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ATP生物发光法检测微生物总量及其自动原位分析的研究

作　者: 楼凯凯
导　师: 叶树明
学　校: 浙江大学
专　业: 生物物理学
关键词: 微生物 ATP 生物发光法自动原位检测
分类号: Q93-3
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 254次
引　用: 2次
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内容摘要

微生物广泛分布于自然界中,对生态系统的物质交换和能量流动起着不可替代的作用,同时微生物与人类健康有着密切的关系。对微生物的研究关乎整个自然界和人类社会。微生物检测技术为微生物的研究提供了有力的手段。传统的微生物检测方法费时费力,难以满足不同情况下的检测要求,而ATP 生物发光法作为一种快速、简便的微生物检测方法,在环境监测、食品卫生、生命科学、医药等领域都有广阔的发展前景。其自动原位检测技术的研究更是国内外的首创,可以解决长期连续监测和极端环境下无法进行人工检测等问题,具有重要意义。本文从ATP生物发光法的基本原理切入,系统分析了反应中的各种影响因素,包括离子和盐度、pH值、游离态ATP、温度以及荧光素酶活性,得到最佳的pH值范围为7.7～8.0,温度为25℃左右。同时分析了其他几种影响因素对反应的影响程度的大小,并提出相应的措施,去除干扰。掌握并优化ATP生物发光法,将其应用于实际水体微生物量的测量,按照淡水和海水两种情况,分别测量了西湖和海洋的水体微生物量,得到西湖水体微生物的水平分布情况和海洋水体微生物的垂直分布情况。还对赤潮的预警做了可行性研究,认为ATP生物发光法结合自动原位监测仪,可以实现赤潮的预警。最后,作为ATP生物发光法检测微生物量的进一步研究,提出一套可行的自动原位监测仪的设计方案。

全文目录

摘要  2-3
ABSTRACT  3-10
第1章综述  10-16
  1.1 引言  10
  1.2 国内外研究现状  10-12
  1.3 应用研究  12-14
    1.3.1 食品卫生领域的应用  12-13
    1.3.2 生命科学领域的应用  13
    1.3.3 医药领域的应用  13-14
    1.3.4 生态环境领域的应用  14
  1.4 存在的问题  14-16
第2章 ATP 生物发光法的检测基础  16-21
  2.1 试剂与仪器  16-18
    2.1.1 试剂  16-17
    2.1.2 仪器  17-18
  2.2 ATP提取  18-19
    2.2.1 TCA法  18
    2.2.2 加热煮沸法  18-19
  2.3 ATP检测  19-21
    2.3.1 标准曲线制作  19
    2.3.2 样品测定  19-21
第3章 ATP生物发光法的影响因素分析  21-38
  3.1 离子及盐度对反应的影响  21-29
    3.1.1 Na~+对反应的影响  22-23
    3.1.2 Mg~(2+)对反应的影响  23-24
    3.1.3 Ca~(2+)对反应的影响  24-25
    3.1.4 K~+对反应的影响  25-26
    3.1.5 盐度对反应的影响  26-29
  3.2 pH值对反应的影响  29-31
  3.3 游离态ATP对反应的影响  31-32
  3.4 温度对反应的影响  32-33
  3.5 酶活性对反应的影响  33-36
  3.6 小结  36-38
第4章 ATP生物发光法在水体微生物检测中的应用  38-49
  4.1 淡水水体微生物测量  38-43
    4.1.1 材料与方法  38-39
      4.1.1.1 采样点分布  38
      4.1.1.2 仪器与试剂  38-39
      4.1.1.3 样品预处理  39
    4.1.2 西湖微生物整体分布  39-41
    4.1.3 进水口分析  41-42
    4.1.4 养鱼池对水质的影响  42-43
  4.2 海洋水体微生物测量  43-46
    4.2.1 采样与样品处理  43-44
    4.2.2 海洋微生物垂直分布情况  44-46
  4.3 赤潮预警可行性研究  46-47
    4.3.1 赤潮概述  46
    4.3.2 可行性研究  46-47
  4.4 小结  47-49
第5章自动原位监测仪的设计  49-52
  5.1 仪器的结构设计  49-50
  5.2 仪器的应用前景  50-52
结论  52-54
参考文献  54-58
附录1 攻读学位期间参与的项目及发表的论文  58-59
附录2 相关图片  59-61
致谢  61

ATP生物发光法检测微生物总量及其自动原位分析的研究

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