实验应用硅胶管来桥接大鼠10 mm坐骨神经缺损,在硅胶管内加入医用几丁糖凝胶作为NGF的缓释剂,采用HE、Holmes嗜银染色和电镜观察桥接管内各时相点的神经再生和血管生成情况;利用免疫组化的方法检测CD34(标记毛细血管)、vWf(标记较大管径的新生血管)、TrkA(NGF的受体)、VEGF等抗原的表达变化并对其进行半定量分析;用激光共聚焦扫描显微镜检测结合荧光双标观察VEGF与CD34,vWf,TrkA的共表达情况;同时探讨了NGF促血管生

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